一、P物质对大鼠成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响（论文文献综述）
牛红萍[1]（2021）在《调肾通络方防治重度宫腔粘连术后再粘连的临床疗效及其调控TGF-β1/Smads信号通路的作用机制研究》文中认为目的1.通过临床对照研究,观察调肾通络方防治重度IUA术后再粘连的临床疗效,以期为IUA患者提供一种简便、实用且有效的治疗方法。2.通过对IUA患者子宫内膜病理切片进行回顾性分析,明确IUA纤维化程度以及TGF-β1/Smads信号通路与IUA发生发展的相关性。3.经SD大鼠IUA模型体内实验,在组织水平从TGF-β1/Smads信号通路角度,分析调肾通络方防治IUA术后再粘连的疗效机制及作用靶点。4.经SD大鼠ESCs体外实验,在细胞水平从TGF-βl/Smads信号通路角度,分析调肾通络方防治IUA术后再粘连的疗效机制及作用靶点。方法1.随机对照观察调肾通络方防治重度IUA术后再粘连的临床疗效选取2019年4月至2020年12月在云南中医药大学第一附属医院（云南省中医医院）妇科就诊患者,按照纳入标准纳入重度IUA患者60例,随机分为治疗组和对照组（n=30）。治疗组平均年龄29.87±4.06岁,平均病程3.53±1.70月;宫腔操作次数为2.10±0.0.71次,宫腔粘连评分为15.33±6.78。对照组平均年龄29.30±3.23岁,平均病程3.73±1.80月;宫腔操作次数为1.87±0.68次;宫腔粘连评分为14.93±6.50;两组患者年龄、病程、宫腔操作次、宫腔粘连评分差异无统计学意义（P>0.05）。治疗组予调肾通络方治疗,对照组予芬吗通治疗,两组均治疗3个月经周期,经期停药,随访半年。采用以下指标评价各组疗效:术后3个月宫腔粘连评分,排卵日子宫内膜厚度以及PI、RI,月经量、色、质,腹痛、腰酸、焦虑等症状积分。2.IUA子宫内膜纤维化程度以及TGF-β1/Smads信号通路与IUA的相关性随机调取2018年1月至2019年5在云南中医药大学第一附属医院（云南省中医医院）妇科就诊的IUA患者子宫内膜内膜组织病理切片30例（轻、中、重各10例）;非粘连子宫内膜病理切片10例,为同期因宫内膜增厚行宫腔镜刮宫术,且内膜组织病检证实为子宫内膜单纯性增生10例。采用HE染色进行腺体计数,Masson染色评估胶原纤维面积明确IUA纤维化程度;免疫组化法检测与TGF-β1/Smads信号通路相关的TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7表达水平,证实TGF-β1/Smads信号通路与IUA发生发展的相关性。3.动物实验采用双重损伤法构建稳定的SD大鼠IUA动物模型,随机分为5组:正常对照组、模型对照组、调肾通络方低剂量组（2.875g/kg TTR）、中剂量组（5.75g/kg TTR）以及高剂量组（11.5g/kg TTR）。每组5只大鼠（每组共计10个子宫标本）。正常对照组、模型对照组常规喂食,喂食方法同给药组,并予给药组同等剂量生理盐水灌胃。调肾通络方低、中、高剂量组分别予调肾通络方免煎颗粒2.875g·kg-1、5.75g·kg-1、11.5g·kg-1灌胃8周。获取内膜标本,HE及Masson染色观察各组子宫内膜形态、腺体计数以及胶原面积,分析调肾通络方对SD大鼠IUA子宫内膜纤维化进展的影响;免疫组化检测Vimentin表达水平,分析调肾通络方对SD大鼠IUA子宫内膜细胞增殖的影响;qPCR法检测各组TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7mRNA 表达水平,Western Blot 法检测 TGF-β1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Smad7蛋白表达水平,从TGF-β1/Smads角度分析调肾通络方防治IUA术后再粘连的作用机制及靶点。4.细胞实验提取SD大鼠ESCs,细胞培养48h后,随机分为5组:正常对照组、模型对照组、5%、10%、20%调肾通络方含药血清组。正常对照组常规胎牛血清培养。模型对照组、肾通络方含药血各组以50ng/ml TGF-β1作用于ESCs 48h,之后模型对照组加入常规饲养大鼠血清,调肾通络方各组分别加入5%、10%、20%调肾通络方含药血清。各组于37℃培养箱中培养72h,收集上清液和细胞。qPCR检测各组Smad2、Smad3、Smad7mRNA表达水平;Western Blot 检测 Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Smad7 蛋白表达水平,在细胞水平从TGF-β1/Smads角度分析调肾通络方对ESCs的影响。结果1.临床疗效治疗3个月经后期后,治疗组宫腔镜粘连评分、排卵日子宫内膜厚度、PI、RI、症状积分分别为 5.67±3.04、8.64±1.38、0.77±0.14、0.49±0.04、32.00±7.93。对照组宫腔镜粘连评分、排卵日子宫内膜厚度、PI、RI、症状积分分别为8.57±3.93、7.08±1.83、0.96±0.14、0.53±0.04、38.00±7.85。两组治疗前后各项指标均较治疗前改善,差异显着（P<0.05）。与对照组比较,治疗组粘连评分、排卵日子宫内膜厚度、PI、RI、症状积分明显改善,优于对照组,差异显着（P<0.05）。治疗组防治IUA术后再粘连总有效率为83.3%,对照组总有效率为53.3%,治疗组明显优于对照组,差异显着（P<0.05）。2.IUA纤维化程度及与TGF-β1/Smads信号通路的相关性（1）各组子宫内膜腺体计数:HE染色结果显示非粘连组腺体丰富,呈圆形或长椭圆形,计数为48.13±6.55。粘连组腺体稀少,轻、中、重度粘连腺体计数分别为24.8±2.15、18.7±1.34、12.1±2.08。与对照组比较,粘连组腺体计数明显下降,差异显着（P<0.001）,且与粘连程度呈负相关。（2）各组子宫内膜胶原纤维面积比:Masson染色结果显示非粘连组组蓝染区域不明显,胶原纤维面积小,面积比率为0.489±0.241。粘连组可见明显蓝染区域,胶原纤维面积广泛,轻、中、重度粘连面积比率分别为12.92±5.054、25.82±2.636、32.5±6.969。与对照组比较,粘连组胶原纤维面积明显增加,差异显着（P<0.001）,且与粘连程度呈正相关。（3）各组子宫内膜组织TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7表达:免疫组化结果显示TGF-β1在各组子宫内膜腺上皮和间质均有表达,但主要表达于腺上皮细胞。非粘连组、轻、中、重度粘连组 TGF-β1 相对表达量分别为 1.37±0.49、2.90±0.31、3.80±0.42、4.50±0.42。与非粘连组比较,粘连组TGF-β1表达明显上调,并与粘连程度呈正相关,差异显着（P<0.01）。Smad2在各组子宫内膜腺上皮和间质均有表达。非粘连组、轻、中、重度粘连组其相对表达量分别为 2.77±0.43、4.80±0.42、5.00±0.47、5.00±0.47。与非粘连组比较,粘连组 Smad2表达明显上调,差异显着（P<0.01）,但与粘连程度无明显相关（P>0.05）。Smad3在非粘连组中主要表达于腺上皮,在粘连组中,腺上皮、间质均有表达。非粘连组、轻、中、重度粘连组Smad3相对表达量分别为1.97±0.56、3.30±0.67、3.70±0.82、4.40±0.52。与非粘连组比较,粘连组表达明显上调,差异显着（P<0.01）,并与粘连程度呈正相关。Smad7在各组中均有表达。非粘连组、轻、中、重度粘连组Smad7相对表达量分别为3.87±0.86、3.80±0.63、3.10±0.88、1.80±0.42。与非粘连组比较,粘连组表达明显下调,差异显着（P<0.01）,并与粘连程度呈负相关。3.动物实验（1）各组SD大鼠子宫大体解剖形态:各组在体子宫呈“Y”型子宫。正常对照组双侧子宫对称,粗细均匀相当,子宫壁光滑,呈淡红色,色泽光鲜,有较好的弹性。模型对照组、调肾通络方低、中、高剂量组子宫外形相似,但均有不同程度变形、僵硬,与周边组织粘连,其中以模型对照组、调肾通络方低剂量组最为明显,而调肾通络方中、高剂量组子宫弹性尚好,粘连程度较模型对照组、调肾通络方低剂量组低。（2）各组SD大鼠子宫内膜Vimentin免疫组化:免疫组化（IHC）检测结果显示在正常对照组、调肾通络方高、中剂量组均可见大量棕黄色颗粒沉积,Vimentin阳性表达相对量分别为21.71±1.88%、17.67±1.06%、15.39±1.53%。模型对照组、调肾通络方低剂量组则见较少棕色颗粒,其相对表达量分别为6.11±0.66%、11.92±1.74%。与正常对照组比较,模型对照组、调肾通络方低剂量组呈低表达,差异显着（P<0.01）。与模型对照组比较,调肾通络方高、中剂量组表达明显上调,差异显着（P<0.01）。（3）各组SD大鼠子宫内膜组织HE染色结果及腺体计数:正常对照组子宫内膜线完整,上皮细胞结构完整,内膜间质中见丰富圆形、椭圆形腺体,呈排列状、簇状,内膜表面可见腺体开口。模型对照组、调肾通络方低、中、高剂量组均不同程度出现内膜组织坏死,腺体稀少、甚至缺失,其中以模型对照组、调肾通络方低剂量组最为严重。正常对照组、模型对照组、调肾通络方低、中、高剂量组各组腺体计数分别为54±5个/HP、10±2个/HP、20±4个/HP、34±6个/HP、50±3个/HP。与正常对照组比较,各组腺体计数均不同程度减少,差异明显（P<0.01）。与模型对照比较,调肾通络方组腺体计数呈剂量依赖性增加,但调肾通络方低剂量组与模型对照组无差异（P>0.05）,中、高剂量组与模型对照组差异显着（P<0.01）。（4）各组SD大鼠子宫内膜Masson染色结果及纤维化面积:正常对照组、调肾通络方高、中剂量组见少量蓝色胶原纤维,纤维化面积比分别为13.73±1.67%、18.56±1.69%、28.38±2.8%。在模型对照组、调肾通络方低剂量组均可见大量蓝色胶原纤维,其纤维化面积比率分别为53.09±3.46%、41.82±2.89%。与正常对照组比较,模型对照组、调肾通络方各组纤维化面积增加,差异显着（P<0.01）。与模型对照组比较,调肾通络方中、高剂量组纤维化面积减少,差异显着（P<0.01）。调肾通络方低剂量组与模型对照组无差异（P>0.05）。（5）各组 SD 大鼠子宫内膜 TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7mRNA 表达:qPCR 检测结果显示正常对照组、模型对照组、调肾通络方低、中、高剂量组TGF-β1mRNA表达相对量分别为 2.64±0.35、4.61±0.66、4.07±0.38、3.92±0.42、3.13±0.41;Smad2mRNA 表达相对量分别为 2.96±0.33、3.83±0.55、3.64±0.57、3.28±0.67、3.00±0.53;Smad3mRNA 表达相对量分别为 3.17±0.22、4.75±0.53、4.14±0.26、3.71±0.28、3.27±0.41;Smad7mRNA 表达相对量分别为 5.82±0.33、4.03±0.19、4.60±0.62、4.69±0.47、5.76±0.27。与正常对照组比较,各组TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达上调,Smad7 mRNA表达下调,差异显着（P<0.01）。与模型对照组比较,调肾通络方各组TGF-β1、Smad2、Smad3mRNA呈剂量依赖性表达下调,Smad7mRNA表达上调。其中以中、高剂量组与模型对照组差异显着（P<0.01）,低剂量组与模型对照组表达水平无明显差异（P>0.05）。（6）各组SD大鼠子宫内膜TGF-β1、p-Smad2/3、Smad2/3/7蛋白表达水平:Western blot检测结果显示显示正常对照组、模型对照组、调肾通络方低、中、高剂量组,TGF-β1 蛋白表达相对量分别为 0.177±0.08、0.808±0.045、0.584±0.054、0.411±0.164、0.206±0.025;p-Smad2 蛋白表达相对量分别为 0.126±0.017、0.728±0.370、0.587±0.043、0.281±0.021、0.159±0.027;Smad2 蛋白表达相对量分别为 0.281±0.014、0.780±0.035、0.559±0.057、0.312±0.030、0.276±0.047;p-Smad3 蛋白表达相对量分别为 0110±0.013、0.782±0.133、0.558±0.059、0.290±0.027、0.167±0.014;Smad3 蛋白表达相对量分别为0.134±0.015、0.570±0.059、0.458±0.032、0.267±0.031、0.162±0.018;Smad7 蛋白表达相对量分别为 0.448±0.030、0.096±0.021、0.131±0.018、0.188±0.019、0.198±0.057。