一、脑卒中后痴呆患者的血浆CCK-8变化及临床意义（论文文献综述）
周东蕊[1]（2021）在《血塞通对MCAO大鼠和OGD/R损伤SH-SY5Y细胞LINGO-1，EGFR，PI3K/AKT通路以及PTEN和GSK-3β的研究》文中研究指明研究目的:1.观察血塞通注射液对大鼠大脑中脉闭塞（MCAO）28天神经功能的影响,探究血塞通对损伤皮层LINGO-1,EGFR,PI3K/AKT通路以及PTEN和GSK-3β的调节作用。2.观察血塞通注射液对体外培养SH-SY5Y细胞氧糖剥夺再灌注（OGD/R）损伤的保护作用,验证血塞通注射液对OGD/R损伤的SH-SY5Y细胞PI3K/AKT通路以及PTEN和GSK-3β的调节作用。研究方法:1.采用改良的Longa法对SD大鼠进行MCAO模型的制备,假手术组大鼠只进行皮肤切开以及钝性分离血管和神经,不插入栓线。大鼠MCAO模型的成功建立评价方法选用TTC染色法。2.根据术后Longa评分将手术组大鼠随机分为模型组,血塞通小剂量组,血塞通大剂量组和尼莫地平组（即阳性药物组）。假手术组和模型组注射同等剂量的生理盐水,其余组别给与相对应的药物治疗。术后1-28天,每日清晨给药前对大鼠进行称重,根据mNSS神经功能评分表进行评分。评价血塞通对大鼠MCAO术后不同时间点（7天,14天和28天）神经功能和体重恢复的疗效。MCAO术后28天,将所有大鼠麻醉后断头取脑,采用HE染色观察大鼠大脑皮层的病理变化,采用Western blot法检测皮层梗死侧的SYN和PSD-95的蛋白表达变化,探索血塞通注射液对皮层梗死区的神经保护作用。采用qRT-PCR、免疫组织化学（IHC）和Western Blot检测MCAO术后28天大鼠大脑皮层LINGO-1,EGFR以及PI3K/AKT的mRNA和蛋白表达,探索血塞通的神经保护机制。3.采用qRT-PCR和Western Blot检测MCAO术后28天大鼠大脑皮层PTEN和GSK-3β的mRNA和蛋白表达,进一步探索血塞通的神经保护机制。4.体外培养SH-SY5Y细胞,CCK-8法确定最佳缺氧时间,建立OGD/R损伤SH-SY5Y细胞模型,CCK-8法确定血塞通和bpV的最适药物浓度。将SH-SY5Y细胞随机分为正常组,模型组,血塞通组,bpV组以及血塞通+bpV组等5个组别,按照不同组别给与相对应的药物,正常组给与无血清的EBSS液,模型组给与无糖的Earle’s液。镜下观察血塞通对OGD/R损伤SHSY-5Y细胞生长状态的影响。采用qRT-PCR和Western Blot检测OGD/R损伤SH-SY5Y细胞的PI3K/AKT以及PTEN和GSK-3β的mRNA和蛋白表达对体内实验进一步验证,观察当使用bpV时,PTEN及其下游的PI3K/AKT通路、GSK-3β mRNA和蛋白的表达情况。研究结果:1.TTC染色显示:假手术组大鼠右脑为均一的红色,表明脑组织并未损伤;手术组大鼠由于大脑右侧被梗塞而出现广泛的白色,表明MCAO可诱导大鼠右侧脑组织梗死。研究结果证明大鼠MCAO模型成功建立。2.各组大鼠的体重在造模前未见显着的差异（P>0.05）;在MCAO术后第7天和第14天,各组大鼠体重均明显低于假手术组（P<0.05或者P<0.01）;术后第28天,除模型组外,各药物治疗组大鼠的体重与假手术组没有明显差异（P>0.05）。术后第14天的假手术组大鼠的体重高于第7天假手术组的体重,余组别两个时间点比较未见明显差异（P>0.05）;而第28天各组大鼠的体重均显着高于第14天相同组别的大鼠（P<0.01）。手术组各组大鼠苏醒后EZ-Longa评分组间未见明显差异（P>0.05）。在第7天的mNSS评分中,血塞通大剂量组明显低于模型组（P<0.05）。药物治疗后14天,血塞通治疗组（包括小剂量和大剂量）和尼莫地平组大鼠的mNSS评分与模型组相比显着降低（P<0.05）。而药物治疗后28天,血塞通治疗组大鼠的mNSS评分与模型组相比明显降低（P<0.05或P<0.01）;血塞通大剂量组在降低大鼠的mNSS评分方面显着优于血塞通小剂量组和尼莫地平组（P<0.05）。这说明血塞通治疗可长期缓解MCAO大鼠的神经功能障碍,且具有剂量依赖性。MCAO术后相同组别的mNSS评分在不同时间点的比较显示:第7天和第14天同一组别的mNSS评分无显着差异（P>0.05）;除尼莫地平组外,第28天的mNSS评分显着高于同一组别第14天的mNSS评分（P<0.05）。MCAO术后28天,HE染色结果显示:假手术组大鼠的脑组织形态和细胞结构完整。模型组大鼠脑组织呈大面积损伤,组织着色较浅,神经细胞坏死、核固缩、深染;治疗组大鼠的脑组织也出现一定的损伤,但是和模型组相比,损伤程度较轻,神经细胞的数量也多;与血塞通小剂量组和尼莫地平组相比,血塞通大剂量组的脑组织结构更完整,神经细胞数量亦明显增多。MCAO术后28天,与模型组相比较,各治疗大鼠的PSD-95蛋白表达显着升高（P<0.01）;对各治疗进行比较发现,血塞通大剂量组在提高PSD-95表达方面显着优于血塞通小剂量组和尼莫地平组（P<0.05或P<0.01）。与模型组相比,血塞通大剂量组和尼莫地平组可显着提高大鼠大脑皮层SYN蛋白的表达（P<0.05或P<0.01）;与血塞通小剂量组相比,血塞通大剂量组在提高SYN蛋白表达方面具有显着的优势（P<0.05）。MCAO术后28天,qRT-PCR结果显示:各组LINGO-1,EGFR,PI3K以及AKT mRNA表达无显着变化（P>0.05）。IHC结果显示:LINGO-1的阳性颜色为深棕色,假手术组大鼠脑组织LINGO-1的阳性表达较少;各治疗组大鼠脑组织LINGO-1的阳性表达显着低于模型组的阳性表达（P<0.01）;而对各治疗组之间皮层LINGO-1的阳性表达进行比较发现,组间未见显着差异（P>0.05）。各组大鼠脑组织P-EGFR,P-PI3K以及P-AKT的阳性颜色均为深棕色,假手术组大鼠脑组织P-EGFR,P-PI3K以及P-AKT呈低表达;各治疗组大鼠大脑皮层P-EGFR,P-PI3K以及P-AKT的表达显着高于模型组（P<0.01）;对各治疗组之间的P-EGFR,P-PI3K以及P-AKT的表达进行比较发现,组间未见显着差异（P>0.05）。Western blotting结果显示:各治疗组大鼠的Lingo-1蛋白的相对表达相较于模型组显着下降（P<0.01）,接近正常水平;而各治疗组之间进行比较,Lingo-1的表达未见明显差异（P>0.05）。各治疗组的P-EGFR,P-PI3K以及P-AKT高于模型组（有趋势,或P<0.05,或P<0.01）;治疗组之间比较无明显差异（P>0.05）。3.MCAO术后28天,qRT-PCR结果显示:除血塞通大剂量组的大鼠脑组织的PTEN mRNA表达明显高于假手术组的mRNA（P<0.05）,其余各组大鼠脑组织的PTEN mRNA表达组间比较未见显着差异（P>0.05）;各组大鼠脑组织的GSK-3β mRNA表达组间亦未见显着差异（P>0.05）。Western blotting结果显示:与模型组相比,各治疗组的P-PTEN和P-GSK3β相对蛋白表达水平显着升高（P<0.05或P<0.01）;而各治疗组之间的P-PTEN和P-GSK3β相对蛋白水平无明显差异（P>0.05）。4.CCK-8法检测SH-SY5Y细胞的最佳缺氧时间为7 h;血塞通和bpV对OGD/R损伤的SH-SY5Y细胞的最适药物浓度分别为20μg/ml和1μmol/L。通过镜下观察血塞通,bpV以及血塞通+bpV对OGD 7 h/R 24 h培养的SH-SY5Y细胞生长状态的影响发现,血塞通组、bpV组以及血塞通+bpV组的贴壁细胞数量较模型组多,大部分细胞呈多边形或梭形,部分细胞突触缩短,但大部分细胞突触仍存在,各治疗组之间的细胞形态未见明显的差异。SH-SY5Y细胞OGD 7h/R24 h培养后,qRT-PCR结果显示:正常组,模型组,血塞通组,bpV组以及血塞通+bpV组细胞的PI3K,AKT,PTEN和GSK-3β mRNA的水平未见显着差异（P>0.05）。Western blotting检测结果显示,与模型组相比,各治疗组大鼠大脑皮层的 P-PI3K/PI3K,P-AKT/AKT,P-PTEN/PTEN 以及 P-GSK-3β/GSK-3β蛋白水平显着升高（P<0.05,或P<0.01）;各治疗组之间的P-PI3K/PI3K,P-AKT/AKT,P-PTEN/PTEN以及P-GSK-3β/GSK-3β蛋白水平比较未见明显差异（P>0.05）。研究结论:1.血塞通可以长期缓解MCAO大鼠的脑组织损伤并促进神经重塑和再生从而增加MCAO术后大鼠的体重,改善MCAO大鼠的神经功能。2.血塞通发挥的神经保护作用机制包括抑制LINGO-1表达,激活EGFR和PI3K/AKT信号通路,抑制PTEN的表达进一步激活PI3K/AKT通路,从而抑制下游GSK-3β的活性,长期促进突触的重塑和再生。3.血塞通可以缓解OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞损伤,通过抑制PTEN的活性,激活其下游PI3K/AKT/GSK-3β信号通路,发挥长期的神经保护作用。
