一、盐酸克伦特罗在猪体内残留状况的调查分析（论文文献综述）
孙铭雪[1]（2021）在《表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇》文中指出克伦特罗（Clenbuterol,CLB）和沙丁胺醇（Salbutamol,SAL）属于β2-肾上腺受体激动剂,通常被称作“营养重分配剂”或是“瘦肉精”,因其具有营养再分配、改变动物体内物质的代谢途径,加速蛋白质的合成,显着提高食品动物的生长速度等生理作用,经常被非法用作饲料添加剂用于畜产品养殖业中来谋取利益。当动物体内残留的β2-受体激动剂通过食物链进入人体后,会对食用者产生一定的毒副作用,导致中毒现象。目前,我国和欧盟等许多国家已颁布了多部法律法规明确规定不允许将β2-受体激动剂作为动物饲料添加剂。因此,为加强食品安全监管,保障广大消费者的生命安全和利益,急需在现有的方法上建立更加快速、可靠的β2-受体激动剂检测方法。现有的确证检测方法有色谱法、常规酶联免疫法等,但其因前处理麻烦、操作复杂、检测时间较长等原因,无法实现实际样品的高通量检测。如今,由于具有灵敏度高、干扰小、检测速度快等优点,表面等离子体传感器在β2-受体激动剂的检测中具有重要的应用前景。本研究以克伦特罗和沙丁胺醇为检测目标物,首先制备了CLB和SAL单克隆抗体。将CLB-BSA和SAL-OVA作为实验中所需要使用的免疫原,取6-8周龄的雌性BALB/c小鼠,用选取的免疫原首先对小鼠进行免疫。对免疫后的小鼠进行血清效价检测,检测结果最好的小鼠说明其免疫效果最好,选取免疫效果最好的小鼠,脱颈处死后取其脾细胞,将脾细胞和复苏后的骨髓瘤细胞融合在一起,经间接ELISA法挑选出阳性细胞,再对连续三次检测呈阳性的细胞进行亚克隆,得到高效价、具有特异性且能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用诱生腹水法进行腹水制备,将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内产生腹水的方法收集抗体。对单抗的性质进行鉴定,得到CLB单克隆抗体腹水效价为1:4.50×106,SAL单克隆抗体效价为1:3.40×105;使用间接竞争ELISA法对两种单克隆抗体的特异性鉴定结果显示,CLB单抗对克伦特罗的IC50为2 ng/m L,对莱克多巴胺和沙丁胺醇等药物的IC50均大于10000,交叉反应率小于0.2%,SAL单抗对沙丁胺醇的IC50为2.5 ng/m L,在对其他几种药物的检测中发现,此抗体对克伦特罗的IC50为11.3 ng/m L,计算得二者的交叉反应率为22%,而对其他药物的交叉反应率仍小于0.2%。本研究建立了直接检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇的SPR免疫传感器法。以氨基偶联法修饰CM7芯片,将抗体固定在芯片上,优化抗体偶联条件,以10 m M p H 5.0醋酸-醋酸钠缓冲液为耦合缓冲剂,EDC和NHS以1:1的比例混合活化芯片,活化时间为15 min,抗体反应时间为20 min,用乙醇胺溶液封闭芯片,封闭时间为15 min。采用直接检测法,将牛尿离心、过膜处理后,流过固定了抗体的CM7芯片来构建标准曲线,进行检测。经方法学验证,克伦特罗的标准曲线的线性范围在0.1～6 ng/m L之间,得到的最低检测限（LOD）为0.05 ng/m L。