与正常对照组比较,各组 TGF-β1、p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3 蛋白表达上调,Smad7 表达下调,差异显着（P<0.01）。与模型对照组比较,调肾通络方各组TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达呈剂量依赖性表达下调,Smad7表达上调。其中以中、高剂量组与模型对照组差异显着（P<0.01）,低剂量组与模型对照组表达水平无明显差异（P>0.05）。4.细胞实验（1）SD大鼠原代ESCs的分离、培养及鉴定:刚分离的ESCs大小不一,形态各异,多呈圆形、锥形以及多角形。培养0.5 h左右开始贴壁,培养24h后细胞呈梭形、三角形、多角形,分散排列,无明显规律。48h后细胞增多,开始出现聚集现象。培养72h后细胞明显聚集现象,多呈现梭形。vimentin免疫荧光呈绿色为阳性,阳性率为90.10±0.15%。（2）各组SD大鼠ESCs形态及密度:正常对照组、20%调肾通络方含药血清组ESCs外形相似,呈圆形或椭圆形,细胞饱满,呈铺路石状密集排列;模型对照组、5%、10%调肾通络方组细胞不同程度变细长,细胞密度下降。（3）各组SD大鼠ESCs Smad2、Smad3、Smad7mRNA表达:qPCR结果显示正常对照组、模型对照组、5%、10%、20%调肾通络方含药血清组Smad2mRNA表达相对量分别为 3.981±0.510、5.040±0.210、4.997±0.323、4.539±0.241、4.070±0.265;Smad3mRNA 表达相对量分别为 3.539±0.137、5.014±0.321、4.819±0.330、4.318±0.368、3.792±0.475;Smad7mRNA 表达相对量分别为 5.614±0.250、4.508±0.451、4.681±0.074、4.894±0.085、5.257±0.370。与正常对照比较,模型对照组、调肾通络方含药血清各组Smad2、Smad3 mRNA表达不同程度上调,Smad7表达下调。与模型对照组比较,调肾通络方含药血清组Smad2、Smad3 mRNA表达呈剂量依赖性下调,而Smad7的表达上调,其中以中、高剂量组与模型对照组差异显着（p<0.05）,低剂量组与模型对照组差异不明显（p>0.05）。（4）各组SD大鼠ESCs p-Smad2/3、Smad2/3/7蛋白表达:Western blot检测结果显示:正常对照组、模型对照组、5%、10%、20%调肾通络方含药血清组p-Smad2蛋白表达相对量分别为 0.151±0.016、0.850±0.035、0.730±0.029、0.690±0.024、0.621±0.023、Smad2 蛋白表达相对量分别为 0.190±0.019、0.862±0.028、0.812±0.031、0.681±0.026、0.610±0.028;p-Smad3 蛋白表达相对量分别为 0.130±0.011、0.911±0.027、0.751±0.022、0.660±0.021、0.592±0.027;Smad3 蛋白表达相对量分别为 0.161±0.018、0.841±0.019、0.720±0.025、0.632±0.019、0.492±0.018;Smad7 蛋白表达相对量分别为 0.730±0.035、0.150±0.011、0.261±0.018、0.381±0.029、0.550±0.016。与正常对照组比较,模型对照组、调肾通络方含药血清各组p-Smad2、p-Smad3、Smad2、Smad3蛋白表达不同程度上调,Smad7蛋白表达下调。与模型对照组比较,调肾通络方含药血清组p-Smad2、p-Smad3、Smad2、Smad3蛋白表达呈剂量依赖性下调,而Smad7的表达上调,其中以中、高剂量组与模型对照组差异显着（p<0.05）,低剂量组与模型对照组差异不明显（p>0.05）。结论1.调肾通络方应用于重度IUA术后,能明显改善患者月经量、焦虑、倦怠、腰膝酸软等不适临床症状;增加子宫内膜厚度,改善子宫内膜血流,促进子宫内膜修复,有效防治重度IUA术后再发粘连。2.IUA的病理本质为子宫内膜纤维化,纤维化进展参与了 IUA的发生发展,且内膜组织纤维化程度与粘连程度呈正相关;TGF-β1/Smads信号通路激活参与了 IUA的发生、发展。3.从TGF-β1/Smads纤维化信号通路角度,调肾通络方防治IUA术后再粘连可能的疗效机制为:从子宫内膜细胞到组织下调TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白及mRNA表达,上调Smad7蛋白及mRNA表达,从而调控TGF-β1/Smads信号通路,改善子宫内膜纤维化。
邵帅[2]（2020）在《三法三穴对SNI大鼠施万细胞增殖和神经瘢痕形成的影响》文中认为[目的]为评价三法三穴对SNI大鼠坐骨神经SC增殖和神经瘢痕形成的影响而开展本实验,本实验从行为学、组织形态学与分子生物学三个层面,评价三法三穴干预能否通过调节TGF-β1/Smad2通路蛋白表达,影响SNI模型大鼠坐骨神经损伤点SC增殖及神经瘢痕的形成,促进SNI大鼠后肢运动功能的恢复。以期进一步揭示推拿促进坐骨神经损伤后修复的机理,完善推拿治疗周围神经损伤的理论基础,为推拿治疗周围神经损伤疾病提供科学证据。[方法]1 动物分组、造模和干预方法选取健康雄性SD大鼠78只,随机分为假手术组、模型组、三法三穴组,每组各26只。采用坐骨神经夹持损伤法制备SNI模型大鼠。三法三穴组从造模后第8天（d）开始,对大鼠殷门穴、承山穴、阳陵泉穴进行点法、拨法、揉法干预,每穴每手法1min。干预10d休息1d,共干预20次。2行为学检测方法每组每个时间点随机选取6只大鼠进行行为学观察。在造模后7d、14d、21d、28d,检测各组大鼠斜板试验角度。在造模后7d、28d,检测各组大鼠SFI。3组织形态学检测方法每组随机选取4只大鼠,在造模后28d时运用HE染色法,观察SNI大鼠坐骨神经损伤点SC细胞数目和神经瘢痕厚度及染色深度的变化。4蛋白定量检测方法每组每个时间点随机选取4只大鼠,运用免疫荧光标记法,观察造模后7d、28d时坐骨神经损伤点中S100、TGF-β1、Smad2及造模后28d时坐骨神经损伤点Ⅰ/Ⅲ型胶原和FN的表达变化。每组每个时间点随机选取6只大鼠,运用Western-blotting技术,检测坐骨神经损伤点在造模后7d、14d、28d三个时间点TGF-β1、Smad2、p-Smad2的表达变化。5统计方法使用Image J 1.48u软件分析免疫荧光和Western-blotting图像。使用SAS 8.0软件对数据进行统计分析。[结果]1三法三穴干预对SNI大鼠运动功能恢复的影响SFI结果:模型组与假手术组相比,造模后7d、28d,大鼠SFI显着降低（P<0.01）。三法三穴组与模型组相比,大鼠SFI显着升高（P<0.01）,且接近假手术组水平。斜板实验结果:模型组与假手术组相比,造模后7d、14d、21d、28d,大鼠斜板倾斜角度显着降低（均有P<0.05）。三法三穴组与模型组相比,造模后14d、21d,大鼠斜板倾斜角度有升高趋势（P>0.05）,造模后28d,斜板倾斜角度显着升高（P<0.05）。以上结果提示:三法三穴干预能够促进SNI大鼠后肢精细动作及后肢肌力的恢复,说明三法三穴干预能够促进SNI大鼠后肢运动功能的恢复。2三法三穴干预对SNI大鼠坐骨神经SC增殖的影响HE染色结果:假手术组神经纤维轴索及髓鞘完整、排列紧密,SC核嵌于鞘膜外。模型组神经纤维稀疏、散乱,鞘膜外SC核数量较假手术组减少。三法三穴组坐骨神经可见再生的神经纤维,并有很厚的髓鞘包绕、轴索清晰,鞘膜外SC核数量较模型组明显增多。S100免疫荧光染色结果:模型组与假手术组相比,造模后7d、28d,SNI大鼠坐骨神经损伤点SC标记物S100的平均光密度值明显降低（均有P<0.05）。三法三穴组与模型组相比,造模后28d,坐骨神经S100平均光密度值明显升高（P<0.05）。以上结果提示:三法三穴干预能够增加神经损伤后期SC的数目。3三法三穴干预对SNI大鼠坐骨神经瘢痕形成的影响HE染色结果:造模后28d,假手术组坐骨神经损伤点神经外膜结缔组织深染,模型组神经外膜结缔组织深染,三法三穴组神经外膜结缔组织染色较模型组明显变浅。Ⅰ/Ⅲ型胶原及FN免疫荧光染色结果:造模后28d,与假手术组相比,模型组SNI大鼠坐骨神经外膜Ⅰ/Ⅲ型胶原、FN表达均明显增多（均有P<0.05）。与模型组相比,三法三穴组SNI大鼠坐骨神经外膜Ⅰ/Ⅲ型胶原及FN表达均明显减少（均有P<0.05）。以上结果提示:三法三穴干预能够抑制SNI大鼠坐骨神经Ⅰ/Ⅲ型胶原及FN分泌,从而抑制神经外膜瘢痕形成。4三法三穴干预对TGF-β1/Smad2通路蛋白表达的影响免疫荧光染色结果:TGF-β1表达部位与S100高度重合,且在模型组、三法三穴组坐骨神经外膜也出现高表达,Smad2表达在DAPI表达位置附近。模型组与假手术组相比,造模后7d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1的表达量明显升高（P<0.05）,造模后28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1的表达量未见明显差异（P>0.05）。三法三穴组与模型组相比,造模后28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1的表达量未见明显差异（P>0.05）。模型组与假手术组相比,造模后7d、28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经Smad2的表达量明显升高（均有P<0.05）,三法三穴组与模型组相比,造模后28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经Smad2的表达量无明显差异（P>0.05）。Western-blotting结果:模型组与假手术组相比,造模后7d、14d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1、Smad2、p-Smad2的表达量明显升高（均有P<0.05）,造模后28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1、Smad2、p-Smad2的表达量无明显差异（P>0.05）。三法三穴组与模型组相比,造模后14d,坐骨神经TGF-β1、Smad2、p-Smad2的表达量出现下调趋势（P>0.05）,造模后28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1、Smad2、p-Smad2的表达量无明显差异（P>0.05）。以上结果提示:坐骨神经损伤后,TGF-β1主要在SC和损伤神经外膜中表达,Smad2在细胞核周围表达。三法三穴干预在周围神经损伤早期对TGF-β1/Smad2通路蛋白有轻微的下调作用,可能与神经瘢痕形成有关。[结论]三法三穴干预能够增加损伤后期SNI大鼠坐骨神经SC的数目。三法三穴干预能够通过轻微下调TGF-β1/Smad2通路蛋白表达,抑制SNI大鼠坐骨神经瘢痕的形成,以促进SNI大鼠运动功能恢复。