王哲义[2]（2021）在《丹参酮ⅡA磺酸钠调控HIF1α/mTOR介导细胞自噬干预缺血性脑卒中的机制研究》文中进行了进一步梳理目的:缺血性脑卒中（cerebral ischemic stroke,CIS）具有高患病率、高复发率、高致残率和致死率的特点。丹参酮ⅡA磺酸钠是丹参脂溶性成分丹参酮ⅡA经磺化后的水溶性物质,治疗缺血性脑卒中疗效确切,但作用机制尚未完全阐明。本研究运用网状Meta分析系统评价丹参类中药注射剂治疗急性缺血性脑卒中的有效性和安全性。通过网络药理、蛋白组学技术探究丹参酮ⅡA可能作用机制,并在大鼠缺血/再灌注模型和PC12神经细胞氧糖剥夺/复氧模型中对可能的靶点和机制进行验证。方法:（1）计算机检索中国期刊全文数据库（CNKI）、维普数据库（VIP）、万方数据库、PubMed、Cochrane Library,检索起止时间为建库至2021年2月。由两位研究员独立筛选文献、提取资料并按照Jadad量表对文献进行质量评价,采用Stata 16.0进行统计分析。（2）使用TCMSP数据库检索丹参的活性成分及作用靶点,在GeneCards、NCBI和OMIM数据库中获取缺血性卒中的靶点,并将药物和疾病交集后的靶点输入STRING数据库,构建蛋白质相互作用网络,利用Cytoscape3.8.2软件构建药物-化合物-作用靶点-疾病网络。通过Bioconductor进行GO功能富集和KEGG通路分析。（3）采用改良的线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注损伤（MCAO/R）模型,将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参酮ⅡA磺酸钠组。根据神经功能评分（Z-Longa）、TTC染色及HE染色评价MCAO/R模型及药物疗效。（4）使用DIA定量蛋白组学分析各组大鼠脑缺血半影区蛋白表达的情况,根据|log2FC|≥0.58且p<0.05的标准筛选差异蛋白;利用R软件绘制火山图和差异蛋白聚类分析热图;运用STRING数据库,构建差异蛋白的互作（PPI）网络;利用DAVID、ClueGO等工具对差异蛋白进行GO富集分析和KEGG信号通路分析,并用平行反应监测技术（PRM）的方法验证蛋白表达。（5）利用嗜铬细胞瘤PC12细胞系构建氧糖剥夺复氧（OGD/R）模型,同时给予不同浓度（1μM、5μM、10μM、20μM、40μM）丹参酮ⅡA磺酸钠干预3h、6h、12h,使用CCK-8法检测细胞活力,确定给药剂量和时间,运用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测蛋白组学预测的可能靶点。结果:（1）共纳入160项研究,总样本量18079例,共纳入7种中药注射剂和8种治疗措施,包括丹红注射剂联合常规治疗（DH+CT）、丹参注射剂联合常规治疗（DS+CT）、丹参川芎嗪注射剂联合常规治疗（DSCXQ+CT）、注射用丹参多酚酸联合常规治疗（DSDFS+CT）、复方丹参注射剂联合常规治疗（FFDS+CT）、注射用丹参多酚酸盐联合常规治疗（SI+CT）、丹参酮ⅡA磺酸钠注射剂联合常规治疗（STS+CT）和常规治疗（CT）。网状Meta分析结果显示,在总有效率方面,累积概率排序为:DSDFS+CT（93.0%）>DH+CT（80.5%）>STS+CT（66.7%）>DSCXQ+CT（66.4%）>SI+CT（50.0%）>DS+CT（26.7%）>FFDS+CT（16.7%）>CT（0.1%）。在 NIHSS评分方面,累积概率排序为:STS+CT（95.5%）>DH+CT（80.9%）>DSCXQ+CT（70.1%）>SI+CT（64.7%）>DSDFS+CT（42.0%）>FFDS+CT（24.4%）>DS+CT（20.1%）>CT（2.4%）。在 Barthel 指数方面,DH+CT（76.2%）>DSCXQ+CT（74.3%）>STS+CT（64.1%）>DSDFS+CT（62.2%）>FFDS+CT（51.8%）>SI+CT（46.0%）>DS+CT（21.7%）>CT（3.8%）。（2）从丹参中共筛选出65个活性成分和108个对应靶点,以及缺血性卒中相关靶点2558个,取交集后获得靶点87个,其中度值大于50的靶点有6个,包括AKT1、IL6、FOS、VEGFA、MAPK1、EGFR,即本研究的核心靶点。GO功能富集分析得到GO条目124个（p<0.05）,KEGG通路富集分析筛出134条信号通路（p<0.05）,以PI3K/AKT、HIF-1信号通路所占靶点数目最多。构建的药物-化合物-作用靶点-疾病网络显示,丹参酮ⅡA等活性化合物在整个网络中发挥着关键作用。（3）与假手术组相比,MCAO/R模型大鼠神经功能评分显着升高,TTC染色显示梗死范围扩大,HE染色显示大脑皮层及纹状体区域组织变性明显。丹参酮ⅡA磺酸钠治疗可降低神经功能评分,缩小梗死面积,减轻空泡样改变及胞核皱缩等病变。（4）蛋白组学在大鼠脑组织中共鉴定出5880个蛋白,其中模型组与假手术组差异蛋白为423个。经丹参酮ⅡA磺酸钠干预后,与模型组相比,共有285个差异蛋白。将三个组别进行整合分析,共有127个有表达趋势的差异蛋白,这些差异蛋白GO富集主要参与缺氧反应、神经元凋亡过程、钙离子转运等生物学过程;KEGG通路主要富集在PI3K/AKT信号通路、HIF-1信号通路等通路。PPI网络获得Alb、mTOR、Dync1h1、Stxbp1、Cltc、Sptan1等核心差异蛋白。mTOR、PI3K/AKT信号通路、HIF-1信号通路是调控自噬的上游信号,将上述通路的关键靶点及自噬相关蛋白进行PRM验证,结果显示与正常组比较,模型组的mTOR和p62蛋白表达显着下降（p<0.05）,HIF-1α、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、PI3K和AKT1蛋白表达无统计学意义（p>0.05）。经过丹参酮ⅡA磺酸钠治疗后,HIF1α和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达量明显下降（p<0.05）,p62蛋白表达显着升高（p<0.05）,mTOR、PI3K和AKT1表达差异无统计学意义（p>0.05）。（5）体外研究中CCK-8结果显示,与OGD/R模型组相比,丹参酮ⅡA磺酸钠1μM、5μM的给药浓度在3h、6h、12h等不同给药时间对细胞活力均无显着影响;而10μM、20μM和40μM的丹参酮ⅡA磺酸钠在各个给药时间均表现出对PC12细胞的保护作用,且依赖给药时间和药物浓度呈梯度增强,差异具有统计学意义（p<0.05）。RT-qPCR显示,与对照组相比,OGD/R模型组HIF1α、Beclin1、LC3的mRNA相对表达量显着增多（p<0.01）,而mTOR的mRNA相对表达量显着减少（p<0.01）;与OGD/R组相比,丹参酮ⅡA磺酸钠干预后HIF1α、Beclin1、LC3的mRNA相对表达量显着减少（p<0.01）,而mTOR的mRNA相对表达量显着增加（p<0.01）。结论:根据网状Meta分析结果,丹参酮ⅡA磺酸钠注射液在改善患者NIHSS评分方面有优势;网络药理学筛选出丹参酮ⅡA可能是丹参主要活性化合物,并且经蛋白组学预测其磺化后可能作用于mTOR等核心靶点,参与调节PI3K/AKT、HIF-1等信号通路,发挥抑制细胞凋亡、抗炎、调节自噬等作用;体内研究发现丹参酮ⅡA磺酸钠可能通过HIF-1信号通路,作用于mTOR等靶点,抑制细胞自噬,改善MCAO/R模型大鼠神经功能缺损,减小脑梗死面积,减轻脑组织损伤;体外研究显示丹参酮ⅡA磺酸钠可能通过HIF-1途径上调mTOR表达,抑制细胞自噬,发挥神经细胞的保护作用。
蔺文娟[3]（2021）在《LIPCAR在急性脑梗死患者血浆中的表达及调控SH-SY5Y细胞凋亡的初步研究》文中研究指明近些年,脑卒中（stroke）已成为导致我国城镇居民死亡的首位疾病,发病人群逐渐呈现年轻化趋势,给患者家庭和社会带来了巨大的精神压力和经济负担。其中,急性缺血性脑卒中（acute ischemic stroke,AIS）占全部卒中的70%左右。目前,针对AIS比较有效的治疗方法是重组组织纤溶酶原激活剂（Recombinant human Tissue-type Plasiminogen,rt-PA）静脉溶栓和机械取栓切除术,但这两种治疗时间窗狭窄,分别在患者发病的4.5h和8h内有效。因此,寻找新的治疗靶点和策略对改善脑卒中患者预后至关重要。越来越多的研究证实多种长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）在AIS中表达异常且参与缺血性细胞损伤,预测心脏重塑的基因间长链非编码RNA（long intergenic noncoding RNA predicting cardiac remodeling,LIPCAR）在多种心血管疾病中表达异常,且在疾病预后中具有较好的预测价值。然而,关于LIPCAR在AIS患者中的表达变化及其作用尚不清楚。本研究拟通过临床研究探讨LIPCAR在AIS中的表达及与临床特征的关系,通过细胞实验初步探讨LIPCAR在氧糖剥离（Oxygen and glucose deprivation,OGD）诱导的神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y损伤中的作用。本文通过两部分的实验对LIPCAR参与调节AIS神经功能损伤的作用进行了探索和阐述。（1）临床研究:采用荧光定量PCR检测AIS患者血浆中LIPCAR的表达水平,并分析与临床指标、TOAST分型之间的关系;（2）细胞实验:建立OGD模型,采用荧光定量PCR检测OGD条件下SH-SY5Y细胞中LIPCAR表达水平变化,利用si RNA干扰技术敲低SH-SY5Y细胞中LIPCAR表达水平,采用CCK-8、克隆球形成实验及流式细胞术分别检测敲低LIPCAR对SH-SY5Y细胞及OGD诱导的SH-SY5Y细胞增殖和凋亡的影响。结果表明,AIS患者血浆LIPCAR表达水平显着高于对照组（P<0.05）,CE患者LIPCAR表达水平较LAA患者明显升高;CE患者血浆LIPCAR表达水平与入院NIHSS和m RS评分均呈显着正相关,相关系数分别为0.695和0.639（P<0.05）;相比于CE,LAA患者LIPCAR表达水平与入院NIHSS和m RS评分相关性较弱,相关系数分别为0.434和0.367（P<0.05）;在OGD诱导不同时间的SH-SY5Y细胞中LIPCAR表达水平均升高,在OGD诱导24h时LIPCAR表达量变化差异最大;敲低LIPCAR能够促进OGD诱导的SH-SY5Y细胞增殖,抑制OGD诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。基于以上结果,我们得出:AIS患者血浆LIPCAR表达水平的升高与神经功能缺损及残障程度有关,提示LIPCAR水平可能作为AIS患者病情严重程度的一个因素;不同TOAST分型（LAA组与CE组）患者血浆LIPCAR水平之间的差异提示LIPCAR在AIS不同亚组中可能发挥不同指导意义;敲低LIPCAR能够促进OGD诱导的SHSY5Y细胞增殖,抑制OGD诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,提示LIPCAR可能通过调节神经细胞增殖和凋亡影响神经功能损伤。总之,本研究的结果为探索新的AIS的分子诊断和治疗的潜在标志物提供了理论依据,具有重要的研究价值。