在1 ng/m L～5 ng/m L添加浓度范围内,牛尿中克伦特罗的平均回收率为82.46%～98.60%,批内变异系数为1.67%～8.50%,批间变异系数为2.61%～10.14%。以相同的方法对沙丁胺醇进行测定,在0.1～6 ng/m L浓度范围内呈现良好的线性关系,LOD为0.01 ng/m L,在1 ng/m L～5 ng/m L添加浓度范围内,牛尿中沙丁胺醇的平均回收率为87.82%～91.67%,批内变异系数为1.51%～2.67%,批间变异系数为2.67%～5.53%。采用UPLC-MS/MS法和SPR生物传感器法对牛尿样品中CLB和SAL的含量进行对比,结果表明SPR方法可用于动物中克伦特罗和沙丁胺醇的检测。
郭平[2]（2017）在《供港生猪禁限用兽药残留高通量检测方法的建立和应用》文中研究说明江西供港生猪数量居全国第二,每年输港生猪近40万头,香港市场上约1/3的猪肉来自江西。保障生猪顺利输港不仅是维护香港繁荣稳定的需要,也是维护江西广大养殖户根本利益的需要。至本研究结束为止,香港《食物内有害物质（修订）规例》规定了猪组织中兽药残留限量103余条,涉及兽药种类19类。为使江西供港生猪不仅能够符合限量要求,且能够科学提高检测时效,缩短放行时间,降低养殖户宰杀和时间成本,针对检测工作遇到的技术难题进行了研究并取得成果。建立了猪尿中8类37种禁限用兽药残留高通量液相色谱串联质谱检测方法。试样经酶解后固相萃取净化后测定,基质匹配外标结合同位素内标定量。方法对磺胺类兽药（14种）的检出限和定量限分别为3.0μg/kg和10.0 μg/kg,准确度范围为60.1%～109.0%,精密度范围为2.33%～15.73%;对喹诺酮类兽药（10种）的检出限和定量限分别为3.0μg/kg和10.0 μg/kg,准确度范围为75.4%～109.0%,精密度范围为2.37%～11.81%;对四环素类兽药（4种）的检出限和定量限分别为3.0μg/kg和10.0μg/kg,准确度范围为60.0%～106.6%,精密度范围为3.94%～11.85%;对林可胺类兽药（1种）的检出限和定量限分别为0.3μg/kg和1.0 μg/kg,准确度范围为88.1%～108.0%,精密度范围为5.87%～7.53%;对大环内酯类兽药（1种）的检出限和定量限分别为0.3μg/kg和1.0μg/kg,准确度范围为76.7%～109.0%,精密度范围为7.39%～12.7%;对氯霉素类兽药（3种）的检出限和定量限范围分别为0.03μg/kg～0.3μg/kg和O.1μg/kg～1.0μg/kg,准确度范围为62.6%～109.3%,精密度范围为5.24%～18.15%;对β-受体激动剂（3种）的检出限和定量限分别为0.3μg/kg和1.0 μg/kg,准确度范围为为82.7%～109.2%,精密度范围为1.71%～10.25%;对黏菌素的检出限和定量限分别为3.0μg/kg和10.0 μg/kg,准确度范围为81.1%～108.9%,精密度范围为1.69%～9.20%。方法可满足供港生猪监管要求,检测效率较传统方法提高5倍,成本降低70%。建立了猪肝和猪尿中23种β-受体激动剂残留高通量液相色谱串联质谱检测方法。试样经酶解后固相萃取净化后测定基质外标结合同位素内标定量。方法对猪尿中23种β-受体激动剂的检出限和定量限分别为0.03μg/kg～0.3μg/kg和0.1μg/kg～1μg/kg,准确度范围为63.4%～120.0%,精密度范围为1.8%～20.4%,猪肝中23种β-受体激动剂的检出限和定量限分别为0.03μg/kg～0.3μg/kg和0.1μg/kg～1μg/kg,准确度范围为62.0%～119.9%,精密度范围为1.8%～15.4%,方法可检测绝大多数β-受体激动剂,可满足供港生猪监管要求。