吴华拉,周湘乡,钟玉兰,淦鑫[3]（2019）在《碱性成纤维细胞生长因子转染骨髓间充质干细胞移植治疗慢性阻塞性肺疾病的作用及机制》文中提出背景:促炎与抗炎反应失衡在慢性阻塞性肺疾病发病过程中起到关键作用。课题组设想通过减轻肺内炎症反应、促进肺泡上皮或支气管上皮细胞再生修复,减轻或逆转慢性阻塞性肺疾病的病理过程,从而达到治愈疾病的目的。目的:观察碱性成纤维细胞生长因子（basicfibroblastgrowthfactor,b FGF）转染骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）移植慢性阻塞性肺疾病大鼠白细胞介素10、白细胞介素4的表达及其在体内的分化。方法:采用全骨髓贴壁法提取、培养骨髓间充质干细胞,以脂质体转染法导入b FGF-pcDNA3.1质粒。选取健康SD大鼠150只,随机取30只大鼠为正常对照组,其余120只大鼠采用脂多糖联合熏烟的复合刺激法制备成慢性阻塞性肺疾病模型,然后随机分为慢性阻塞性肺疾病组、骨髓间充质干细胞组、pcDNA3.1-BMSCs组、bFGF-pcDNA3.1-BMSCs组,每组30只。各组大鼠分别在第7,14,28天处死,苏木精-伊红染色观察肺组织病理学改变,ELISA检测外周血白细胞介素10、白细胞介素4水平,q RT-PCR法检测肺组织中白细胞介素10、白细胞介素4 mRNA的表达;冰冻切片免疫荧光染色法检测骨髓间充质干细胞在肺组织中的分化情况。结果与结论:①第28天,3个骨髓间充质干细胞治疗组均较慢性阻塞性肺疾病组病理改变明显改善;②在相同时间节点,3个骨髓间充质干细胞治疗组外周血及肺组织中的白细胞介素10、白细胞介素4表达高于慢性阻塞性肺疾病组（P<0.05）,骨髓间充质干细胞组、pc DNA3.1-BMSCs组差别不大,但b FGF-pcDNA3.1-BMSCs组较之二者相对较高,差异有显着性意义（P <0.05）;③第28天,在3个骨髓间充质干细胞治疗组的肺组织切片中观察到有部分CM-Dil阳性细胞,同时SPC或CC16表达阳性,bFGF-pcDNA3.1-BMSCs组阳性细胞相对较多;④结果表明,携带碱性成纤维细胞生长因子基因的骨髓间充质干细胞移植入慢性阻塞性肺疾病大鼠,可减轻病理改变,增强抗炎效果,并可促进骨髓间充质干细胞分化为肺泡上皮细胞和支气管上皮细胞。
罗明鸿[4]（2017）在《体外摩擦力刺激对筋膜成纤维细胞蛋白表达响应特征的研究及推拿摩法“消肿止痛”细胞生物力学机制探讨》文中研究说明背景:推拿摩法在临床上多用于治疗颈肩腰背、胸胁及四肢的慢性筋伤（或称“陈伤”）疾病,如肩周炎、腰肌劳损、腱鞘炎、慢性关节炎等,具有“消肿止痛”的功效。慢性筋伤时伤处的肿胀、疼痛、活动受限多由局部的慢性、无菌性炎症损伤所致,而炎症损伤与炎症因子（包括细胞因子和其他炎症相关蛋白）浸润相关,摩法摩擦力刺激对炎症因子合成表达的调节作用有可能成为揭示推拿按摩治疗慢性筋伤“消肿止痛”的细胞生物力学治疗作用原理。目的:通过体外研究摩擦力刺激对经脉腧穴相关筋膜结缔组织成纤维细胞蛋白表达变化的影响,揭示推拿摩法减轻炎症损伤的细胞生物力学机制,为解释推拿治疗原理提供新的理论依据。方法:1、取孕14天SD雌性大鼠脱颈处死并选取胎鼠督脉以及附近宽约5mm处皮肤及皮下组织,将处理过的皮下筋膜结缔组织放置于消毒培养皿中,提取、培养和传代扩增细胞。2、采用生物医学工程学细胞生物力学试验方法,将传代扩增的成纤维细胞随机分为空白对照组、低强度摩擦力刺激组、中强度摩擦力刺激组、高强度摩擦力刺激组,并通过水平摇床对细胞进行摩擦力加载,水平摇床的环形振摇速度分别为空白对照组0转/min、低强度摩擦力刺激组60转/min、中强度摩擦力刺激组120转/min、高强度摩擦力刺激组180转/min,每组每天力学刺激1次,每次2小时,共加载3次,末次加力结束后将细胞置于培养箱中继续培养2小时后提取并收集细胞,放入EP管中并立即置于液氮罐中冻存备检。3、利用抗体芯片技术检测各组经穴筋膜组织蛋白表达情况。结果:1、3组摩擦力均对经穴筋膜组织成纤维细胞白介素及其受体表达有明显的调节作用,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组调节蛋白数量（包括上、下调）分别有28、51、38种,总体调节比较χ2 =102.503,P=0<0.01;3组间摩擦力对经穴局部组织白介素及其受体表达也有明显调节差异,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组下调蛋白分别有26、50、36种,保持稳定蛋白分别有28、5、18种,上调蛋白分别有2、1、2种,3组摩擦力组间调节比较χ2=23.833,P=0<0.01;其中,中强度摩擦力刺激组的总体调节幅度最大,高强度摩擦力刺激组次之,低强度摩擦力刺激组最小,并且均以下调为主。2、3组摩擦力均对经穴筋膜组织成纤维细胞生长因子及其受体表达有明显的调节作用,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组调节蛋白分别有31、47、35种,总体调节比较χ2 =107.142,P=0<0.01;3组间摩擦力对经穴局部组织生长因子及其受体表达也有明显调节差异,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组下调蛋白分别有10、41、21种,保持稳定蛋白分别有36、20、32种,上调蛋白分别有21、6、14种,3组摩擦力组间调节比较χ2=33.555,P=0<0.01;其中以中摩擦力刺激组的总体调节幅度最大,高强度摩擦力刺激组次之,并且都以下调为主,而低强度摩擦力刺激组的总体调节幅度最小,但以上调为主。3、3组摩擦力均对经穴筋膜组织成纤维细胞肿瘤坏死因子及其受体表达有明显的调节作用,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组调节蛋白分别有14、22、16种,总体调节比较χ2 =36.734,P=0<0.01;3组间摩擦力对经穴局部组织肿瘤坏死因子及其受体表达以下调为主,但无明显调节差异,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组下调蛋白分别有7、16、9种,保持稳定蛋白分别有18、10、16种,上调蛋白分别有7、6、7种,3组摩擦力组间调节比较 χ2=6.651,P=0.156>0.05。4、3组摩擦力均对经穴筋膜组织成纤维细胞趋化因子及其受体表达有明显的调节作用,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组调节蛋白分别有12、26、17种,总体调节比较χ2 =51.112,P=0<0.01;3组间摩擦力对经穴局部组织趋化因子及其受体表达也有明显调节差异,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组下调蛋白分别有2、20、10种,保持稳定蛋白分别有34、20、29种,上调蛋白分别有10、6、7种,3组摩擦力组间调节比较χ2=20.019,P=0<0.01。其中以中强度摩擦力刺激组的总体调节幅度最大,并且以下调为主;高强度摩擦力刺激组的总体调节幅度次之,并且也以下调为主;而低强度摩擦力刺激组的总体调节幅度最小,但以上调为主。5、3组摩擦力均对经穴筋膜组织成纤维细胞粘附分子表达有明显的调节作用,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组调节蛋白分别有11、9、9种,总体调节比较χ2 =23.834,P=0.001<0.05;3组间摩擦力对经穴局部组织粘附分子表达无明显调节差异,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组下调蛋白分别有5、8、4种,保持稳定蛋白分别有6、8、8种,上调蛋白分别有6、1、5种,3组摩擦力组间调节比较χ2=5.393,P=0.249>0.05。6、3组摩擦力均对经穴筋膜组织成纤维细胞信号通路蛋白及信号通路负反馈调节因子表达有明显的调节作用,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组调节蛋白分别有15、15、13种,总体调节比较χ 2 =32.310,P=0<0.01;3组间摩擦力对经穴局部组织信号通路蛋白及信号通路负反馈调节因子表达以下调为主,但无明显调节差异,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组下调蛋白分别有9、13、9种,保持稳定蛋白分别有7、7、9种,上调蛋白分别有6、2、4种,3组摩擦力组间调节比较χ2=3.380,P=0.496>0.05。7、3组摩擦力均对经穴筋膜组织成纤维细胞可明确归类的其他蛋白（干扰素及其受体类、集落刺激因子及其受体类、基质金属蛋白酶及其抑制剂类、促炎因子及抗炎因子类、脂肪因子类、白细胞分化抗原类、凝血因子类、丝氨酸蛋白酶类）表达有明显的调节作用,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组调节蛋白分别有14、34、22种,总体调节比较χ2 =72.478,P=0<0.01;3组间摩擦力对经穴局部组织其他类蛋白（能明确分类）表达也有明显调节差异,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组下调蛋白分别有7、33、19种,保持稳定蛋白分别有35、15、27种,上调蛋白分别有7、1、3种,3组摩擦力组间调节比较χ2=30.207,P=0<0.01;其中,以中强度摩擦力刺激组的总体调节幅度最大,高强度摩擦力刺激组次之,并且都以下调为主;而低强度摩擦力刺激组的总体调节幅度最小,但下调和上调幅度一致。8、3组摩擦力均对经穴筋膜组织成纤维细胞不可明确归类的其他蛋白表达有明显的调节作用,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组调节蛋白分别有2、12、6种,总体调节比较χ2 =27.778,P=0<0.01;3组间摩擦力对经穴局部组织其他类蛋白（不可归类）表达也有调节差异,与空白组相比较,低强度组、中强度组、高强度组下调蛋白分别有1、12、5种,保持稳定蛋白分别有17、7、13种,上调蛋白分别有1、0、1种,3组摩擦力组间调节比较χ2=15.441,P=0.004<0.05;其中以中强度摩擦力刺激组的总体调节幅度最大,高强度摩擦力刺激组次之,并且也都以下调为主;而低强度摩擦力刺激组的总体调节幅度最小,下调和上调幅度一致。9、3组摩擦力均对经穴筋膜组织成纤维细胞蛋白表达总体上有明显的下调作用,χ2 =337.325,P=0<0.01,并且3组间摩擦力对经穴局部组织成纤维细胞蛋白表达也有明显调节差异,χ2=68.784,P=0<0.01,其中以中强度摩擦力刺激组的总体调节幅度最大,并且以下调为主;高强度摩擦力刺激组的总体调节幅度次之,并且也以下调为主;低强度摩擦力刺激组的总体调节幅度最小,并且下调幅度还是高于上调。结论:1、摩擦力刺激经穴局部组织成纤维细胞后,细胞能调节一系列的生化活性物质的下调和上调,并且不同的刺激量对于其合成生化活性物质总体上有明显差异,证明模拟摩法摩擦力能够直接引起经穴局部组织细胞发生生化活性改变,且不同的刺激量引起的改变也不同。2、摩擦力刺激后经穴局部组织成纤维细胞后,不同摩擦力刺激量引起经穴局部组织成纤维细胞生化活性改变中,以中强度摩擦力刺激组最为明显,高强度摩擦力刺激组次之,低强度摩擦力刺激组最弱,说明摩擦力的刺激刺激对于细胞生化活性改变存在着一定的峰值。3、由于细胞因子生理上能增强机体免疫功能,病理上能导致炎症损伤,摩擦力对经穴相关筋膜组织成纤维细胞各种细胞因子合成表达的下调,可能在一定程度上揭示了推拿摩法治疗慢性筋伤时减轻炎症损伤的细胞生物力学机制。4、通过本次实验研究,得出体外模拟推拿摩法摩擦力刺激引起经穴筋膜组织成纤维细胞生化活性改变的结果,为解释推拿治病原理提供了新的实验证据。