刘晔[4]（2021）在《头穴丛刺结合认知训练治疗卒中后轻度认知障碍的临床研究》文中研究说明目的:观察头穴丛刺结合认知训练和单纯认知训练两种方案治疗卒中后轻度认知障碍（PSMCI）的临床疗效,对比两种方案对PSMCI患者治疗前后的MoCA、MMSE评分和Barthel指数评分的影响,以期为PSMCI治疗方案的优化选取提供一定的临床证据。方法:将符合标准的44例PSMCI患者随机分为试验组（22例）和对照组（22例）。试验组采用头穴丛刺结合认知训练治疗,患者取仰卧位或坐位,选取于氏头针分区中的顶区、额区和颞区,顶区、额区各刺入五针,颞区刺入三针,针刺方向为向后刺入1-1.5寸,针后捻转,频率为每分钟200次左右,所有的针共捻转3分钟,留针30min后进行认知训练。认知训练方法参照《认知训练中国专家共识》和《作业疗法》中有关认知训练的部分,每次训练30min。对照组采用与试验组相同的认知训练方案。治疗频率为每隔1-2天治疗1次,每周治疗3次,持续治疗4周。分别于治疗前、治疗4周后对两组患者进行MoCA、MMSE量表和Barthel指数的测评,运用SPSS 25.0对数据进行统计分析,观察两种方案治疗PSMCI的有效性。结果:治疗过程中试验组脱落1例,对照组脱落2例,最终试验组有21例完成治疗,对照组有20例完成治疗,共有41例纳入统计分析。1.MoCA评分比较:组内比较,两组治疗后MoCA总分较治疗前均有升高,差异均具有统计学意义（P<0.05）;其中,两组治疗后MoCA量表中的视空间与执行功能、注意力、语言、延迟回忆和定向力评分较治疗前均有升高,差异均具有统计学意义（P<0.05）。组间比较,试验组治疗后MoCA总分较对照组改善明显,差异具有统计学意义（P<0.05）;其中,试验组治疗后MoCA量表中的视空间与执行功能、注意力、语言和延迟回忆评分较对照组均改善明显,差异均具有统计学意义（P<0.05）。2.MMSE评分比较:组内比较,两组治疗后MMSE评分较治疗前均有升高,差异均具有统计学意义（P<0.05）;组间比较,试验组治疗后MMSE评分较对照组改善明显,差异具有统计学意义（P<0.05）。3.Barthel指数评分比较:组内比较,两组治疗后Barthel指数评分较治疗前均有升高,差异均具有统计学意义（P<0.05）;组间比较,试验组治疗后Barthel指数评分较对照组改善明显,差异具有统计学意义（P<0.05）。4.总有效率比较:试验组治疗PSMCI的有效率为90.48%,对照组治疗PSMCI的有效率为70%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1.头穴丛刺结合认知训练和单纯认知训练治疗PSMCI均有效,头穴丛刺结合认知训练的临床总疗效优于单纯认知训练;2.头穴丛刺结合认知训练和单纯认知训练均可改善PSMCI患者的认知功能和日常生活能力,两种治疗方案均可提高PSMCI患者的MoCA、MMSE和Barthel指数评分;头穴丛刺结合认知训练在改善PSMCI患者的MoCA、MMSE和Barthel指数评分方面优于单纯认知训练;3.头穴丛刺结合认知训练和单纯认知训练均可改善PSMCI患者的视空间与执行功能、注意力、语言、延迟回忆和定向力,头穴丛刺结合认知训练在改善PSMCI患者的视空间与执行功能、注意力、语言和延迟回忆方面优于单纯认知训练;4.临床可采用头穴丛刺结合认知训练的方案治疗PSMCI以提高临床疗效。
殷孟兰[5]（2021）在《地龙提取物通过调节小胶质细胞极化促进脑微血管内皮细胞血管新生作用及机制研究》文中提出缺血性中风具有较高的致残率和致死率,其治疗的关键是促进缺血区域脑血流的恢复。建立侧支循环是快速改善脑血流的方式之一,同时,良好的侧枝循环与预后密切相关,可降低出血转化风险。血管新生属于第三级侧枝循环。小胶质细胞参与调节新血管的形成。在缺血性中风后,小胶质细胞迅速激活,大量表达促炎性细胞因子,引发血管的快速崩解,还可与中枢神经系统中的许多其他细胞相互作用,以双向方式影响脑内皮细胞功能并促进血管新生,参与组织修复。因此,通过促进小胶质细胞向修复表型转化,可能是脑中风疾病的一种治疗策略。现代药理研究表明,中药地龙具有抗血小板聚集、抗炎等作用,在中风、血栓等引起的脑损伤的治疗中发挥重要作用。本研究旨在探讨地龙提取物对于小胶质细胞的表型转化作用以及对血管新生的影响,为地龙的临床用药提供实验依据。目的:1探究地龙提取物抑制小胶质细胞炎症反应以及促进表型转化作用及机制。2探究地龙提取物通过刺激小胶质细胞极化而发挥促血管新生作用及机制。方法:1体外培养BV-2细胞,通过LPS诱导建立炎症模型,同时加入地龙提取物干预。NO试剂盒、CCK-8试剂盒筛选适合药物浓度;免疫荧光法检测CD16的蛋白表达情况;活性氧检测试剂盒检测ROS的表达情况;ELISA法检测细胞培养液中IL-1β、TNF-α、IL-6的分泌情况;Western Blot法检测IL-1β的蛋白表达情况;RT-PCR法检测IL-1β、TNF-α、i NOS的m RNA表达情况;免疫荧光法检测CD206的蛋白表达情况;ELISA法检测细胞培养液中IL-10、VEGF的分泌情况;Western Blot法检测IL-10、TGF-β的蛋白表达情况;RT-PCR法检测IL-10的m RNA表达情况;Western Blot法检测AKT、NF-κB的磷酸化水平。2体外培养人脑微血管内皮细胞HCMEC/D3,通过建立缺氧复氧模型模拟缺血再灌注损伤,在复氧过程中加入地龙提取物处理的小胶质细胞条件培养液。CCK-8试剂盒检测脑微血管内皮细胞增殖情况;划痕法检测脑微血管内皮细胞迁移情况;Matrigel成管法检测脑微血管内皮细胞小管形成情况;Western Blot法检测VEGF、MMP-9、Ang-1、Ang-2、p-Tie-2的蛋白表达情况。结果:1地龙提取物可显着抑制LPS诱导的M1型小胶质细胞标志物CD16的蛋白表达（P<0.05）,降低炎性因子NO、ROS、IL-1β、TNF-α、IL-6的释放（P<0.05）,降低IL-1β的蛋白以及TNF-α、i NOS的m RNA表达水平（P<0.05）。地龙提取物能显着升高M2型小胶质细胞标志物CD206的蛋白表达（P<0.05）,能显着升高抗炎因子IL-10、VEGF的释放（P<0.05）,显着升高TGF-β的蛋白表达水平（P<0.05）;升高IL-10的m RNA及蛋白表达水平（P<0.05）,显着降低AKT、NF-κB的磷酸化水平（P<0.05）。2地龙提取物处理的小胶质细胞条件培养液能显着促进脑微血管内皮细胞增殖、迁移能力（P<0.05）;能显着增加管长以及分支点数目（P<0.05）;能显着上调脑微血管内皮细胞VEGF、MMP-9、Ang-1、p-Tie-2的蛋白表达水平（P<0.05）,降低Ang-2的蛋白表达水平（P<0.05）。结论:1地龙提取物可抑制LPS诱导的M1型小胶质细胞炎症反应,促进M2型小胶质细胞抗炎因子的表达,其机制可能与抑制AKT/NF-κB通路有关。2地龙提取物可通过调节小胶质细胞极化,促进脑微血管内皮细胞增殖、迁移及管形成,其机制可能与激活Ang-1/Tie-2通路有关。
姜海伟[6]（2021）在《基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究》文中指出目的1.通过对缺血性卒中后认知障碍（PSCI）相关“毒邪”进行具体分类,了解各类毒邪的临床分布特征及总体特性,初步分析黄连解毒汤用于PSCI治疗的可行性。2.基于“毒损脑络”理论,通过黄连解毒汤早期干预PSCIND患者,分析其对认知功能、日常生活能力、实验室指标、中医证候评分的疗效作用,并了解PSCI毒邪的动态变化特点。3.通过实验研究探讨黄连解毒汤干预PSCI的应用时机及部分相关机制,并进一步讨论“毒损脑络”理论对于PSCI病机的合理性。方法1.参考大数据分析结果及“SDSVD量表”中的症状要素,对入选的123例PSCI患者,参考“一般病证+严重、秽浊、迁延邪气”原则制定“PSCI中医毒邪症状要素表”并进行“毒邪”分类,并采用“SDSVD量表”进行中医辨证分型,分析各类毒邪与各中医证型、非特异性症状、发病危险因素、实验室检查（CRP、NSE、D-D、FIB、Hcy）、TOSAT分型、影像学特征（侧支代偿、梗死部位、脑灌注）及认知功能等方面的分布特征及相关性,并从毒邪相兼情况及热性症状存在情况,评价PSCI相关“毒邪”分类方法的临床基础,分析毒邪的共同特性。分布率的比较采用?2检验,相关性分析采用Pearson相关性及Logistic回归分析。2.将60例PSCIND患者随机分为两组,对照组29例行西医基础治疗,治疗组31例加用黄连解毒汤,比较两组治疗前与治疗后1周、1月、3月、6月的MMSE、Mo CA、NIHSS、ADL、中医证候评分,比较两组治疗前与治疗后1周、1月的CRP、NSE、D-D、FIB、Hcy值,对治疗后1月、6月的疗效进行相关因素分析,总结分析“毒邪”的动态变化特点。计数资料根据方差检验情况行t检验或秩和检验,疗效相关性分析采用二元Logistic回归分析。3.将多发性脑梗死动物模型随机分为5组:假手术组、24h模型对照组、7d模型对照组、24h黄连解毒汤组、7d黄连解毒汤组。给药28天后对比观察其水迷宫检测结果以了解其认知功能,光镜观察梗死及周围区病理,CD34标记MVD,WB法测Notch信号通路Notch1、Jagged2、Hes1、Stat3蛋白及VEGF蛋白含量,ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-β、IL-4、IL-10表达情况。各组之间的比较采用单因素方差（one-way ANOVA）分析。结果1.据“PSCI中医毒邪症状要素表”毒邪分类为热毒、痰毒、瘀毒、腑滞浊毒、正虚蕴毒。经Pearson相关性检验,各中医证型与各毒邪分布具有线性相关。Logistic回归分析发现,热毒与无多次脑梗死、无高血压、有糖尿病、侧支代偿差、CRP升高、嗜睡相关;痰毒与卒中到PSCI时间短、高脂血症、侧支代偿差、NSE升高相关;瘀毒与有高血压、吸烟、饮酒、小血管或前循环大血管病变、D-D及FIB升高有关;腑滞浊毒与侧支代偿差、CRP升高、嗜睡有关;正虚蕴毒与卒中到PSCI时间短、Hcy升高有关。整体毒邪与侧支代偿差、卒中到PSCI时间短、CRP升高、Hcy升高有关。各类“毒邪”相互交织,热象存在率平均达79.60%,提示各类“毒邪”存在共性及整体统一性。2.黄连解毒汤治疗PSCIND,在MMSE及Mo CA评分方面治疗组起效更早,可显着提高ADL评分（p<0.05）。对热毒内盛、痰浊阻络、腑滞浊留、气血不足证候评分可在治疗早期产生更积极作用（p<0.05）,可防阴虚阳亢证进一步加重。治疗组在CRP、NSE、D-D方面的改善作用更明显（p<0.05）。