方法于2015年底参加能力验证获满意结果。建立了猪肝中5种氨基糖苷类兽药多残留液相色谱串联质谱检测方法。试样经酸性溶液提取后固相分散萃取结合固相萃取净化,基质外标法定量。方法对5种氨基糖苷类兽药的检出限和定量限范围分别为 2.0μg/kg～30.0μg/kg 和 5.0μg/kg～100.0μg/kg,准确度范围为 71.6%～107.5%,精密度范围为4.3%～11.3%,方法可满足供港生猪监管要求,解决了传统方法引入离子对试剂影响液质联用仪负模式灵敏度的困难。对1年间江西省26家猪场的生猪中禁限用兽药残留水平开展了调查,涉及样品共314个,其中猪肝样24个,猪尿样290个;收集兽药残留数据17202项次,其中猪肝672项次,猪尿16530项次。发现江西供港生猪的禁用药物的使用已经得到了良好控制;金霉素、土霉素、四环素、强力霉素、林可霉素、环丙沙星、磺胺嘧啶、氟甲喹、三甲氧苄胺嘧啶、磺胺氯哒嗪和磺胺二甲基嘧啶等限用药物的使用普遍存在;部分猪场的兽药种类和量持续高于平均水平;外购饲料等投入品的检查措施还不够完善。所建立方法还在两次应急检测事件中发挥了技术支撑作用。综上所述,本研究建立了多种检测方法,与适用标准方法共同构成了江西供港猪组织中兽药残留检测技术体系,解决了实际工作中遇到的困难,应用于大量样品的检测,取得成果满足预期要求。
张倩,颜显辉,管恩平,唐正浩[3]（2016）在《克伦特罗在猪尿液中的消除规律研究》文中指出[目的 ]研究克伦特罗在猪尿液中的消除规律。[方法 ]用含有克伦特罗1.5 mg/kg的饲料,饲喂一组体重约50 kg的90日龄育肥猪,正常饲喂35天后停药,收集停药后前32天的猪尿液,采用高效液相色谱法（HPLC）进行克伦特罗含量分析。[结果 ]停药后的前4天,猪尿液中的克伦特罗浓度迅速下降,第4天降至13.23μg/kg,之后消除速度放慢,第32天为0.44μg/kg,仍然高于最低检测限0.05μg/kg。[结论 ]克伦特罗在猪体内消除缓慢,容易蓄积。
罗海峰[4]（2016）在《新型快速诊断方法对牛疫病和饲料安全应用的研究》文中认为现代畜牧业的发展面临许多挑战,其核心内容便是畜牧业的安全体系的建立,包括生物安全体系、畜产品质量安全体系以及环境安全体系。在生物安全体系中疫病的防控是其核心,而满足疫病防控所需求的检测试剂是多方面工作的基础条件,可以帮助了解疫病流行情况、监控疫病爆发趋势、评估免疫质量,甚至为疫病净化提供决策性信息。而对于畜产品质量安全体系而言,确保饲料安全,控制兽药滥用是保证食品安全的源头,因此对满足畜产品生产各个环节的检测试剂开展研究具有重大意义。同时疫病防控与畜产品质量安全体系完善后自然也促进了环境安全体系的完善。牛支原体感染是目前包括中国在内的世界各国广泛流行的一种病原微生物性疾病,其感染牛群后会造成一系列严重后果,导致牛的乳房炎、关节炎、肺炎、结膜炎以及母牛流产等,最终影响畜牧业的生产效率。牛病毒性腹泻病毒（BVDV）是牲畜中一种重要的病原体,其属于瘟病毒属黄病毒科目,BVDV感染会造成动物免疫系统抑制,从而导致牲畜易于受到其他病原体的侵害,并且由于持续感染牛的存在,BVDV会持续影响牛的生长或者产奶,给畜牧业造成重大损失。克伦特罗俗称“瘦肉精”,是畜牧业中的违禁药物,其可以促进动物肌肉的生长,但是同时经过畜产品会传递给人类,造成急性中毒或者慢性中毒。