柴政[5]（2016）在《一效膏促进慢性皮肤溃疡创面修复的研究》文中研究说明目的:通过观察皮肤破损、激素干预、异物植入3种因素对小鼠皮肤溃疡创面的影响,探讨最符合临床慢性皮肤溃疡特点的复合因素叠加造模方法,为进一步研究提供理想的动物模型。并在此基础上观察一效膏对慢性皮肤溃疡小鼠创面愈合的影响,探讨其促进创面愈合的作用机制。材料与方法:实验一:清洁级昆明种小鼠,50只,均为雄性,体重20-22g。随机数字表法随机分为:皮损+激素+异物组、皮损+激素组、皮损+异物组、单纯皮损组、空白组;每组各10只小鼠。皮损+激素+异物组与皮损+激素组小鼠连续3天股部肌注氢化可的松注射液4ml/kg,其余各组小鼠注射等量生理盐水。于造模第4天用4%水合氯醛麻醉后,剪去背部毛,在腰椎正中部减除部分皮肤,造成直径大约为1.2cm的圆形皮肤全层切口。皮损+激素+异物组、皮损+异物组小鼠于皮肤切开后同时用血管钳将皮肤组织分离至肌筋膜,然后用镊子轻轻拉开切口,将消毒的塑料环边缘埋入切口内,最后将紧靠塑料环边缘的皮肤缝合二针,以防环脱落。造模成功后观察小鼠一般状态、疮面形态、分泌物,定期称量小鼠体重,测量创面面积并计算创面愈合率,造模后14天处死小鼠,剪下创面新生肉芽组织及创周组织,行HE染色观察创面组织毛细血管新生及成纤维细胞增殖情况。实验二:清洁级昆明种小鼠40只,随机分为空白组、模型组、一效膏组、康复新液组,每组各10只,除空白组外,各组小鼠采用皮损+激素+异物组方法造模,各治疗组给予相应药物,模型组予生理盐水涂抹创面,各组均每日换药一次,以无菌纱布覆盖创面,空白组不予干预。治疗后定期肉眼观察小鼠创面大体情况,测量创面面积并计算创面愈合率,于治疗后第21天处死小鼠,取塑料环内肉芽组织,用电子天平称取肉芽肿湿重,然后以10%福尔马林溶液固定保存,HE染色进行形态学观察,免疫组化法检测创面组织中bcl-2、bax蛋白表达水平。实验三:清洁级昆明种小鼠120只,随机分为空白组、模型组、一效膏组、康复新液组,每组各30只,每组在其基础上再分为一周组、二周组、三周组3个亚组,每组各10只小鼠。各组小鼠于规定时间结束观察,处死后,取塑料环内肉芽组织,1/3浸入10%福尔马林溶液固定保存,做组织学观察、免疫组化法检测用。2/3放入冻存管内超低温冰箱保存,作real-timepcr检测用。观察指标:血管内皮生长因子（vegf）,成纤维细胞生长因子（fgf）,转化生长因子（tgf-β）,cd34抗原,及成纤维细胞（fb）计数。结果:实验一:1.一般状态:造模1周后皮损+异物组、单纯皮损组小鼠活动状态较好,运动灵敏,进食良好,大便成形,体态与空白组相比略显瘦削。皮损+激素+异物组与皮损+激素组体态明显消瘦,进食量少,大便稀薄不成形,活动量明显减少,蜷缩,四肢及尾部冷。2.创面情况:单纯皮损组疮面于造模后第3天即出现鲜红肉芽组织,创面湿润,少量浆液性渗出,创面平坦,无明显结痂,愈合速度快。皮损+激素组疮面颜色暗淡,分泌物清晰,肉芽组织量少且不鲜嫩,创面愈合较单纯皮损组慢。皮损+异物组初期即有大量稠厚黄白色分泌物,分泌物下创面基底组织颜色鲜红,后期转为暗红,创面结痂较厚,愈合趋势不明显。皮损+激素+异物组,初期有大量清晰分泌物,中后期疮形散漫,平坦塌陷,色泽紫暗,肉芽苍白并被结痂覆盖,愈合趋势不明显。3.体重情况:造模当天各组小鼠体重无明显差异,造模后第1周各组体重比较,单纯皮损组体重增长最快,皮损+激素+异物组体重增长最慢。析因设计方差分析表明,激素注射与异物植入两种因素对小鼠体重变化均有影响。4.造模后各组小鼠创面愈合率比较,单纯皮损组愈合速度最快,皮损+激素+异物组最慢。5.组织学观察:单纯皮损组切片中可见较多新生排列整齐的毛细血管,伴有大量成纤维细胞,少量纤维母细胞及萎缩的炎性细胞,无明显水肿。皮损+激素组切片可见新生毛细血管及成纤维细胞排列较为稀疏,可见炎性细胞。皮损+异物组切片显示大量萎缩的炎性细胞,偶可见巨噬细胞及浆细胞,大小血管排列杂乱且部分破裂,红细胞溢出散落于组织间隙,并伴有水肿。皮损+激素+异物组切片可见毛细血管生成及成纤维细胞稀少,排列杂乱,可见炎性细胞。空白组皮下组织切片可见肌纤维排列整齐有序,无炎性细胞浸润。实验二:1.创面大体观察:一效膏组小鼠创面用药后第3-7天创面色泽由晦暗转红活,出现肉芽组织,创面湿润,较多稠厚分泌物,无明显结痂,触之较软,愈合趋势明显;康复新液组小鼠用药后第3-9天可见少量肉芽组织,色泽尚红活,表面较为干燥,分泌物清晰,少许结痂覆盖,愈合趋势较明显;模型组小鼠创面色泽晦暗,疮形散漫,平坦塌陷,愈合早期无明显肉芽组织,致中后期依稀可见少许苍白肉芽,表面被结痂覆盖,触之较硬,无明显愈合趋势。2.创面愈合率:治疗第5天,各治疗组与模型组比较,一效膏组、康复新液组创面愈合率明显提高（p<0.05）。治疗第10天,各治疗组与模型组比较,一效膏组、康复新液组创面愈合率明显提高（p<0.05）;一效膏组与康复新液组比较,差异无统计学意义。治疗第17天,与模型组比较,一效膏组、康复新液组创面愈合率明显提高（p<0.05）。3.创面肉芽组织湿重:用药后21天,各治疗组与模型组相比,一效膏组与康复新液组小鼠创面塑料环内肉芽组织湿重明显提高（p<0.05）。4.创面bcl-2、bax蛋白表达:各治疗组与模型组相比,一效膏组与康复新液组小鼠创面肉芽组织内bcl-2表达明显升高（p<0.001）,而bax表达明显降低（p<0.001）。5.组织学观察:正常组皮下组织切片可见肌纤维排列整齐有序,无炎性细胞浸润。模型组肉芽组织增生不明显,毛细血管数量稀疏,排列杂乱,内皮细胞与成纤维细胞数量稀少,可见炎性细胞,瘢痕增生明显。一效膏组肉芽组织增生较明显,毛细血管生成明显较模型组多,排列整齐,伴有大量成纤维细胞及少量纤维母细胞,偶可见少量炎性细胞,瘢痕增生不明显。康复新液组毛细血管生成、成纤维细胞情况与一效膏组相似,可见少量瘢痕组织。实验三:1.成纤维细胞计数:各治疗组与模型组比较,用药后第7、14、21天,一效膏组与康复新液组成纤维细胞计数明显提高（p<0.05）。2.cd34结果:各时间点,模型组cd34蛋白表达水平均明显高于空白组（p<0.01）;与模型组相比,各治疗组cd34蛋白表达水平明显提高（p<0.01）。3.vegf结果:免疫组化:各时间点,模型组vegf蛋白表达水平均明显高于空白组（p<0.05）。与模型组比较,各时间点一效膏组vegf蛋白表达均水平均有所提高,其中第7、14天两组间比较差异有统计学意义（p<0.05）,与模型组比较,各时间点康复新液组vegf蛋白表达均有所提高,其中第14天两组间比较差异有统计学意义（p<0.01）。rt-pcr:各时间点模型组vegfmrna表达水平均高于空白组（p<0.05）。与模型组比较,各时间点治疗组vegfmrna表达水平均有所提高（p<0.05）。4.fgf结果:免疫组化:各时间点,模型组fgf蛋白表达水平均明显高于空白组（p<0.01）。与模型组比较,各时间点一效膏组FGF蛋白表达均水平均有所提高,其中第14天两组间比较差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较,各时间点康复新液组FGF蛋白表达均有所提高。RT-PCR:各时间点模型组FGF mRNA表达均高于空白组,其中第7天两组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,各时间点,一效膏组FGF mRNA表达均有所提高（P<0.01）。与模型组比较,各时间点康复新液组FGF mRNA表达均有所提高。5.TGF-β结果:免疫组化:各时间点,模型组TGF-β蛋白表达水平均高于空白组（P<0.05）。与模型组比较,各时间点一效膏组TGF-β蛋白表达均水平均有所提高,其中第7、14天两组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,各时间点康复新液组TGF-β蛋白表达均有所提高,其中第7、14天两组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。RT-PCR:各时间点模型组TGF-βmRNA表达均高于空白组（P<0.05）。与模型组比较,各时间点一效膏组TGF-βmRNA表达水平有所提高（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,康复新液组TGF-βmRNA表达水平有所提高,其中第14、21天差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论:1.皮肤缺损叠加激素注射与异物植入的复合因素造模方法,能有效维持创面慢性皮肤溃疡的状态,且符合中医外科阴症疮疡的证候特点。2.一效膏能有效促进慢性皮肤溃疡创面的愈合,提高创面愈合率,并能促进创面肉芽组织的生成,其作用机制可能与上调bcl-2表达水平,下调bax表达水平有关。3.一效膏能通过上调VEGF、FGF、TGF-β表达水平,促进创面毛细血管的新生和成纤维细胞的增殖,进而促进慢性皮肤溃疡创面的愈合。
李学东,陈家康,覃军,麦用军,肖振勇[6]（2015）在《成纤维细胞生长因子修饰骨髓间充质干细胞可促进颅脑损伤后功能的恢复》文中研究指明背景:骨髓间充质干细胞虽然能促进神经再生,但因治疗方式局限,并未取得较好的疗效。应用单纯的骨髓间充质干细胞移植治疗脑损伤还远不能达到治疗和改善病情的目的。目的:探讨成纤维细胞生长因子修饰的骨髓间充质干细胞对颅脑损伤后功能恢复及胶质纤维酸性蛋白表达的影响。方法:采用液压冲击法建立SD大鼠颅脑创伤模型,建模后随机分为对照组（颅脑损伤组）、骨髓间充质干细胞组及成纤维细胞生长因子-骨髓间充质干细胞组。体外分离、培养骨髓间充质干细胞,利用腺病毒载体介导成纤维细胞生长因子基因转染入骨髓间充质干细胞。采用Western-Blot法检测成纤维细胞生长因子基因转染及胶质纤维酸性蛋白的表达情况;应用免疫组化检测Brd U标记的骨髓间充质干细胞在脑内的分布及数量;利用Longa评分法于移植后1 d、3 d、1周、2周对大鼠进行神经功能学评分;TUNEL法检测脑组织细胞的凋亡情况。结果与结论:Western-Blot结果显示,成纤维细胞生长因子基因成功转入腺病毒载体,并且能够在骨髓间充质干细胞中表达,且胶质纤维酸性蛋白在成纤维细胞生长因子-骨髓间充质干细胞组的表达明显高于其他两组（P<0.05）。BrdU标记的骨髓间充质干细胞在成纤维细胞生长因子-骨髓间充质干细胞组脑组织中的表达明显高于其他两组（P<0.05）。移植后2周,成纤维细胞生长因子-骨髓间充质干细胞组大鼠的神经功能缺损Longa评分明显低于其他两组（P<0.05）。TUNEL检测到的凋亡细胞数在成纤维细胞生长因子-骨髓间充质干细胞组明显少于其他两组（P<0.05）。提示成纤维细胞生长因子修饰的骨髓间充质干细胞移植能够减轻颅脑损伤模型大鼠的神经功能损伤程度,促进神经功能恢复,效果优于骨髓间充质干细胞单独移植治疗。
李锦春[7]（2006）在《间歇光照、呋喃苯胺酸、维生素C对肉鸡PHS的预防及其机理研究》文中认为尽管国内外已对肉鸡肺动脉高压综合征（pulmonary hypertension syndrome，PHS）又称肉鸡腹水综合征（ascites）进行了多年研究，但它仍然是使世界养禽业遭受重大经济损失的一个疾病。全世界每年约有4％的肉鸡死于PHS，造成高达10亿美元的损失。由于肉鸡PHS是一个多因性疾病，药物防治有局限性并且存在残留的问题。早期限饲可以降低PHS发病率，但会引起应激。控制光照能降低肉鸡PHS发病率和应激，并且方便、省电，但公认效果显着的1小时明：3小时暗的措施在国内难以执行和推广。寻求一种易行的控光措施更具有实际意义。由于对控制光照防治肉鸡PHS的机理尚不完全明了，方案的选择存在很大盲目性，因此，首先要清楚控制光照防治PHS的作用机制。关于控制光照防治肉鸡PHS的报道主要是观察对生产性能和PHS发病率的影响，而对其机理仅从缺氧状况、红细胞比容、血液中甲状腺素、生长激素和糖皮质激素方面进行了研究。肺血管重构导致肺动脉高压（pulmonary hypertension，PH）持续发展并难以逆转，是哺乳动物PH的重要病理基础。PHS肉鸡也发生了肺动脉重构，但是其在肉鸡PHS的发生过程中是否占据与哺乳动物肺血管重构同等重要的地位，机制如何?控制光照降低PHS发病率的作用机理是否与肺血管形态改变有关，尚不清楚。因此，本文从氧自由基、血小板源生长因子-β受体（PDGF-βR）、蛋白激酶C-α（PKCα）及增殖细胞核抗原（PCNA）等变化入手，在体内和体外两个层次上探讨间歇光照对肉鸡肺血管重构的影响及其分子生物学机制，为指导生产实践提供理论依据。试验Ⅰ间歇光照对肉鸡肺动脉高压综合征发病率及肺血管重构的影响。观察在低温环境下间歇光照对肉鸡PHS的防治效果及其对肉鸡肺血管重构的影响。320羽肉鸡随机分为4组：常温组按常规饲养；低温三个组采用低温诱发PHS，并于9d～30d分别在夜间停止光照0、3、5h，以后恢复连续光照。记录PHS发病数、体重和耗料量，测定肺动脉的管壁面积与血管总面积之比（WA／TA）、平均中膜厚度（mMTPA）等指标。结果环境低温使PHS发病率升高，反映血管重构指标的WA／TA和mMTPA值也显着升高，而间歇光照能够有效地降低寒冷诱发的PHS发病率和上述各项值。控制光照期间间歇光照组肉鸡体重低于低温对照组，但最终体重和料重比与之无显着差异。在肉鸡生长早期实施间歇光照制度能够有效降低低温诱发的PHS发病率，抑制肺小动脉重构可能是其重要机理之一。试验Ⅱ间歇光照对肉鸡肺动脉高压综合征发病率及体内脂质过氧化作用和抗氧化酶活性的影响。观察控制光照对低温诱导的肉鸡PHS发病率及体内脂质过氧化作用和抗氧化酶活性的影响。320羽肉鸡随机分为四个组。常温组按常规饲养；低温三个组采用低温诱发PHS，并于9d～30d分别在夜间停止光照0、3、5h，以后恢复连续光照。低温显着升高了PHS发病率、右心全心比（RV／TV）、肺厚壁末稍血管百分率（TWPV％）和丙二醛（MDA），而使血浆超氧化物歧化酶（SOD）活性降低。控制光照使SOD活性升高而显着降低了PHS发病率、RV／TV、TWPV％和MDA。减轻体内脂质过氧化作用，提高机体抗氧化酶的活性和减轻以非肌型肺动脉肌型化为特征肺血管重构，可能是间歇光照降低肉鸡PHS发病率的部分机制。试验Ⅲ间歇光照对低温诱导的肉鸡肺细小动脉血管重构及其PKCα表达的影响。观察在低温环境下间歇光照对肉鸡肺细小动脉蛋白激酶Cα（PKCα）表达的影响及其与肺血管重构的关系。320羽肉鸡随机分为四个组。常温组按常规饲养；低温三个组采用低温诱发PHS，并于9d～30d分别在夜间停止光照0、3、5h，以后恢复连续光照。测定RV／TV、MDA、SOD、WA／TA、mMTPA、红细胞压积（PCV）；采用免疫组化方法标记肺动脉PKCα，以OD值代表PKCα的表达。