二元Logistic回归分析发现,治疗后1月有效性与采用黄连解毒汤,降低热毒内盛评分及清除热毒相关,同时与CRP、NSE值降低、ADL值降低相关。治疗后6月有效性与采用黄连解毒汤、总体毒邪被清除ADL值降低有关。3.动物实验研究结果,在认知功能行为学方面24h及7d黄连解毒汤组定位航行及空间探索能力优于各模型对照组（p<0.05）,24h黄连解毒汤组优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。24h黄连解毒汤组梗死及周围区存活细胞密度相对较高。各黄连解毒汤组在大脑皮层Notch1、Jagged2、Hes1、STAT3蛋白及IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10表达改善作用均优于各模型对照组（p<0.05）。24h黄连解毒汤组在Hes1蛋白、IL-6、IL-4的表达优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。各黄连解毒汤组与对照模型组VEGF表达无明显差异（p>0.05）。24h黄连解毒汤组脑组织MVD显着优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。结论1.对毒邪的分类研究发现,各类毒邪在中医辨证分型、非特异性症状、TOSAT分型、实验室指标、影像学特征方面的分布具有一定的趋向性和相关性。多数毒邪相互交织存在,多数存在热性症状,具有整体统一性,采用黄连解毒汤早期干预PSCI具有可行性。2.采用黄连解毒汤干预PSCICN患者可对患者血CRP、NSE、D-D等及中医证候评分产生积极影响,可改善患者认知功能;黄连解毒汤对其整体毒邪具有清除作用,不单纯局限于热毒。其毒邪动态变化特点进一步反应了毒邪的整体性,也反应了随着病情发展进行“辨证论治”的必要性。3.在缺血性卒中急性期,尽早使用黄连解毒汤可减轻多发性脑梗死动脉模型大鼠的认知功能行为学损害,其部分机制是通过抑制Notch信号通路的激活、调节炎性因子及改善梗死周围区域微循环而实现的。“毒损脑络”理论反应了PSCI的病机特点,也反应了PSCI的“防”与“治”的整体一致性。
化涵毅[7]（2021）在《芫根对局灶性脑缺血缺氧损伤的保护作用及其机制研究》文中提出芫根（Brassica rapa L.,Turnip）,十字花科芸薹属植物,是一类生长在青藏高原的食、药、饲多用途植物。据藏医药领域公认的经典名着《医方四续》中记载,芫根具有味甘性温、清热解毒和滋补增氧之功效。现代科技的进步和生活水平的提高延长了人类的平均寿命,但却没有改善脑卒中引起的致死率和致残率,人口的增长和老龄化反而跃升为全球脑卒中病人增加的主要原因。由于一直缺乏有效的脑卒中治疗措施,目前认为预防是最好的保护办法,因此各类膳食指南或功能性食品应运而生,旨在降低脑卒中的发生率。本文以芫根抗缺氧为研究依据,建立体内大脑中动脉栓塞再灌注模型（Middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R）和体外糖氧剥夺再灌注模型（Oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）,初探芫根对缺血缺氧损伤的保护作用,通过逐级分离,首次获得一种功能性单体,并对其糖氧剥夺损伤的保护能力及作用机理进行了系统性研究。研究结果如下:1.利用小鼠MCAO/R模型,初步证实芫根有助于恢复脑损伤小鼠的行为学能力,并有效减少脑萎缩体积;进一步通过体外实验证明,芫根显着提高神经元OGD/R损伤后的细胞活力,有效抑制乳酸脱氢酶（LDH）和活性氧（ROS）的表达,同时增强内源性抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和过氧化氢酶（CAT）的酶活力。2.为有效识别芫根中抗缺血缺氧功能性成分,利用四种极性不同的有机试剂,依次对芫根进行逐级萃取,共获得石油醚（萃取）相、氯仿（萃取）相、乙酸乙酯（萃取）相、正丁醇（萃取）相和水相（正丁醇萃余相）。通过OGD/R模型,以细胞活力、LDH、ROS和内源性抗氧化酶等为评价指标,分别验证五种萃取物对神经元细胞的保护能力,发现芫根水相对糖氧剥夺损伤具有最佳抗氧化效果。3.利用小鼠MCAO/R模型和OGD/R模型,进一步验证芫根水相对缺血缺氧损伤的保护能力及作用机理。结果显示,芫根水相预处理可有效提高小鼠行为学的恢复能力,并减小脑萎缩体积;同时显着恢复细胞色素c氧化酶IV亚型（COXIV）的表达,提高呼吸链的功能状态以及细胞的能量生成;此外,芫根水相预处理可调控OGD/R损伤时信号转导因子胞内磷脂酰肌醇激酶（Phosphoinositide 3-kinase,PI3K）的表达,继而进一步引起蛋白激酶B（Protein kinase B,Akt）以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin,m TOR）的激活,抑制神经元细胞的死亡。4.在明确芫根水相对缺血缺氧损伤的保护效果及可能的作用机理后,进一步缩小研究范围,利用MCI分离柱、HW-40分离柱、ODS-A和ODS-AQ分离柱,借助薄层层析法和细胞ROS检测,对芫根水相进行逐级分离,新发现一种功能性单体（AET-1）,利用1H-NMR、13C-NMR和135DEPT-NMR检测方法,以此解析其化学结构为（2-甲氧基-5-甲基-1,4二氧六环）乙酸甲酯。5.利用体外OGD/R模型发现,AET-1可增强OGD/R损伤后神经元细胞的抗氧化应激能力、提高COXIV的表达活力,并通过激活PI3K/Akt/m TOR信号通路降低糖氧剥夺对神经元细胞的进一步损伤,促进抗凋亡因子/抑制促凋亡因子的表达。综上所述,芫根具有良好的抗缺血缺氧保护作用。本论文为芫根的综合开发和利用提供了科学依据和理论支撑,无论是依托芫根水相开发为功能性产品,或是利用芫根单体AET-1作为联合疗法的添加成分之一,都可提高芫根的经济价值和药用价值。未来的研究须继续阐明AET-1与PI3K、Akt和m TOR在神经系统以及细胞凋亡过程中的作用,才能成功地将功能性单体和激酶靶点转化为神经退行性疾病中有效且安全的预防/治疗策略。
周洪雨[8]（2021）在《丰富环境调控miR-146a-5p改善卒中后认知障碍的机制探讨》文中进行了进一步梳理脑卒中（stroke）也被称之为脑血管意外,是由脑循环受损引起的突发性脑血管病,包括各种原因引起的脑动脉狭窄或破裂。此时,会引起各种类型的脑循环障碍。中风的临床表现为短暂性或永久性脑功能不全等,致残率与死亡率均较高。根据表现类型的差异,可将脑卒中分为两种类型,其一为缺血性脑卒中,其二为出血性脑卒中,其中前者在临床脑卒中患者中占比较大。卒中后认知障碍（post-stroke cognitive impairment,PSCI）是一种常见的脑卒中后并发症,严重影响卒中患者的整体康复和日常生活,因此早诊断、早干预具有重要意义。丰富环境（enriched environment,EE）是一种以感觉、运动和社交刺激为主体的行为干预疗法。目前,EE已经被运用于各类神经系统疾病的基础和临床研究当中。研究表明PSCI的发病机制与神经炎症有关,而miR-146a-5p可以在免疫炎症反应中发挥调节作用。因此,本研究以PSCI为研究对象,通过临床研究和动物实验,以miR-146a-5p—炎症反应为主线,探究丰富环境对PSCI的影响机制,为PSCI的治疗提供新的康复方法和理论依据。第一章临床研究miR-146a-5p在丰富康复训练改善卒中后认知障碍患者认知功能中的作用及机制探讨目的:观察丰富康复训练对卒中后认知障碍（PSCI）患者认知功能及血浆miR-146a-5p、炎性因子的影响。方法:病例组采用随机数字表法最终将本院康复医学科58例PSCI患者分为丰富康复训练组（丰富组,n=29）和传统康复训练组（传统组,n=29）;另招募本院体检中心同时期年龄相匹配的正常对照组（Age-matched Controls AMC组,n=30）。病例组康复干预前和干预8周后采用蒙特利尔认知评估量表（MoCA）、数字广度测试（Digit Span Test,DST）、连线测试 A-B（Trail Making Test Part A-B,TMT A-B）、改良 Barthel 指数（Modified Barthel Index,MBI）对患者进行神经认知功能及日常生活能力测评,并测量干预前后血浆中miR-146a-5p、IL-6、TNF-α的表达量,采用Spearman相关分析干预前后病例组患者血浆miR-146a-5p的变化量与各量表评分变化的相关性;AMC组同期进行MOCA量表测试及与病例组相同的血浆指标检测。结果:康复干预前MOCA评分、DST评分、TMT A-B耗时数、BMI评分、血浆miR-146a-5p、IL-6、TNF-α水平,在病例两组间无统计学差异（P>0.05）;且基线时病例两组血浆miR-146a-5p表达量均低于正常对照组（P<0.05）,血浆IL-6、TNF-α水平均高于正常对照组（P<0.05）。8周康复干预后,病例两组量表评分均较干预前改善（P<0.05）;且丰富组MOCA评分、MBI评分均高于传统组（P<0.05）,连线测试A耗时数、连线测试B耗时数均低于传统组（P<0.05）,数字广度测试评分两组比较无统计学意义（P>0.05）。8周康复干预后,病例两组患者血浆miR-146a-5p相对表达量均较干预前上调（p<0.05）,血浆IL-6、TNF-α均较干预前下调（P<0.05）;且丰富组血浆miR-146a-5p相对表达量高于传统组（P<0.05）,血浆TNF-α低于传统组（P<0.05）,血浆IL-6虽低于传统组,但差异无统计学意义（P>0.05）。在所有病例组患者中,血浆miR-146a-5p在干预前后的变化与MOCA评分、数字广度测试评分的变化呈正相关（r=0.603,P<0.05;r=0.348,P<0.05）,与连线测试A耗时数、连线测试B耗时数的变化呈负相关（r=-0.342,P<0.05;r=-0.728,P<0.05）,与MBI评分变化无明显相关性（r=0.152,P>0.05）。结论:丰富康复训练对PSCI患者的疗效优于传统康复训练,可能与其显着增高PSCI患者血浆miR-146a-5p水平,降低机体的炎症反应有关。第二章动物实验不同居住环境调控miR-146a-5p对卒中小鼠海马炎症反应及认知功能影响目的:探讨丰富和孤养环境对卒中小鼠认知功能、海马炎症反应的影响机制。方法:采用光栓法,对70只清洁级C57BL/6小鼠进行卒中模型的制备。