黄曲霉毒素B1是目前最致癌的物质,污染的饲料中的黄曲霉会产生该毒素,经由动物吸收后会最终影响人类健康。本研究关注诊断学在畜牧业安全体系中的应用,因此选择了病原体抗体检测、抗原检测、非法药物及饲料毒素残留四个方面,运用侧向层析技术、胶体金技术以及上转换发光技术进行系列快速检测试剂的开发。其中上转换发光技术运用稀土元素的上转换发光性质,开发成相应的上转换纳米材料,运用于免疫检测中,用于开发快速定量检测试剂,为创新性检测方法。最终本研究建立了上转换发光法检测技术平台和胶体金检测技术平台,开发了牛支原体抗体快速检测试剂（P48-CG）、BVDV快速检测试剂（BVDV-CG）以及克伦特罗上转发光快速检测试剂（CL-UPT）和黄曲霉毒素B1快速检测试剂（AFB1-UPT）。其中P48-CG与ELISA检测试剂相符率达到93%以上,灵敏度与ELISA试剂一致,可以有效检测牛支原体抗体。BVDV-CG检测619份血清血浆样本,灵敏度特异性分别为98.4%和99.4%;检测858份全血样本,灵敏度特异性分别为96.5%和99.1%;检测440份耳组织样本,灵敏度特异性均达到100%。CL-UPT检测灵敏度达到0.05ppb,与LC-MS/MS相比定量结果偏差在15%以内。AFB1-UPT检测灵敏度达到0.39ppb,与HPLC相比定量结果偏差在15%以内。针对动物疫病和饲料安全的系列检测试剂的开发将有助于完善畜牧业安全体系。
陈秋玲,聂婉,伍晓红,周柳,王琤韡[5]（2016）在《浅谈动物源性食品中盐酸克伦特罗的残留及危害》文中指出简要介绍了盐酸克伦特罗的理化性质、作用机理及残留特性,阐述了动物源性食品中盐酸克伦特罗残留物对动物及人体的危害。
韩俊成[6]（2016）在《喹乙醇在猪、鸡和鱼体内的残留消除研究》文中指出喹乙醇（Olaquindox）是喹恶啉类抗菌促生长型饲料添加剂,因其效果好,价格低,曾被广泛用于养殖业生产中,但喹乙醇存在大量使用和滥用现象,导致其在体内的残留超标,因其具有致癌性,导致食品安全问题。欧美和日本对其禁用,我国规定小于35kg的仔猪可用,禁用于鱼和禽类,休药期35天,残留标示物为3-甲基喹恶啉-2-羧酸（MQCA）,残留靶组织为肝脏。但以前所有研究并没有提供系统的喹乙醇在食品动物残留消除数据和残留标准制定的依据,因此有必要对喹乙醇的残留消除进行系统的研究。根据本实验室喹乙醇在猪,鸡、鱼和大鼠体内的放射性示踪研究结果,按VICH指南及FDA规定,确定喹乙醇的主要代谢产物为O1（N1脱一氧喹乙醇）、02（脱二氧喹乙醇）、04（N1脱氧喹乙酸）、05（脱二氧喹乙酸）、07（N4-脱一氧喹乙醇）、加上喹乙醇原形O0和原残留标示物06（3-甲基-喹恶啉—2-羧酸,MQCA）作为多残留检测对象,进行猪、鸡和鱼体内的残留消除试验,确证喹乙醇残留标示物和残留靶组织,目前国际上公认的商品组织为肝、肾、肌肉、脂肪、但结合我国居民的生活习俗也把非商品组织心、肺、胃、大肠和小肠纳入到研究范围。本课题首先合成喹乙醇6种主要代谢产物:然后以猪、鸡和鱼为研究对象,建立了喹乙醇原形和6种主要代谢产物在各商品和非商品组织中的多残留高效液相检测方法:最后,以此为基础进行喹乙醇及其代谢产物在猪、鸡和鱼体内残留消除规律的研究,并进一步对喹乙醇进行食品安全评价。通过本课题确定了喹乙醇在猪和鸡的残留靶组织为肾脏,鱼的残留靶组织为肝脏,残留标示物均为脱二氧喹乙醇,并分别按照JECFA，FDA和EMEA程序分别制定残留限量和休药期标准,为其兽药残留监控提供了科学依据,为其残留标准修订提供理论和技术支撑。