结果环境低温使肉鸡PHS发病率升高，RV／TV、WA／TA、mMTPA、MDA值和肺细小动脉PKCα的OD值显着升高，而间歇光照能够有效地降低寒冷诱发的PHS发病率和上述指标。肺小动脉PKCα的表达从23日龄起与mMTPA和WA／TA呈正相关，并且具有显着性。寒冷诱使肉鸡肺小动脉PKCα表达的上调可能参与了肺血管重构的形成过程，间歇光照抑制肺血管重构可能与PKCα下调有关。试验Ⅳ间歇光照对低温诱导的肉鸡肺细小动脉血管重构及其PDGF-β受体表达的影响。观察在低温环境下间歇光照对肉鸡肺细小动脉PDGF-β受体表达的影响，及其与肺血管重构的关系。320羽肉鸡随机分为四个组，常温组按常规饲养；低温三个组采用低温诱发PHS，并于9d～30d分别在夜间停止光照0、3、5h，以后恢复连续光照。测定PCV、WA／TA和mMTPA等指标；采用免疫组化方法标记肺动脉PDGF-β受体，以OD值代表PDGF-β受体的表达。结果环境低温使PDGF-β受体表达上调，WA／TA和mMTPA值也显着升高，而间歇光照明显抑制血管重构，并且使肺动脉PDGF-D受体的OD值降低。PDGF-β受体的表达从23日龄开始与mMTPA和WA／TA呈正相关，并且具有显着性。PDGF-β受体表达上调可能与低温所致肺小动脉重构有密切关系，而间歇光照减轻肉鸡肺血管重构可能与抑制PDGF-β受体表达有关。试验Ⅴ间歇光照对低温诱导的肉鸡肺细小动脉血管重构及其PCNA表达的影响。观察在低温环境下间歇光照对肉鸡肺细小动脉增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响，并探讨PCNA与肺血管重构的关系。320羽肉鸡随机分为四个组，常温组按常规饲养；低温三个组采用低温诱发PHS，并于9 d～30 d分别在夜间停止光照0、3、5 h，以后恢复连续光照。测定WA／TA和mMTPA等指标；采用免疫组化方法标记PCNA，图像分析软件分别计数每条血管中膜PCNA阳性细胞数和细胞总数，求出百分数即为增殖指数（PI）。结果环境低温使肺动脉的WA／TA和mMTPA值和PCNA值显着升高，而间歇光照能够有效地减轻寒冷诱发的肺动脉重构和PCNA值。在肉鸡快速生长的早期采用间歇光照能够抑制寒冷所致的肺血管重构可能与抑制肺动脉平滑肌细胞增殖有关。试验Ⅵ添加呋喃苯胺酸对低温诱导的肉鸡肺动脉高压综合征的发病率及肺血管重构的影响。观察在低温环境下呋喃苯胺酸对肉鸡PHS的防治效果及其对肺血管重构的影响。240羽肉鸡于14 d时随机分为A、B和C三组分置于两个鸡舍。A组按常规饲养，B组和C组采取低温诱发PHS，并从30 d至44 d B组不添加药物而C组于日粮中添加0.015％的呋喃苯胺酸。记录每周PHS发病数、体重。定期测定RV／TV、PCV、WA／TA和mMTPA等各项值。结果饲料中添加呋喃苯胺酸降低了寒冷诱发的PHS发病率。B组RV／TV、WA／TA和mMTPA值显着升高，而C组使之降低，并在44 d差异显着；C组体重显着低于B组。降低肺动脉压，抑制以肺动脉壁肥厚为特征的血管重构可能是呋喃苯胺酸有效降低低温所致PHS发病率的部分机制。试验Ⅶ维生素C对常温下肉鸡肺动脉高压综合征发病率及肺血管重构的影响。观察在常温环境下维生素C对肉鸡PHS的防治效果及其对肺血管重构的影响。150羽肉鸡于21 d时随机分为C、T1和T2组，按常规饲养，C组不添加药物，T1组和T2组分别从21 d至37 d在饲料中添加维生素C 200 mg／kg和500 mg／kg。统计PHS的死亡数并定期称重。测定RV／TV、PCV、MDA、SOD、WA／TA和mMTPA等指标。结果与对照组相比，T1组PHS死亡率和RV／TV值显着降低，80-200微米肺动脉WA／TA和mMTPA值显着降低，PCV和MDA值极显着降低。T2组PHS死亡率与对照组相同，PCV值显着降低，50-80微米肺动脉的WA／TA和mMTPA值极显着高于对照组，MDA水平极显着高于对照组而SOD值显着降低。降低PCV值、清除体内过多的氧自由基及减轻肺血管重构可能是低剂量维生素C有效防治PHS的部分机制，而使氧自由基产生增多，导致肺血管重构可能是高剂量VC防治PHS失败的部分原因试验Ⅷ蛋白激酶C抑制剂Calphostin C对PDGF-BB诱导的肉鸡肺动脉血管平滑肌细胞增殖的影响．探讨蛋白激酶C抑制剂Calphostin C对血小板源生长因子（PDGF-BB）诱导的肉鸡肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖的影响。肉鸡肺动脉平滑肌细胞体外培养，用PDGF-BB刺激PASMC，采用细胞记数法和流式细胞仪测定Calphostin C对PASMC增殖的影响．结果Calphostin C显着地抑制PDGF-BB诱使的PASMC增殖，使细胞生长停滞于G0／G1期。蛋白激酶C抑制剂Calphostin C抑制了PASMC增殖，提示PDGF-BB刺激血管平滑肌细胞增殖与PKC信号传导通道有关，Calphostin C可能作为防治肺血管重构的一种药物。试验ⅨX／X0体系作用的肺动脉内皮细胞条件培养液对内鸡肺动脉平滑肌细胞的促增殖作用及褪黑激素对其的影响。观察黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶（xanthine-xanthineoxidase，X-XO）条件培养液对肉鸡肺血管平滑肌细胞是否有促增殖作用，及褪黑激素能否抑制其增殖。肉鸡肺动脉平滑肌细胞与X／XO内皮细胞条件培养液共培养刺激PASMC，采用流式细胞仪测定X／XO条件培养液和褪黑激素对PASMC增殖的影响，并检测培养液中的丙二醛（MDA）含量。与正常内皮细胞条件培养基相比，X／XO条件培养基促使PASMC发生增殖，并从G0／G1期进入S和G2／M期，其培养液中MDA含量显着高于对照组；当预先加入褪黑激素时，抑制了X／XO条件培养液的促平滑肌细胞增殖作用，G0／G1期细胞比例提高，而S期、G2／M期细胞减少。褪黑激素组细胞培养液中MDA含量显着低于X／XO模型组。清除培养液中的氧自由基可能是褪黑激素抑制X／XO条件培养液诱导肉鸡肺动脉平滑肌细胞增殖的机制之一。
李培兵[8]（2005）在《瘦素促进伤口愈合作用的机制研究》文中研究指明目的：本研究对外源性瘦素促进伤口愈合作用的机制进行了探索，旨在揭示瘦素促进伤口愈合作用的分子及细胞机制，为临床应用提供实验依据。 方法：本研究通过在大鼠创伤模型伤口局部应用瘦素，观察了不同时期用药对伤口愈合的影响；并观察了瘦素对伤口组织胶原蛋白、NO、iNOS、生长因子及其mRNA水平的调节作用；在此基础上，通过体外实验研究了瘦素对成纤维细胞增殖、胶原、NO合成及对胶原、iNOS、生长因子mRNA水平的调节作用。 结果：瘦素具有加速伤口愈合的作用，并且有明显的剂量效应关系；在伤后7-12天给予比伤后1-6天给予瘦素的促进作用明显增强。 在大鼠伤口局部应用1μg／cm2·d剂量的外源性瘦素后，伤口组织胶原基因及蛋白表达比对照组明显增强；NO水平明显升高，iNOS基因及蛋白表达也明显增强；EGF mRNA水平有升高的趋势；而伤口组织的FGF、TGF-β1及TGF-β1 mRNA水平与对照组相比无显着差异。 体外实验培养的大鼠皮肤成纤维细胞显示，给予200ng／ml和400ng／ml瘦素能提高MTT实验中的吸光度、增加细胞中3H-胸腺嘧啶脱氧核苷和3H-脯氨酸的参入量、增多胶原蛋白合成量，但没有改变培养液中NO的含量；应用200ng／ml剂量的瘦素后，成纤维细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原、iNOS、EGF、IGF-Ⅰ、bFGF和VEGF的mRNA水平在4h、8h和24h时比对照组升高或显着升高，而PDGF和TGF-β1的mRNA水平与同期对照组相比无显着差别。 结论：应用瘦素具有明显的促进伤口愈合的作用，其作用机制是增强伤口组织成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的合成；增强伤口组织iNOS表达，使NO生成增多，间接地介导了促进作用。在瘦素促进伤口愈合过程中，炎症细胞和EGF可能参与了作用，而bFGF、IGF-Ⅰ和VEGF是否参与了作用还需要进一步研究确定。
王兆海[9]（2003）在《增生性瘢痕放射治疗的基础研究》文中进行了进一步梳理增生性瘢痕的防治目前仍是临床医生面临的重要难题之一。增生性瘢痕的形成主要是组织内成纤维细胞过量增殖和胶原纤维的过度沉积所致，在此过程中，各种炎症细胞和TGF-β、PDGF、FGF等多肽生长因子参与了其形成。放射治疗能够有效地抑制增生性瘢痕的形成。术后放疗已经成为目前增生性瘢痕和瘢痕瘤的重要治疗方法。放射治疗的剂量、时间、方式等若掌握不当，易造成皮肤和（或）深部组织损伤。国内外有关学者已经对瘢痕放射治疗进行了一系列的基础研究和临床观察，但尚缺少关于放射治疗过程中生长因子及其受体表达规律的研究，同时各地的放疗还缺乏公认统一的方案，既影响到瘢痕治疗的效果，又增加了临床并发症的发生。 目的意义：为了评价临床常用的几种治疗方案的效果，我们在制作大鼠创伤模型基础上，利用加速器产生的6Mev电子线按不同方案照射局部创面。通过动态研究照射后大鼠创伤愈合过程的病理改变和在此过程中转移生长因子β1（TGF-β1）、血小板衍生生长因子（PDGF）及其受体的表达，并在体外研究不同剂量照射后人胚肺成纤维细胞（HELF）和人脐静脉内皮细胞（ECV304）中TGF-β1、PDGF、FGF等及其受体表达的变化，进一步探讨加速器放射治疗增生性瘢痕的机理，为完善增生性瘢痕放射治疗方案并提高疗效提供病理学理论依据。 本研究密切结合临床目前常用的放疗方案，采用医用直线加速器产生的6Mev高能电子线，对大鼠创伤模型进行分次照射，观察伤口愈合的病理变化，免疫组化方法检测照射后组织内PDGF和TGF-β1含量的变化。同时以不同剂量照射体外培养的血管内皮细胞和成纤维细胞，研究其TGF-β1、PDGF、FGF及受体表达的变化规律。本研究对进一步阐明增生性瘢痕放疗的机理，以及指导临床采取合理、安全、有效的瘢痕治疗策略具有积极的意义。 材料和方法： 清洁级雄性Wistar大鼠36只，体重200±20g，随机分为四组，一组作为未照射空白对照组（9只），三组作为照射组（各9只），分组方法见下。经1％戊巴比妥钠30mg／kg腹腔注射麻醉后，在每只大鼠背部脊柱两侧切2个圆形创面，创面直径1.5cm，深达皮下组织全层，2个创面间隔1.5cm。处理完毕后以无菌纱布包扎伤口，动物置于单笼饲养。军事医学科学院硕士学位论文 术后48小时，将大鼠再次麻醉后固定于特制木板支架，利用直线加速器产生的6Mev电子线照射背部创口，照射野周围用铅板防护，照射剂量率为240eGy/min。分组300eGy组（15Gy/5次/sd，单次剂量300eGy，每日一次，连续照射5次）、4O0eGy组（20Gy/5次/sd，单次剂量400eGy，每日一次，连续照射5次）和500eGy组（15Gy/3次/sd，单次剂量500eGy，隔日一次，连续照射3次）各9只。 分别于照射前、照射开始后隔天一次观察创面愈合及渗出情况。对照组分别于致伤后Zd、sd、7d，10d，14d，Zld麻醉后取材，照射三组均在伤后7d，10d，14d，17d，21d，28d取材，将标本于4%甲醛液中固定。采用常规HE染色后进行病理组织学观察、天狼猩红染色后偏光镜观察胶原纤维含量变化、免疫组化方法和图象分析定性和定量检测各组伤口愈合过程中胶原纤维和TGF一pl、PDGF及其受体表达的动态变化。 将体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV3O4和人胚肺成纤维细胞各分两组，采用6Mev电子线，分别用20Gy、10Gy进行照射，剂量率为240eGy/分。继续培养，照后12h、24h、48h进行固定，免疫组化方法检测TGF一pl、PDGF、FGF及其受体的表达。结果:1、各照射组创面愈合延迟，对照组创面平均n天全部愈合，照射组平均 14天愈合。2、三照射组肉芽组织产生和胶原纤维的合成受抑制，与同期对照组比较 照射组肉芽组织层较薄，胶原纤维细小，含量较少。在早期SO0cGy组胶 原纤维较其余2组少，21天以后，胶原纤维较其余各组粗大，部分融合， 部分呈卷发状。3O0cGy照射组较其它各组胶原纤维细小，排列稀疏。3、照射组TGF一日1、PDGF一A及受体表达降低，高峰出现时间晚。对照组在 伤后7天达到高峰，明显高于各照射组。30ocGy与 40ocGy组均在710 天达到高峰，SOOcGy照射组表达高峰出现最晚，10一14天达到高峰，以 后逐渐降低，与其它各组同期相比较，显着升高。4、放射治疗的效果可能与单次照射剂量有关。300cGy组（15Gy/5次/sd，单 次剂量3O0cGy，每日一次，连续照射5次）对胶原形成和生长因子及受 体表达的抑制效应较400eGy组（20Gy/5次/sd，单次剂量400eGy，每日 一次，连续照射5次）与 500eGy组15Gy/3次/sd，单次剂量500eGy，隔 日一次，连续照射3次)为明显。5、照射后体外培养的ECV304细胞和HELF细胞TGF一日1、PDGF、FGF及受体 的表达均降低。单次剂量ZOGy照射后，TGF一旦1、PDGF、FGF及受体的 表达均较单次剂量10Gy明显减少。结论: 1、建立了加速器照射抑制瘫痕增生的实验模型。该模型能够较好的模拟加 速器照射后瘫痕形成的病理过程。军事医学科学院硕士学位论文2、加速器照射能够使创面愈合延迟，抑制胶原纤维和细胞间基质的合 成。3、加速器照射抑