造模24小时后,将造模成功的66只小鼠随机分为卒中标准环境组（stroke+standard environment group,SE组n=22）、卒中丰富环境组（stroke+enriched environment group,EE组n=22）和卒中孤养组（stroke+isolation housing group,IH 组 n=22）。另选取 22 只 C57BL/6 小鼠为假手术标准环境组（shamgroup,Sham组）。各组分别在相应的环境中居住4周后,采用水迷宫检测各组小鼠认知功能;采用HE和Nissl染色观察各组小鼠海马CA1区的细胞形态学变化;利用qRCR技术检测各组小鼠海马miR-146a-5p、TRAF6 mRNA的表达量;利用western blot技术检测各组小鼠海马TRAF6/NF-κB信号通路蛋白及炎性因子TNF-α、IL-6的表达量。结果:干预后,与Sham组比较,SE组小鼠水迷宫逃避潜伏期显着上升（P<0.05）,穿越平台次数明显下降（P<0.05）;海马CA1区出现细胞病理性损伤和尼氏体减少（P<0.05）;海马TRAF6与胞核NF-κBp65蛋白表达上调（P<0.05）,炎性因子IL-6、TNF-α水平增高（P<0.05）;海马TRAF6mRNA含量与miR-146a-5p表达量均增高（P<0.05）。与SE组相比,EE组小鼠水迷宫逃避潜伏期显着下降（P<0.05）,穿越平台次数明显增加（P<0.05）;海马CA1区细胞病理损伤减轻、尼氏体数量增加（P<0.05）;海马TRAF6与胞核NF-κBp65蛋白表达降低（P<0.05）,炎性因子IL-6、TNF-α水平下降（P<0.05）;海马TRAF6 mRNA表达量降低（P<0.05）、miR-146a-5p表达量升高（P<0.05）。与SE组比较,IH组小鼠水迷宫逃避潜伏期明显延长（P<0.05）、穿越平台次数减少（P<0.05）;海马CA1区尼氏体数量大量减少（P<0.05）、细胞病理损伤严重;海马TRAF6与胞核NF-κBp65蛋白表达明显上调（P<0.05）,炎性因子IL-6、TNF-α水平显着增高（P<0.05）;海马TRAF6 mRNA含量升高（P<0.05）、miR-146a-5p 表达量降低（P<0.05）。结论:1.孤养环境下,卒中小鼠海马低水平的miR-146a-5p加重了神经炎症反应和海马细胞损伤,进一步导致小鼠认知损害。2.丰富环境可以改善卒中小鼠的认知功能,可能与提高海马miR-146a-5p表达量、降低神经炎症反应、减轻细胞病理损伤有关。
褚堃[9]（2021）在《神经丝蛋白轻链与卒中后认知功能障碍的相关性研究》文中指出背景:脑卒中所导致的疾病和经济负担正在快速增长,具有发病时间早、发病人数和患病人群庞大的特点,是中国居民致残、致死的首位疾病。卒中后认知障碍（Post-stroke cognitive impairment,PSCI）是脑卒中常见的并发症之一,严重影响患者的神经功能恢复和生存时间,是脑卒中致死致残的重要原因。血浆神经丝蛋白轻链（Neurofilament light chain,NFL）是轴突损伤和神经退行性疾病的标志物。研究显示NFL水平升高可以预测卒中后的功能改善,可以作为缺血性卒中长期预后的生物标志物,但是NFL是否可以预测PSCI风险目前尚不清楚。本研究旨在多中心、较大人群缺血性卒中队列中探讨NFL与PSCI发生的相关性。方法:研究对象是参与中国急性缺血性脑卒中降压对照试验（The China Antihypertensive Trial in Acute Ischemic Stroke,CATIS）的急性缺血性脑卒中患者。在CATIS试验对象被随机分组之前,随机抽取了其中7家医院开展“急性期降压对卒中后认知功能影响”的研究。采用简单随机抽样的方法在26家医院中随机抽取7家医院。在这7家医院中,排除聋哑人、盲人、严重失语及其他不能完成或不能配合认知功能量表测评的患者,连续性地选择其中满足条件的660例患者。到2012年11月份,完成入组工作。每家医院分别连续性入组80-100位患者。在发病后3个月随访期间,有15例对象失访、7例死亡,最后638例对象完成认知功能状况评定并最终纳入本次研究。在患者入院24小时内,采集患者血液样本,收集患者人口统计学信息、生活方式、个人疾病史和脑卒中家族史等信息,评估患者的生活自理程度（改良Rankin量表）及卒中严重程度（NIHSS量表）。发病后3个月时利用简易智力状况检查量表（Mini-mental state examination,MMSE）与蒙特利尔认知评估量表（Montreal cognitive assessment,Mo CA）进行认知功能评估,判断患者是否发生PSCI。MMSE量表正常标准为:文盲≥17分;小学≥20分;初中及以上文化程度≥24分;Mo CA量表正常标准为:≥26分。通过电化学发光免疫法,测定患者入院后24小时内的血浆NFL浓度。分别将NFL浓度以连续变量,以及以中位数为分组依据的分类变量纳入logistic回归模型,分析入院时血浆NFL与PSCI的关联及关联强度。结果:（1）本研究共纳入638名急性缺血性脑卒中患者,高浓度组患者年龄61.89±10.78岁大于低浓度组58.31±9.70岁（t=4.410,P<0.001）。发病后3个月时,高浓度组患者Mo CA评分21（16-25）分及MMSE评分26（21-28）分低于低浓度组患者的22（18-26）分和27（23-29）分（Z=2.490,P=0.013;Z=2.76,P=0.006）。（2）以Mo CA量表评分作为PSCI依据,PSCI发生率为76.17%。NFL高浓度组患者PSCI发生率为77.43%,低浓度组为74.92%,两组间差异无统计学意义（x2=0.553,P=0.457）。将NFL浓度分别以连续变量和以中位数为分组依据的分类变量纳入logistic回归模型,结果显示血浆NFL水平与PSCI的无显着相关性。（3）以MMSE量表评分作为PSCI依据,PSCI发生率为21.94%。NFL高浓度组患者PSCI发生率为25.7%,低浓度组为18.2%,两组间差异有统计学意义（x2=5.271,P=0.022）。单因素分析中,NFL高浓度组发生PSCI的风险是低浓度组的1.557倍（95%CI:1.065-2.276,P=0.022）;调整了可能的混杂因素后,NFL浓度与PSCI风险无统计学相关（P>0.05）。在分层分析中,在m RS评分0-2分的研究对象中NFL高浓度组发生PSCI的风险是低浓度组的2.088倍（95%CI:1.089-4.003）,多因素调整后仍有统计学意义（OR=2.459,95%CI:1.152-5.247）。结论:急性缺血性脑卒中患者急性期血浆中NFL水平与3个月时PSCI风险之间没有显着的相关性,但在入院m RS评分为0-2分的患者中,NFL高浓度组发生中度及以上认知功能障碍的风险显着升高。
李谦[10]（2021）在《急性脑梗死患者血清APN、sCD40L、Hcy水平与认知功能的研究》文中指出背景急性脑梗死（acute cerebral infarction,ACI）造成脑组织的坏死,从而出现神经功能缺损,约1/4～1/5脑梗死患者会出现认知功能障碍（cognition impairment,CI）。脑梗死后认知功能障碍（post stroke cognitive impairment,PSCI）是脑梗死常见并发症。轻度认知功能障碍起病,逐渐加重,影响患者生活,对疾病识别非常重要。研究显示血清某些因子对PSCI的识别有一定诊断价值,早期干预可以提高患者生活质量。本研究就血清脂联素（adiponectin,APN）、可溶性CD40配体（sCD40L）及同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）对PSCI的影响进行分析。目的1.探讨血清APN、sCD40L、Hcy与PSCI的关系,旨在发现三种血清因子对PSCI诊断价值,以期为脑梗死后认知功能障碍的早期识别及干预性治疗提供理论依据。2.按照脑梗死面积将PSCI组分为三组,进而了解三种血清因子与脑梗死面积的相关性。3.按照年龄段且根据我国《老年人权益保障法》第2条规定对ACI患者进行分组,分为中青年组及老年组,对血清APN、sCD40L、Hcy进行分析,了解不同年龄段患者的血清APN、sCD40L、Hcy水平。方法本研究采用整群抽样法,以2018年10月至2020年4月就诊于新乡医学院第二附属医院神经内科,且住院治疗的急性脑梗死患者为研究对象,根据排除标准及纳入标准,共纳入急性脑梗死患者141例,依据蒙特利尔量表（montreal cognitive assessment,MOCA）的分值将ACI患者分为脑梗死后认知功能正常组（post stroke no cognitive impairment,PSNCI）及PSCI组,入院后对患者一般资料收集及生化指标测定,对血清APN、sCD40L及Hcy进行测定。采用SPSS 22.0软件包对获得的数据进行统计分析。计数资料以相对数构成比（%）表示,使用独立样本t检验、单因素方差分析、秩和检验、相关性分析、ROC曲线等统计学方法检验,检验水准α=0.05。P<0.05表示差异有统计学意义。结果1.PSNCI与PSCI两组患者血清胆固醇（thermoelectric cell,TC）、甘油三酯（triacylglycerol,TG）、低密度脂蛋白（low-density lipoprotein,LDL）、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein,HDL）、UA、Cys-C 之间差异无统计学意义（P>0.05）。2.PSCI组患者MOCA评分明显低于PSNCI组,NIHSS评分高于PSNCI组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。3.PSNCI与PSCI两组患者血清APN、sCD40L及Hcy水平差异均有统计学意义（P<0.05）。4.进行年龄段分组后对血清因子进行分析后差异均无统计学意义。5.按照脑梗死面积进行划分三组最后进行分析后得出血清APN随着脑梗死面积增大,浓度减低,但三组在进行比较时差异无统计学意义;对三组血清sCD40L及Hcy进行分析后差异无统计学意义。6.对PSCI危险因素进行多因素Logistic回归评估血清APN、sCD40L及Hcy对PSCI的影响。