朱金明,赖西南,王正国,王丽丽[10]（2003）在《P物质对大鼠成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响》文中研究说明目的 探讨P物质 （SP）对大鼠肉芽组织成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子 （bF GF）及其受体 （FGFR 1）表达的影响。方法 采用成纤维细胞体外培养和逆转录 多聚酶链反应（RT PCR）技术 ,观察SP在不同浓度 （ 1× 10 - 9～ 1× 10 - 5mol L）及孵育时间 （ 0、3、6、12、2 4h）情况下刺激成纤维细胞后 ,其bFGF、FGFR 1mRNA表达情况。结果 SP可上调大鼠成纤维细胞bF GF、FGFR 1mRNA表达。SP对bFGF的量 效曲线呈双相分布 ,最大效应浓度为 1× 10 - 7mol L。但SP仅在高浓度 （ 1× 10 - 6 ～ 1× 10 - 5mol L）时促进FGFR 1表达。在最大效应浓度 （ 1× 10 - 7～ 1× 10 - 5mol L）时 ,SP对bFGF、FGFR 1表达的上调作用分别于刺激细胞后 3、12h达高峰。结论 SP对大鼠肉芽组织成纤维细胞bFGF、FGFR 1基因表达存在直接影响 ,其表现形式与SP的刺激浓度及孵育时间有关 ,这可能是SP在创伤修复中发挥作用的机制之一。
二、P物质对大鼠成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、P物质对大鼠成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响（论文提纲范文）
（1）调肾通络方防治重度宫腔粘连术后再粘连的临床疗效及其调控TGF-β1/Smads信号通路的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 调肾通络方防治IUA术后再粘连的临床疗效 |
| 1 研究对象 |
| 2 研究方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第二部分 IUA纤维化程度及与TGF- β1/Smads信号通路的相关性 |
| 1 材料及方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第三部分 动物实验 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第四部分 细胞实验 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 创新点、不足与展望 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 综述 宫腔粘连中西医发病机制及术后再发粘连防治研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 中英文缩略词表 |
| 临床病例观察表 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（2）三法三穴对SNI大鼠施万细胞增殖和神经瘢痕形成的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 推拿治疗周围神经损伤的机理研究进展 |
| 1 推拿能够促进SNI大鼠损伤神经超微结构修复 |
| 2 推拿能够促进SNI大鼠运动功能的恢复 |
| 3 推拿能够促进SNI大鼠感觉功能的恢复 |
| 4 推拿对SNI大鼠干预的最佳刺激参数 |
| 参考文献 |
| 综述二 转化生长因子-β1对周围神经损伤后修复的研究进展 |
| 1 转化生长因子-β1蛋白概述 |
| 2 TGF-β1参与周围损伤后修复 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 实验研究 |
| 实验一 三法三穴对SNI大鼠行为学及坐骨神经瘢痕和SC的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 实验二 三法三穴对SNI大鼠TGF-β1/Smad2通路蛋白的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附件 |
| 附件1 三法三穴干预后坐骨神经HE染色结果 |
| 附件2 坐骨神经S100在不同时间点的表达情况 |
| 附件3 三法三穴干预后坐骨神经Ⅰ/Ⅲ型胶原及FN的表达情况 |
| 附件4 三法三穴干预后坐骨神经TGF-β1的表达情况 |
| 附件5 三法三穴干预后坐骨神经Smad2的表达情况 |
| 附件6 三法三穴干预前后坐骨神经TGF-β1的表达变化 |
| 附件7 三法三穴干预前后坐骨神经Smad2的表达变化 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）碱性成纤维细胞生长因子转染骨髓间充质干细胞移植治疗慢性阻塞性肺疾病的作用及机制（论文提纲范文）
| 文章快速阅读: |
| 文题释义: |
| 缩略语: |
| 0引言Introduction |
| 1 材料和方法Materials and methods |
| 1.1 设计 |
| 1.2 时间及地点 |
| 1.3 材料 |
| 1.3.1 实验动物 |
| 1.3.2 实验试剂 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.4.1 骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定与碱性成纤维细胞生长因子基因转染 |
| 1.4.2 慢性阻塞性肺疾病大鼠模型制备及实验分组 |
| 1.4.3 肺组织白细胞介素10、白细胞介素4 mRNA的表达 |
| 1.4.4 骨髓间充质干细胞在肺组织中的分化 |
| 1.5 主要观察指标 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果Results |
| 2.1 骨髓间充质干细胞的形态、鉴定和标记、转染结果 |
| 2.2 肺组织病理学改变 |
| 2.3 各组大鼠外周血白细胞介素10、白细胞介素4水平 |
| 2.4 各组大鼠肺组织中白细胞介素10、白细胞介素4mRNA的表达 |
| 2.5 骨髓间充质干细胞在肺组织中的分化 |
| 3 讨论Discussion |
（4）体外摩擦力刺激对筋膜成纤维细胞蛋白表达响应特征的研究及推拿摩法“消肿止痛”细胞生物力学机制探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 主要实验器材 |
| 1.1.3 主要实验试剂及药品 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 组织培养方法 |
| 1.2.2 摩擦力加载试验 |
| 1.2.3 检测方法 |
| 2. 结果 |
| 2.1 摩擦力对经穴相关筋膜结缔组织蛋白芯片图谱表达的影响 |
| 2.2 抗体芯片质量控制 |
| 2.3 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞蛋白表达变化的影响 |
| 2.3.1 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞白介素及其受体类蛋白表达变化的影响 |
| 2.3.2 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞生长因子及其受体类蛋白表达变化的影响 |
| 2.3.3 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞肿瘤坏死因子及其受体类蛋白表达变化的影响 |
| 2.3.4 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞趋化因子及其受体类蛋白表达变化的影响 |
| 2.3.5 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞粘附分子类蛋白表达变化的影响 |
| 2.3.6 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞信号通路蛋白及信号通路负反馈调节因子类蛋白表达变化的影响 |
| 2.3.7 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞其他类蛋白(能明确分类)表达变化的影响 |
| 2.3.8 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞其他类蛋白(不可归类)表达变化的影响 |
| 2.3.9 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞蛋白总体表达变化的影响 |
| 2.3.10 三组不同摩擦力刺激对经穴局部组织成纤维细胞蛋白表达影响的聚类分析 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 推拿作用机理研究概况及存在问题 |
| 3.2 蛋白芯片在中医药领域的运用 |
| 3.3 筋膜成纤维细胞对摩擦力刺激的蛋白表达响应特征及推拿“消肿止痛”细胞生物力学机制探讨 |
| 3.3.1 功能蛋白的分类及功能概述 |
| 3.3.2 不同摩擦力对经穴局部组织白介素及其受体表达变化的影响和意义 |
| 3.3.3 不同摩擦力对经穴局部组织生长因子及其受体表达变化的影响和意义 |
| 3.3.4 不同摩擦力对经穴局部组织肿瘤坏死因子及其受体表达变化的影响和意义 |
| 3.3.5 不同摩擦力对经穴局部组织趋化因子及其受体表达变化的影响和意义 |
| 3.3.6 不同摩擦力对经穴局部组织粘附分子表达变化的影响和意义 |
| 3.3.7 不同摩擦力对经穴局部组织信号通路蛋白及信号通路负反馈调节因子表达变化的影响和意义 |
| 3.3.8 不同摩擦力对经穴局部组织其他类蛋白表达变化的影响和意义 |
| 3.3.9 不同摩擦力对经穴局部组织蛋白总体表达变化的影响和意义 |
| 结论 |
| 总结 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 附录一 英文缩略词表 |
| 附录二 综述 |
| 参考文献 |
| 附录三 致谢 |
| 附录四 个人简介 |
（5）一效膏促进慢性皮肤溃疡创面修复的研究（论文提纲范文）
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 慢性皮肤溃疡小鼠模型的建立与中医阴症疮疡模型的探讨 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 一效膏对慢性皮肤溃疡小鼠创面愈合的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 一效膏对慢性皮肤溃疡小鼠创面组织VEGF、FGF、TGF-β影响的研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 附录 综述 |
| 慢性皮肤溃疡的中医研究概况 |
| 参考文献 |
| 现代医学关于生长因子对创面修复的调节作用的研究现状 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（6）成纤维细胞生长因子修饰骨髓间充质干细胞可促进颅脑损伤后功能的恢复（论文提纲范文）
| 0 引言Introduction |
| 1 材料和方法Materials and methods |
| 1.1设计 |
| 1.2时间及地点 |
| 1.3材料 |
| 1.4实验方法 |