结果显示血清APN、sCD40L及Hcy水平与认知功能障碍之间差异均有统计学意义（P<0.05）,随着血清APN水平降低,脑梗死后认知功能障碍风险增加,随着血清Hcy、sCD40L水平升高,脑梗死后认知功能障碍风险增加。Logistic回归方程:LogicP=-1.252+0.034X1-0.281X2+1.915X3。7.血清APN的ROC曲线下面积为0.694（95%可信区间:0.607～0.781,P<0.05）,当血清APN浓度为7.375μg/ml时,对应的特异度及敏感度之和（约登指数Youden index）最大,此时敏感度为48.5%,特异度为84.9%;血清sCD40L的ROC曲线下面积为 0.725（95%可信区间:0.640～0.810,P<0.05）,当血清 sCD40L 浓度为 1.136ng/ml时,对应的敏感度及特异度之和（约登指数）最大,此时敏感度为82.2%,特异度为58.8%;血清Hcy的ROC曲线下面积为0.570（95%可信区间:0.476～0.665,P<0.05）,当血清Hcy浓度为10.74μmol/L时,对应的敏感度及特异度之和（约登指数）最大,此时敏感度为83.8%,特异度为23.1%。8.Pearson相关分析显示,MOCA评分与血清APN呈正相关（r=0.432,P=0.000）,MOCA 评分与血清 sCD40L 呈负相关（r=-0.288,P=0.000）,MOCA 评分与血清Hcy呈负相关（r=-0.197,P=0.019）,且差异均有统计学意义（P<0.05）。结论脑梗死后认知功能障碍与血清APN、sCD40L、Hcy密切相关。血清APN为脑梗死后认知功能的保护因素,血清sCD40L及Hcy水平为脑梗死后认知功能的危险因素;脑梗死面积与血清中APN水平呈负相关。
二、脑卒中后痴呆患者的血浆CCK-8变化及临床意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、脑卒中后痴呆患者的血浆CCK-8变化及临床意义（论文提纲范文）
（1）血塞通对MCAO大鼠和OGD/R损伤SH-SY5Y细胞LINGO-1，EGFR，PI3K/AKT通路以及PTEN和GSK-3β的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 三七、三七总皂苷各成分对脑卒中的研究进展 |
| 1 中药三七和其成分的研究 |
| 2 三七总皂苷及其各成分对脑卒中的研究进展 |
| 3 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 LINGO-1及其下游信号通路在缺血性脑卒中后神经再生的机制研究 |
| 1 LINGO-1 |
| 2 EGFR |
| 3 PI3K//AKT |
| 4 PTEN |
| 5 GSK-3β |
| 6 PTE、AKT以及GSK-3β的关系 |
| 7 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 动物实验研究 |
| 实验一 大鼠MCAO模型的建立和评价 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 血塞通对MCAO大鼠术后28天LINGO-1,EGFR以及下游PI3K/AKT通路的作用 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 血塞通对MCAO大鼠术后28天PTEN和GSK-3β的作用 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 细胞实验研究 |
| 实验四 血塞通对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注损伤的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 附录 mNSS神经功能评分表 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（2）丹参酮ⅡA磺酸钠调控HIF1α/mTOR介导细胞自噬干预缺血性脑卒中的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 缺血性脑卒中和自噬的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 丹参脂溶性成分及其干预缺血性脑卒中的机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床文献研究 |
| 研究一 丹参类中药注射液治疗急性缺血性脑卒中的网状Meta分析 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 研究二 基于网络药理学探讨丹参治疗缺血性脑卒中的作用机制 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 研究三 丹参酮ⅡA磺酸钠注射液治疗脑缺血再灌注的药效研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 研究四 基于DIA和PRM技术丹参酮ⅡA磺酸钠干预MCAO/R模型大鼠缺血半影区蛋白组学分析 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 研究五 丹参酮ⅡA磺酸钠对PC12细胞氧糖剥夺/复氧模型的效应及机制研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）LIPCAR在急性脑梗死患者血浆中的表达及调控SH-SY5Y细胞凋亡的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 AIS概论 |
| 1.1.1 AIS的病因分型 |
| 1.1.2 AIS的流行病学特点 |
| 1.1.3 AIS的临床治疗策略 |
| 1.1.4 AIS的病理生理学特征 |
| 1.2 LncRNA概论 |
| 1.2.1 LncRNA的分类 |
| 1.2.2 LncRNA的功能 |
| 1.2.3 LncRNA研究策略及其工具 |
| 1.2.4 LncRNA数据表达库 |
| 1.3 LncRNA与 AIS |
| 1.3.1 LncRNA在 AIS动物模型中的研究 |
| 1.3.2 LncRNA在 AIS患者中的研究 |
| 1.3.3 LncRNA在 AIS研究中的价值 |
| 1.4 LncRNA LIPCAR的研究进展 |
| 1.5 本课题的研究目的和意义 |
| 第二章 LIPCAR在 AIS患者血浆中的表达及临床意义 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 临床样本及数据来源 |
| 2.1.2 入选标准 |
| 2.1.3 排除标准 |
| 2.2 主要仪器与试剂 |
| 2.2.1 实验仪器设备 |
| 2.2.2 实验试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 外周血样本的采集及保存 |
| 2.3.2 临床资料收集 |
| 2.3.3 血浆中LIPCAR表达水平检测 |
| 2.3.4 统计学分析 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 两组研究对象基线资料的比较 |
| 2.4.2 两组研究对象血浆LIPCAR表达水平的比较 |
| 2.4.3 AIS患者血浆LIPCAR表达水平与临床特征的相关性 |
| 2.4.4 AIS亚型患者血浆LIPCAR的表达水平与入院神经功能缺损和功能残疾的相关性分析 |
| 2.5 讨论 |
| 第三章 LIPCAR在 SH-SY5Y细胞凋亡中的作用研究 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验所需细胞 |
| 3.1.2 实验所用主要仪器 |
| 3.1.3 实验所用主要试剂 |
| 3.1.4 试剂配方 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 细胞培养 |
| 3.2.2 iCelligence检测细胞生长曲线 |
| 3.2.3 氧糖剥夺(OGD)模型建立 |
| 3.2.4 细胞转染 |
| 3.2.5 细胞中LIPCAR表达水平检测 |
| 3.2.6 细胞增殖检测 |
| 3.2.7 细胞凋亡检测 |
| 3.2.8 统计分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 SH-SY5Y细胞生长速度检测 |
| 3.3.2 OGD条件下SH-SY5Y细胞活力变化 |
| 3.3.3 OGD条件下SH-SY5Y细胞中LIPCAR表达水平变化 |
| 3.3.4 细胞转染效率评估 |
| 3.3.5 转染siRNA后 LIPCAR表达水平分析 |
| 3.3.6 敲低LIPCAR对 SH-SY5Y细胞增殖能力的影响 |
| 3.3.7 敲低LIPCAR对 SH-SY5Y细胞凋亡的影响 |
| 3.3.8 敲低LIPCAR对 OGD诱导的SH-SY5Y细胞增殖能力的影响 |
| 3.3.9 敲低LIPCAR对 OGD诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间取得的科研成果 |
| 参考文献 |
（4）头穴丛刺结合认知训练治疗卒中后轻度认知障碍的临床研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分文献综述 |
| 一、西医对卒中后轻度认知障碍的认识 |
| 1 概述 |
| 2 病因及发病机制 |
| 3 诊断标准 |
| 4 西医治疗 |
| 5 小结 |
| 二、中医对卒中后轻度认知障碍的认识 |
| 1 病名由来 |
| 2 病因病机 |
| 3 中医治疗 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 脱落标准 |
| 1.6 剔除标准 |
| 1.7 中止标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 随机分组 |
| 2.2 治疗方法 |
| 2.3 观察指标 |
| 2.4 观察时点 |
| 2.5 安全性分析 |
| 2.6 疗效评价标准 |
| 2.7 统计分析 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 病例入组、脱落情况 |
| 3.2 基线资料比较 |
| 3.3 治疗前后两组的情况 |
| 4 结论 |
| 5 讨论 |
| 5.1 针刺方法选取依据 |
| 5.2 认知训练在PSMCI中的应用 |
| 5.3 研究结果分析 |
| 5.4 对于本试验研究的思考 |
| 5.5 不足与展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在校期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（5）地龙提取物通过调节小胶质细胞极化促进脑微血管内皮细胞血管新生作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 研究内容一 地龙提取物对LPS诱导的小胶质细胞炎症的抑制作用 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 研究内容二 地龙提取物对小胶质细胞M1/M2 表型转化作用及机制研究 |
| 实验一 地龙提取物抑制LPS诱导的小胶质细胞M1 型极化 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验二 地龙提取物促进LPS诱导的小胶质细胞M2 型极化 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验三 地龙提取物促进小胶质细胞M2 型极化作用机制的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 研究内容三 地龙提取物处理的小胶质细胞条件培养液促进缺氧损伤脑微血管内皮细胞血管新生作用及机制研究 |
| 实验一 地龙提取物处理的小胶质细胞条件培养液促进缺氧损伤脑微血管内皮细胞增殖、迁移、成管功能 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验二 地龙提取物处理的小胶质细胞条件培养液促进缺氧损伤脑微血管内皮细胞血管新生作用机制的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 地龙治疗脑缺血损伤的药理研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分:对PSCI相关中医“毒邪”分类的研究 |
| 引言 |
| 临床资料与方法 |
| 1.研究对象 |
| 2.纳排标准 |
| 3.观察指标及研究方法 |
| 4.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.入选患者中医证型及有关实验室指标的总体分布情况 |
| 2.各中医证型与所观察指标的分布特征及相关性分析 |
| 3.毒邪的分类与所观察指标的分布特征及相关性分析 |
| 4. 各中医证型与相应毒邪的分布特征及相关性 |
| 5. 各类毒邪相兼情况分布特征 |
| 6. 各类毒邪中热性症状存在情况 |
| 7. 各类毒邪与所观察要素的相关性分析 |
| 讨论 |
| 1.PSCI的中医证候学研究 |
| 2.对PSCI毒邪的分类定义 |
| 3.对PSCI中医证型及毒邪分类研究结果的解读及探讨 |
| 4.对于“素毒”与“新毒”的理解 |
| 5.PSCI毒邪的整体统一性及黄连解毒汤治疗的可行性 |
| 6.本研究需要进一步延伸的方向 |
| 第二部分:早期应用黄连解毒汤对PSCIND患者的疗效观察 |
| 引言 |
| 临床资料与方法 |
| 1.研究对象 |
| 2.纳排标准 |
| 3.分组情况及治疗方法 |
| 4.观察指标及研究方法 |
| 5.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.黄连解毒汤对认知功能MMSE评分的影响 |
| 2.黄连解毒汤对认知功能MoCA评分的影响 |
| 3.黄连解毒汤对神经功能NIHSS评分的影响 |
| 4.黄连解毒汤对日常生活能力ADL评分的影响 |
| 5.黄连解毒汤对各中医证候评分的影响 |
| 6.黄连解毒汤对实验室指标的影响 |
| 7.对治疗后1 月、6 月疗效的相关因素分析 |
| 讨论 |
| 1.PSCI的治疗与“毒损脑络”学说 |
| 2.黄连解毒汤在脑血管病中的应用 |
| 3.导师组有关黄连解毒汤在认知障碍方面的研究基础 |
| 4.对神经、认知功能及ADL评分的影响作用分析 |
| 5.对各中医证候评分及有关毒邪的动态影响作用分析 |
| 6.对相关实验室指标的影响作用分析 |
| 7.本研究的意义及仍需解决的问题 |
| 第三部分:黄连解毒汤对脑梗死动物模型认知功能影响的实验研究 |
| 引言 |
| 实验动物与方法 |
| 1.实验动物 |
| 2.试剂及仪器 |
| 3.多发性脑梗死大鼠动物模型的制作 |
| 4.随机分组及给药 |
| 5.大鼠脑组织取材 |
| 6.指标检测及方法 |
| 7.统计学方法 |
| 结果 |
| 1. 各组大鼠的行为学认知功能检测 |
| 2. 各组大鼠皮层组织 HE 染色病理检查 |
| 3. 各组大鼠脑组织梗死周围区 MVD 检测 |
| 4.各组大鼠脑皮层组织Notch信号通路及VEGF蛋白检测 |
| 5.各组大鼠脑皮层组织炎性相关因子的检测 |
| 讨论 |
| 1.对PSCI发生机制的认识及所观察指标的选择 |
| 2.黄连解毒汤对于脑缺血及PSCI影响的可能机制 |
| 3.对PSCI相关信号通路的选择 |
| 4.动物造模方法的选择 |
| 5.对实验分组方法的选择 |
| 6.对实验结果的解读及分析 |
| 7.本研究的意义及有待延伸的方向 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录1 文献综述:“毒损脑络”学说与卒中后认知障碍 |
| 参考文献 |
| 附录2 血管性痴呆中医证候诊断量表(SDSVD) |
| 附录3 PSCI中医毒邪症状要素表 |
| 附录4 蒙特利尔认知评估量表(MoCA) |
| 附录5 简易智能精神状态检查量表(MMSE) |
| 附录6 日常生活能力(ADL)评分量表 |
| 附录7 大鼠改良神经功能缺损评分(mNSS) |
| 附录8 各组实验动物水迷宫活动轨迹图例 |
| 附录9 各组实验大鼠梗死区及梗死周围区 HE 染色病理结果 |
| 附录10 各组实验大鼠梗死区及梗死周围区微血管密度情况 |
| 在校期间发表的论文 |
| 在读期间参与的科研项目 |
| 致谢 |
（7）芫根对局灶性脑缺血缺氧损伤的保护作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 脑卒中 |
| 1.1.1 脑卒中概述 |
| 1.1.2 脑卒中发病机制 |
| 1.1.3 缺血性脑卒中的治疗现状 |
| 1.1.4 缺血性脑卒中的膳食预防 |
| 1.2 芫根 |
| 1.2.1 芫根概述 |
| 1.2.2 芫根的药理功效 |
| 1.3 研究目的及意义 |
| 1.4 研究框架及内容 |
| 1.4.1 研究框架 |
| 1.4.2 研究内容 |
| 第二章 芫根对脑缺血小鼠的神经保护作用初探 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与仪器 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 试剂与材料 |
| 2.2.3 主要仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 芫根液的提取 |
| 2.3.2 MCAO/R模型 |
| 2.3.3 行为学测试 |
| 2.3.4 脑损伤评估 |
| 2.3.5 细胞培养 |
| 2.3.6 糖氧剥夺/再灌注模型 |
| 2.3.7 细胞存活率测定 |
| 2.3.8 乳酸脱氢酶测定和活性氧测定 |
| 2.3.9 抗氧化酶活性检测 |
| 2.3.10 统计分析 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 TET干预对MCAO/R小鼠行为学的影响 |
| 2.4.2 TET干预对MCAO/R小鼠脑萎缩体积的影响 |
| 2.4.3 OGD不同时间对HT22 细胞活性的影响 |
| 2.4.4 TET干预抑制OGD/R诱导的氧化损伤 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 芫根各萃取相对神经元细胞糖氧剥夺损伤的保护作用 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与仪器 |
| 3.2.1 试剂与材料 |
| 3.2.2 主要仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 芫根各萃取相的分离 |
| 3.3.2 细胞培养 |
| 3.3.3 糖氧剥夺/再灌注模型 |
| 3.3.4 细胞存活率测定 |
| 3.3.5 乳酸脱氢酶测定和活性氧测定 |
| 3.3.6 抗氧化酶活性检测 |
| 3.3.7 统计分析 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 TET不同萃取相对正常HT22 细胞活力的影响 |
| 3.4.2 TET不同萃取相对OGD/R细胞活力的影响 |
| 3.4.3 TET不同萃取相对OGD/R细胞LDH水平的影响 |
| 3.4.4 TET不同萃取相对OGD/R细胞ROS水平的影响 |
| 3.4.5 TET不同萃取相对OGD/R细胞氧化应激损伤的影响 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 芫根水相对缺血缺氧损伤的保护作用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与仪器 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 试剂与材料 |