| 体外分离、培养骨髓间充质干细胞: |
| 成纤维细胞生长因子基因转染: |
| 采用液压冲击法建立大鼠颅脑创伤模型[14]: |
| 实验分组: |
| 采用Western-Blot法检测成纤维细胞生长因子基因转染及胶质纤维酸性蛋白的表达情况: |
| 应用免疫组化检测Brd U标记的骨髓间充质干细胞在脑内的分布及数量: |
| 利用Longa评分法于移植后1 d、3 d、1周、2周对SD大鼠进行神经功能学评分: |
| TUNEL法检测脑组织细胞的凋亡情况: |
| 1.5主要观察指标 |
| 1.6统计学分析 |
| 2 结果Results |
| 2.1实验动物数量分析 |
| 2.2骨髓间充质干细胞的形态观察 |
| 2.3 Western blot法检测成纤维细胞生长因子及胶质纤维酸性蛋白的表达 |
| 2.4应用免疫组化检测Brd U标记的骨髓间充质干细胞在脑内的分布及数量 |
| 2.5 Longa神经功能学评分结果 |
| 2.6 TUNEL法检测脑组织细胞的凋亡情况 |
| 3 讨论Discussion |
| 作者贡献: |
| 利益冲突: |
| 伦理问题: |
| 文章查重: |
| 文章外审: |
| 学术术语: |
| 作者声明: |
| 文章版权: |
（7）间歇光照、呋喃苯胺酸、维生素C对肉鸡PHS的预防及其机理研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 符号及缩略语 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 肉鸡PHS发病机制和防治的研究进展 |
| 1 肉鸡PHS发病机制的研究进展 |
| 1.1 心输出量增加 |
| 1.2 血液流过肺脏阻力增加 |
| 1.2.1 血液粘滞度增加 |
| 1.2.2 红细胞变形能力降低 |
| 1.2.3 肺血管容量不足 |
| 1.2.4 肺血管重构和肺血管收缩 |
| 1.2.4.1 肺血管重构 |
| 1.2.4.2 肺血管收缩 |
| 2 肉鸡PHS防治的研究进展 |
| 2.1 早期限饲防治肉鸡PHS的研究进展 |
| 2.2 肉鸡PHS抗病育种的研究进展 |
| 2.3 肉鸡PHS的药物防治 |
| 2.3.1 L-精氨酸(L-arginine,L-Arg) |
| 2.3.2 抗氧化剂 |
| 2.3.2.1 维生素E和维生素C |
| 2.3.2.2 补硒 |
| 2.3.3 碳酸氢钠(NaHCO3) |
| 2.3.4 脲酶抑制剂 |
| 2.3.5 利尿剂 |
| 2.3.6 β-肾上腺素受体激动剂(Beta-adrenergicagonists) |
| 2.3.7 中草药 |
| 2.3.8 内皮素-1受体拮抗剂 |
| 2.3.9 其它药物 |
| 2.4 综合管理 |
| 参考文献 |
| 第二章 控制光照和早期限饲防治肉鸡PHS的研究进展 |
| 1 控制光照防治肉鸡PHS的研究进展 |
| 1.1 控制光照对肉鸡PHS的发病率和生产性能的影响 |
| 1.2 控制光照与免疫的关系 |
| 1.3 控制光照防治肉鸡PHS机理的研究进展 |
| 1.4 光照制度与褪黑激素 |
| 1.4.1 褪黑激素分泌及其功能 |
| 1.4.1.1 褪黑激素的抗氧化和清除自由基的功能 |
| 1.4.1.2 褪黑激素的调节免疫功能 |
| 1.4.1.3 褪黑激素的抗应激作用 |
| 1.4.1.4 褪黑激素对血管的作用 |
| 1.4.2 褪黑激素受体分布及功能 |
| 1.4.3 褪黑激素与PKC传导通道 |
| 2 早期限饲防治肉鸡PHS的研究进展 |
| 2.1 早期限饲对肉鸡PHS防治及生产性能影响的研究进展 |
| 2.1.1 早期限饲对肉鸡PHS的发病率和其他代谢性疾病发病率的影响 |
| 2.1.2 早期限饲对肉鸡生产性能和胴体品质的影响 |
| 2.2 限饲的方法和手段 |
| 2.3 限饲调控生长速度的机理 |
| 2.3.1 激素调节的作用 |
| 2.3.2 消化器官发育增强 |
| 2.4 限饲与免疫的关系 |
| 2.5 限饲降低肉鸡PHS发病率的机理 |
| 参考文献 |
| 第三章 哺乳动物肺动脉高压肺血管重构的病理机制和治疗的研究进展 |
| 1 肺循环和肺血管构型的特点 |
| 2 血管重构的概念 |
| 3 肺血管重构的病理特征 |
| 3.1 肺血管平滑肌细胞的变化 |
| 3.1.1 肺血管中膜平滑肌肥大与增殖 |
| 3.1.2 评价肺血管平滑肌增殖的手段——增殖细胞核抗原 |
| 3.1.3 肺细小动脉肌型化 |
| 3.1.4 肺小动脉内膜下出现纵行肌 |
| 3.2 肺小动脉内皮细胞(EC)的变化 |
| 3.3 肺血管结缔组织的变化 |
| 3.4 血管丛病变 |
| 3.5 肺血管密度 |
| 3.6 肺血管重构的其它病理变化 |
| 4 评定血管重构的方法和手段 |
| 5 肺血管重构的病理生理机制 |
| 5.1 异常血流动力学因素在肺血管重构中的作用 |
| 5.2 生长因子在肺血管重构中的作用 |
| 5.2.1 VEGF |
| 5.2.2 bFGF |
| 5.2.3 PDGF |
| 5.2.4 IGF-1 |
| 5.2.5 TGF-β |
| 5.3 血管活性物质与肺血管重构 |
| 5.3.1 内皮素-1(endothelin-1,ET-1) |
| 5.3.2 血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AT-Ⅱ) |
| 5.3.3 5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT) |
| 5.3.4 一氧化氮(NO) |
| 5.4 活性氧自由基(ROS)与肺血管重构 |
| 5.4.1 血管平滑肌细胞生长 |
| 5.4.2 血管平滑肌细胞移行 |
| 5.4.3 基质的调节 |
| 5.5 炎性介质与肺血管重构 |
| 5.6 低氧对肺血管重构的影响 |
| 5.7 血管内皮细胞在肺血管重构中的作用 |
| 5.8 原癌基因表达与肺血管重构 |
| 5.8.1 c-myc |
| 5.8.2 c-fos |
| 5.8.3 c-jun |
| 5.8.4 sis |
| 5.9 细胞凋亡与血管重构 |
| 5.10 血管重构的信号转导机制 |
| 6 抑制肺血管重构的药物治疗 |
| 6.1 血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素受体拮抗剂 |
| 6.2 内皮素拮抗剂和内皮素转换酶抑制剂 |
| 6.3 L-精氨酸/NO |
| 6.4 磷酸二酯酶抑制剂 |
| 6.5 Ca2+通道拮抗剂 |
| 6.6 肝素 |
| 6.7 前列环素 |
| 6.8 PKC拮抗剂和抑制剂 |
| 7 结语 |
| 参考文献 |
| 第四章 血小板源生长因子与血管重构 |
| 1 血小板源生长因子的生物学特性 |
| 2 血小板源生长因子受体的生物学特性 |
| 3 影响血小板源生长因子分泌及其受体表达的因素 |
| 3.1 缺氧 |
| 3.1.1 缺氧对血管内皮细胞PDGF分泌及其受体表达的影响 |
| 3.1.2 缺氧对血管平滑肌细胞PDGF分泌及其受体表达的影响 |
| 3.2 自由基对血小板源生长因子分泌及其受体表达的影响 |
| 3.3 作用于血管壁的机械压力对血小板源生长因子分泌及其受体表达的影响 |
| 4 血小板源生长因子在血管重构中的作用 |
| 4.1 PDGF的促细胞增殖作用 |
| 4.2 PDGF促细胞增殖作用的调控 |
| 参考文献 |
| 第五章 蛋白激酶C与低氧性肺动脉高压 |
| 1 PKC的类型、结构特点及激活过程 |
| 1.1 PKC的类型 |
| 1.2 PKC的结构特点 |
| 1.3 PKC的激活 |
| 2 PKC与低氧性肺血管收缩 |
| 2.1 PKC与离子通道介导的肺血管收缩 |
| 2.2 PKC与血管活性介质介导的血管收缩 |
| 3 PKC与低氧性肺血管重构 |
| 3.1 PKC对肺动脉平滑肌细胞增殖的调控 |
| 3.1.1 PKC与不同表型的肺动脉平滑肌细胞增殖 |
| 3.1.2 PKC调控肺动脉平滑肌增殖的机制 |
| 3.1.2.1 PKC在低氧性肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用 |
| 3.1.2.2 PKC在氧自由基促进肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用 |
| 3.1.2.3 PKC在切变力/机械张力引起平滑肌细胞增殖中的作用 |
| 3.1.2.4 PKC对肺动脉平滑肌细胞增殖的直接调节作用 |
| 3.1.2.5 PKC介导某些生长因子刺激肺动脉平滑肌增殖 |
| 3.2 PKC与凋亡在平滑肌细胞增殖中的作用 |
| 3.3 PKC对肺动脉成纤维细胞增殖和胶原表达的调控 |
| 3.3.1 PKC与成纤维细胞增殖 |
| 3.3.2 PKC对胶原表达的调控 |
| 4 结语 |
| 参考文献 |
| 第六章 氧自由基代谢与肉鸡PHS |
| 1 氧自由基、抗氧化剂和脂质过氧化作用 |
| 1.1 氧自由基 |
| 1.2 脂质过氧化作用 |
| 1.3 抗氧化剂 |
| 1.3.1 酶系抗氧化剂 |
| 1.3.1.1 超氧化物歧化酶 |
| 1.3.1.2 过氧化氢酶 |
| 1.3.1.3 谷胱甘肽过氧化物酶 |
| 1.3.2 非酶系抗氧化剂 |
| 2 促使脂质过氧化反应和诱导机体氧自由基产生的因素 |
| 2.1 缺氧 |
| 2.2 炎性细胞激活 |
| 2.3 甲状腺机能亢进 |
| 2.4 血管来源的氧自由基 |
| 3 氧自由基对肺血管的损伤作用 |
| 3.1 氧自由基对血管内皮细胞的作用 |
| 3.1.1 诱发血管内皮细胞释放血管活性物质和生长因子 |
| 3.1.2 诱导内皮细胞凋亡 |
| 3.1.3 诱发内皮细胞黏附分子表达 |
| 3.1.4 促进血管生成 |
| 3.2 氧自由基对血管平滑肌细胞的作用 |
| 3.2.1 氧自由基在动脉平滑肌细胞增殖和凋亡中的作用 |
| 3.2.2 氧自由基与血管收缩 |
| 3.2.3 氧自由基与平滑肌细胞的信号传导 |
| 3.3 氧自由基对细胞外基质的影响 |
| 4 氧自由基与肉鸡PHS |
| 参考文献 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第七章 间歇光照对肉鸡肺动脉高压综合征发病率及肺血管重构的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 测定指标 |
| 1.3 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 间歇光照对肉鸡PHS发病率和心脏指数(RV/TV)的影响 |
| 2.2 间歇光照对血液红细胞压积(PCV)的影响 |
| 2.3 间歇光照对肉鸡体重和饲料利用效率的影响 |
| 2.4 间歇光照对肺血管管壁面积与血管总面积比(WA/TA)以及平均中膜厚度(mMTPA)的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 间歇光照对肉鸡PHS发病率的影响 |
| 3.2 间歇光照对肉鸡肺血管形态学的影响 |
| 3.3 间歇光照对肉鸡体重和饲料利用效率的影响 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第八章 间歇光照对肉鸡体内脂质过氧化作用和抗氧化酶活性的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 测定指标 |
| 1.3 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 PHS发病率、RV/TV和体重的结果 |
| 2.2 血浆丙二醛和SOD值 |
| 2.3 肺厚壁末稍血管百分率(%TWPV) |
| 2.4 肉鸡SOD、MDA、TWPV之间及与RV/TV的相关性 |
| 3 讨论 |
| 3.1 间歇光照对肉鸡PHS发病率和体重的影响 |
| 3.2 间歇光照对肉鸡体内脂质过氧化作用和抗氧化酶活性的影响 |
| 3.3 间歇光照与肺小动脉肌型化 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第九章 间歇光照对低温诱导的肉鸡肺细小动脉血管重构及其PKCα表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 测定指标 |