| 4.2.3 主要仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 芫根水相的提取 |
| 4.3.2 MCAO/R模型 |
| 4.3.3 行为学测试 |
| 4.3.4 脑损伤评估 |
| 4.3.5 细胞培养 |
| 4.3.6 糖氧剥夺/再灌注模型 |
| 4.3.7 细胞存活率测定 |
| 4.3.8 乳酸脱氢酶测定和活性氧测定 |
| 4.3.9 免疫荧光 |
| 4.3.10 蛋白质印迹法 |
| 4.3.11 统计分析 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 AET干预对MCAO/R小鼠行为学的影响 |
| 4.4.2 AET干预对MCAO/R小鼠脑萎缩体积的影响 |
| 4.4.3 AET干预对OGD/R细胞线粒体的影响 |
| 4.4.4 AET干预对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响 |
| 4.4.5 LY294002 逆转AET对 OGD/R细胞的保护作用 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 芫根水相的分离纯化与鉴定 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与仪器 |
| 5.2.2 试剂与材料 |
| 5.2.3 主要仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 芫根水相的逐级分离 |
| 5.3.2 细胞培养 |
| 5.3.3 糖氧剥夺/再灌注模型 |
| 5.3.4 活性氧测定 |
| 5.3.5 核磁分析 |
| 5.3.6 统计分析 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 AET中 part1-part3对OGD/R细胞中 ROS的影响 |
| 5.4.2 Part2中part(1)-part(4)的分离结果及对OGD/R细胞中ROS的影响 |
| 5.4.3 Part(1)中 part A-part D的分离结果及对OGD/R细胞中 ROS的影响. |
| 5.4.4 Part A中 part E-part G的分离结果及对OGD/R细胞中 ROS的影响 |
| 5.4.5 AET-1 的分离纯化与鉴定 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 芫根水相中有效单体AET-1 对缺血缺氧损伤的保护作用 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料与仪器 |
| 6.2.1 试剂与材料 |
| 6.2.2 主要仪器 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 芫根单体AET-1 的制备 |
| 6.3.2 细胞培养 |
| 6.3.3 糖氧剥夺/再灌注模型 |
| 6.3.4 细胞存活率测定 |
| 6.3.5 乳酸脱氢酶测定和活性氧测定 |
| 6.3.6 抗氧化酶活性检测 |
| 6.3.7 免疫荧光 |
| 6.3.8 蛋白质印迹法 |
| 6.3.9 统计分析 |
| 6.4 结果与讨论 |
| 6.4.1 AET-1 干预抑制OGD/R诱导的氧化损伤 |
| 6.4.2 AET-1 干预对OGD/R细胞线粒体的影响 |
| 6.4.3 AET-1 干预对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响 |
| 6.4.4 LY294002 逆转AET-1对OGD/R细胞的保护作用 |
| 6.4.5 AET-1 干预抑制OGD/R诱导的神经元凋亡 |
| 6.5 本章小结 |
| 主要结论与展望 |
| 主要结论 |
| 展望 |
| 论文主要创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文 |
（8）丰富环境调控miR-146a-5p改善卒中后认知障碍的机制探讨（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 1.卒中后认知障碍的诊断和治疗的重要性 |
| 2.认知干预的多样性 |
| 3.丰富环境的基础及临床转化研究 |
| 4.miR-146a、炎症与认知功能 |
| 5.提出研究设想 |
| 第二部分 临床与基础研究 |
| 第一章 临床研究 miR-146a-5p在丰富康复训练改善卒中后认知功能障碍患者认知功能中的作用及机制探讨 |
| 前言 |
| 1. 资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 2. 方法 |
| 2.1 干预方法 |
| 2.2 评价方法 |
| 3. 统计学分析 |
| 4. 结果 |
| 4.1 病例两组干预前后量表评分比较(见表1-11～表1-15) |
| 4.2 血浆指标测试结果(见表1-16、图1-4) |
| 4.3 相关性分析(见图1-5) |
| 5. 讨论 |
| 6. 结论 |
| 第二章 动物实验 不同居住环境调控miR-146a-5p对卒中小鼠海马炎症反应及认知功能影响 |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 主要仪器耗材 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 动物造模药物配置 |
| 1.4 光栓卒中模型的制作与分组干预 |
| 1.5 不同环境鼠笼的构建 |
| 1.6 小鼠实验相关指标检测 |
| 1.7 统计学处理 |
| 2. 结果 |
| 2.1 鼠脑MR1与TTC检测结果 |
| 2.2 Morris水迷宫实验结果比较 |
| 2.3 各组小鼠海马CA1区HE染色 |
| 2.4 各组小鼠海马CA1区Nisll染色 |
| 2.5 Western blotting检测结果比较 |
| 2.6 PCR实验结果比较 |
| 2.7 数据库预测比对 |
| 3. 讨论 |
| 4. 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（9）神经丝蛋白轻链与卒中后认知功能障碍的相关性研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1.对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 样本量计算 |
| 1.3 技术路线 |
| 1.4 基线资料的收集 |
| 1.5 血标本的采集 |
| 1.6 随访与认知功能评估 |
| 1.7 基线血浆神经丝蛋白水平的检测 |
| 1.8 研究变量及定义 |
| 1.9 统计分析 |
| 2.结果 |
| 2.1 研究对象基本特征 |
| 2.2 以MoCA量表作为PSCI筛查工具 |
| 2.2.1 基线特征比较 |
| 2.2.2 NFL浓度与PSCI_(MoCA)的logistic回归分析 |
| 2.2.3 按年龄、mRS评分、NIHSS评分进行分层分析 |
| 2.3 以MMSE量表作为PSCI筛查工具 |
| 2.3.1 基线特征比较 |
| 2.3.2 NFL浓度与PSCI_(MMSE)的logistic回归分析 |
| 2.3.3 按年龄、mRS评分、NIHSS评分进行分层分析 |
| 3.讨论 |
| 4.结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 神经丝蛋白轻链与认知功能障碍的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附表1 蒙特利尔认知评估量表(MoCA) |
| 附表2 简易智力状况检查量表(MMSE) |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
（10）急性脑梗死患者血清APN、sCD40L、Hcy水平与认知功能的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 对象与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 5 不足之处及展望 |
| 参考文献 |
| 综述:脑卒中后认知功能障碍的相关研究 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、脑卒中后痴呆患者的血浆CCK-8变化及临床意义（论文参考文献）
- [1]血塞通对MCAO大鼠和OGD/R损伤SH-SY5Y细胞LINGO-1，EGFR，PI3K/AKT通路以及PTEN和GSK-3β的研究[D]. 周东蕊. 北京中医药大学, 2021(01)
- [2]丹参酮ⅡA磺酸钠调控HIF1α/mTOR介导细胞自噬干预缺血性脑卒中的机制研究[D]. 王哲义. 北京中医药大学, 2021(01)
- [3]LIPCAR在急性脑梗死患者血浆中的表达及调控SH-SY5Y细胞凋亡的初步研究[D]. 蔺文娟. 西北大学, 2021(12)
- [4]头穴丛刺结合认知训练治疗卒中后轻度认知障碍的临床研究[D]. 刘晔. 北京中医药大学, 2021(08)
- [5]地龙提取物通过调节小胶质细胞极化促进脑微血管内皮细胞血管新生作用及机制研究[D]. 殷孟兰. 天津中医药大学, 2021(01)
- [6]基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究[D]. 姜海伟. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [7]芫根对局灶性脑缺血缺氧损伤的保护作用及其机制研究[D]. 化涵毅. 江南大学, 2021(01)
- [8]丰富环境调控miR-146a-5p改善卒中后认知障碍的机制探讨[D]. 周洪雨. 扬州大学, 2021(08)
- [9]神经丝蛋白轻链与卒中后认知功能障碍的相关性研究[D]. 褚堃. 重庆医科大学, 2021(01)
- [10]急性脑梗死患者血清APN、sCD40L、Hcy水平与认知功能的研究[D]. 李谦. 新乡医学院, 2021(01)