| 1.3 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 WA/TA、mMTPA、MDA、SOD和RV/TV的结果 |
| 2.2 PKCα表达的变化 |
| 2.3 PKCα表达与mMTPA和WA/TA之间的相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第十章 间歇光照对低温诱导的肉鸡肺细小动脉血管重构及其PDGF-β受体表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 测定指标 |
| 1.3 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 MDA、SOD、PCV、WA/TA和mMTPA等结果 |
| 2.2 间歇光照对肉鸡肺动脉壁PDGF-β受体表达的影响 |
| 2.3 PDGF-β受体表达与mMTPA和WA/TA之间的相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 缓解缺氧 |
| 3.2 降低氧自由基水平 |
| 参考文献 |
| 第十一章 间歇光照对低温诱导的肉鸡肺细小动脉血管重构及其PCNA表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 测定指标 |
| 1.3 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 MDA、SOD、PCV、WA/TA和mMTPA等结果 |
| 2.2 直径50-200μm肺小动脉PCNA表达的变化 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第十二章 添加呋喃苯胺酸对低温诱导的肉鸡肺动脉高压综合征的发病率及肺血管重构的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 测定指标 |
| 1.3 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 呋喃苯胺酸对肉鸡PHS发病率的影响 |
| 2.2 呋喃苯胺酸对肉鸡体重的影响 |
| 2.3 呋喃苯胺酸对肉鸡RV/TV值的影响 |
| 2.4 呋喃苯胺酸对肉鸡血液红细胞压积(PCV)的影响 |
| 2.5 呋喃苯胺酸对肉鸡肺血管管壁面积与血管总面积比(WA/TA)以及平均中膜厚度(mMTPA)的影响 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第十三章 维生素C对肉鸡肺动脉高压综合征发病率及肺血管重构的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 测定指标 |
| 1.3 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组肉鸡PHS死亡率的比较 |
| 2.2 各组肉鸡体重的比较 |
| 2.3 各组肉鸡RV/TV值的比较 |
| 2.4 各组肉鸡血液红细胞压积(PCV)的比较 |
| 2.5 各组肉鸡肺血管管壁面积与血管总面积比(WA/TA)以及平均中膜厚度(mMTPA)的比较 |
| 2.6 各组肉鸡血浆丙二醛和SOD值的比较 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第十四章 Calphostin C对PDGF-BB诱导的肉鸡肺动脉血管平滑肌细胞增殖的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要设备 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 肺动脉平滑肌细胞的培养及分组 |
| 1.4 测定指标 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 细胞计数 |
| 2.2 细胞周期 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第十五章 X/XO体系作用的肺动脉内皮细胞条件培养液对肉鸡肺动脉平滑肌细胞的促增殖作用及褪黑激素对其的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要设备 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 肉鸡正常内皮细胞培养液和X/XO条件培养液的采集及细胞形态观察 |
| 1.4 实验分组 |
| 1.5 检测指标 |
| 1.6 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 氧自由基对肉鸡肺血管内皮细胞损伤的形态学观察 |
| 2.2 各组细胞培养液中MDA含量 |
| 2.3 褪黑激素对X/XO条件培养液诱导的PASMC细胞周期时相分布的影响 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 本文创新点 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表和完成的学术论文 |
（8）瘦素促进伤口愈合作用的机制研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 第一部分 创伤后的不同时期给予瘦素对伤口愈合的效应研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 瘦素对伤口愈合的时效影响 |
| 2.2 瘦素对伤口愈合的量效影响 |
| 2.3 早期治疗组7天时伤口愈合的组织形态观察 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 瘦素对大鼠伤口组织胶原及伤口愈合相关因子合成的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 瘦素对血清和伤口组织NO含量的影响 |
| 2.2 瘦素对伤口组织总蛋白和胶原蛋白含量的影响 |
| 2.3 瘦素对伤口组织FGF含量的影响 |
| 2.4 瘦素对伤口组织Ⅰ型胶原水平的影响 |
| 2.5 瘦素对伤口组织iNOS水平的影响 |
| 2.6 瘦素对伤口组织TGF-β1水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 瘦素对大鼠伤口组织胶原及伤口愈合相关因子mRNA水平的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 提取的伤口组织RNA质量 |
| 2.2 伤口组织Ⅰ型胶原mRNA水平的变化 |
| 2.3 伤口组织Ⅲ型胶原mRNA水平的变化 |
| 2.4 伤口组织iNOS mRNA水平的变化 |
| 2.5 伤口组织EGF mRNA水平的变化 |
| 2.6 伤口组织TGF mRNA水平的变化 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四部分 瘦素对体外培养成纤维细胞的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 瘦素对成纤维细胞生长增殖的影响 |
| 2.2 瘦素对成纤维细胞胶原合成的影响 |
| 2.3 瘦素对成纤维细胞NO生成的影响 |
| 2.4 瘦素对成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA水平的影响 |
| 2.5 瘦素对成纤维细胞Ⅲ型胶原mRNA水平的影响 |
| 2.6 瘦素对成纤维细胞iNOS mRNA水平的影响 |
| 2.7 瘦素对成纤维细胞EGF mRNA水平的影响 |
| 2.8 瘦素对成纤维细胞bFGF mRNA水平的影响 |
| 2.9 瘦素对成纤维细胞IGF-Ⅰ mRNA水平的影响 |
| 2.10 瘦素对成纤维细胞PDGF mRNA水平的影响 |
| 2.11 瘦素对成纤维细胞TGF-β1 mRNA水平的影响 |
| 2.12 瘦素对成纤维细胞VEGF mRNA水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录一 综述：瘦素与创伤愈合 |
| 附录二 论文：瘦素对体外大鼠成纤维细胞增殖与胶原合成的影响 |
（9）增生性瘢痕放射治疗的基础研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 不同方案加速器照射对伤后瘢痕愈合的影响及其规律研究 |
| 一、 材料和方法 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 实验方法 |
| 二、 实验结果 |
| (一) 加速器照射对大鼠伤口瘢痕愈合影响的基本病理改变 |
| 1 、 一般情况及伤口局部情况 |
| 2 、 HE染色 |
| 3 、 天狼星红染色 |
| (二) 不同方案加速器照射对大鼠伤口瘢痕愈合的影响研究 |
| 三、 讨论 |
| (一) 创伤瘢痕愈合的基本过程 |
| (二) 加速器照射对于瘢痕愈合影响的机理 |
| (三) 不同方案照射对瘢痕愈合影响的特点及机理 |
| 四、 结论 |
| 第二部分 不同方案照射后瘢痕愈合过程中TGF-β1及其受体与PDGF及其受体的表达研究 |
| 一、 材料和方法 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 实验方法 |
| 二、 实验结果 |
| (一) 不同方案照射后皮肤组织中TGF-β1及TGFβ1R的表达的变化 |
| (二) 不同方案照射后皮肤组织中PDGF及其受体的表达的变化 |
| 三、 讨论 |
| (一) TGF-β1及TGFβ1R的生物学特性 |
| (二) PDGF及其受体的生物学特性 |
| (三) 不同方案照射对TGF-β1及其受体与PDGF的表达影响及可能机理 |
| 四、 结论 |
| 第三部分 照射对成纤维细胞与血管内皮细胞TGF-β1、PDGF、FGF及受体表达影响的研究 |
| 一、 材料和方法 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 实验方法 |
| 二、 实验结果 |
| (一) 不同剂量照射后人胚肺成纤维细胞中TGF-β1、PDGF、FGF及受体的表达 |
| (二) 不同剂量照射后脐静脉血管内皮细胞中TGF-β1、PDGF、FGF及受体的表达 |
| 三、 讨论 |
| 四、 结论 |
| 全文结论: |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 文献综述 |
| 个人情况 |
| 致谢 |
（10）P物质对大鼠成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 1.材料: |
| 2.成纤维细胞培养及SP刺激实验: |
| 3.总RNA制备及RT-PCR: |
| 4.PCR产物鉴定及分析: |
| 5.数据分析: |
| 结果 |
| 1.SP对成纤维细胞bFGF/FGFR-1 |
| 2.SP对成纤维细胞bFGF和FGFR-1 |
| 讨论 |
四、P物质对大鼠成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响（论文参考文献）
- [1]调肾通络方防治重度宫腔粘连术后再粘连的临床疗效及其调控TGF-β1/Smads信号通路的作用机制研究[D]. 牛红萍. 南京中医药大学, 2021(01)
- [2]三法三穴对SNI大鼠施万细胞增殖和神经瘢痕形成的影响[D]. 邵帅. 北京中医药大学, 2020(04)
- [3]碱性成纤维细胞生长因子转染骨髓间充质干细胞移植治疗慢性阻塞性肺疾病的作用及机制[J]. 吴华拉,周湘乡,钟玉兰,淦鑫. 中国组织工程研究, 2019(21)
- [4]体外摩擦力刺激对筋膜成纤维细胞蛋白表达响应特征的研究及推拿摩法“消肿止痛”细胞生物力学机制探讨[D]. 罗明鸿. 贵阳中医学院, 2017(02)
- [5]一效膏促进慢性皮肤溃疡创面修复的研究[D]. 柴政. 辽宁中医药大学, 2016(01)
- [6]成纤维细胞生长因子修饰骨髓间充质干细胞可促进颅脑损伤后功能的恢复[J]. 李学东,陈家康,覃军,麦用军,肖振勇. 中国组织工程研究, 2015(45)
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