1喹乙醇主要代谢物对照品的制备以喹乙醇为原料,N2S2O4为还原剂,连二亚硫酸钠以溶液的形式缓慢滴加,控制还原剂与喹乙醇之间的摩尔比为1:1,反应温度控制在50℃左右,得到两种脱一氧喹乙醇的混合物,将粗产物经硅胶层析柱层析纯化后,再用乙酸乙酯重结晶3次,其纯度达到97%。以喹乙醇为原料,N2S2O4为还原剂,连二亚硫酸钠以溶液的形式滴加,控制喹乙醇与还原剂之间的摩尔比为1:4,反应温度控制在60℃左右,反应约5小时,制得脱二氧喹乙醇,经乙酸乙酯重结晶3次后,其纯度不低于99%。以苯并呋咱（BFO）和乙酰乙酸乙酯为原料,三乙胺为催化剂,N，N-二甲基甲酰胺为溶剂,控制二者摩尔比为1:1.5,40℃反应24小时,得到中间产物3-甲基喹恶啉-2-甲酸乙酯,并以此为原料,N2S204作为还原剂进行脱氧反应,控制摩尔比为1:1,生成N1脱一氧3-甲基喹恶啉-2-甲酸乙酯,加入过量的N2S204后,则生成了脱二氧3-甲基喹恶啉-2-甲酸乙酯,然后用NaOH水解酯键得到MQCA和N1脱氧MQCA,其中MQCA经过乙酸乙酯重结晶2次后,其纯度不低于99%,然后依此为基础与甘氨酸乙酯缩合,再进一步用碱解即可得到脱一氧喹乙酸和脱二氧喹乙酸,再用乙酸乙酯重结晶2次后,其纯度不低于97%。2喹乙醇及其主要代谢物多残留检测的高效液相方法的建立根据本实验室前期放射性示踪研究结果,确定01、02、04、05和07为喹乙醇的主要代谢产物,加上原形和原残留标示物MQCA共7种化合物,建立了喹乙醇及其六种代谢产物在猪和鸡的肝脏、肾脏、肌肉、脂肪、心、肺、胃、大肠和小肠以及鱼的肝脏、肾脏、肌肉、脂肪、皮肤和胃肠道等商品和非商品组织中的残留检测高效液相（HPLC）方法。具体为色谱柱:Aglient ZORBAX SB-C18（4.6×250mm,5μm）;流动相:A相:0.6%甲酸水,B相:乙腈;（洗脱条件为:0-5min,乙腈10%,甲酸水90%;5-25 min,乙腈30%,甲酸水70%;25.01min,乙腈10%,甲酸水90%;32min,乙腈10%,甲酸水90%）紫外检测波长320nm;进样量40μL;柱温30℃。组织样品用0.1mol/L的盐酸50%甲醇40%乙酸乙酯复合试剂提取、经正已烷去脂及HLB固相萃取小柱净化,最后用体积比为10:90的乙腈:0.6%甲酸水混合试剂复溶,HPLC检测。方法学考核表明,该方法01和02在猪和鸡的肝、肾、肌肉、脂肪、心、肺、胃、大肠和小肠及鱼的肌肉、皮肤和胃肠的定量限（LOQ）为20μg/kg,04、05、06和07在猪、鸡和鱼各组织中的LOQ为40μg/kg,00在猪、鸡和鱼各组织的LOQ为50μg/kg。添加不同定量限浓度的药物,回收率在均在63.1%-86.5%,且日间变异系数（CV）均小于12.6%。本实验建立的残留检测方法满足定量分析要求,能用于喹乙醇及其代谢产物的残留残留消除检测分析。3喹乙醇在猪、鸡和鱼体内的残留消除研究健康大三元商品猪25头,随机分为5组,连续饲喂添加100 mg/kg喹乙醇的饲料30d,20日龄科宝肉鸡30羽和健康鱼30尾,随机分成5组,连续饲喂添加50mg/kg喹乙醇的饲料30d,停药后于不同时间点宰杀一组动物,取动物的商品和非商品组织。按上述方法对组织中药物含量进行检测,结果如下:猪:停药6h,各组织均检出到原形00、01、02及MQCA,药物浓度范围分别为 108.4-212.4μg/kg,36.6-219.1μg/kg,73.7-934.0μg/kg 和 47.6-402.8μg/kg;02 在肾脏浓度最高,原形和01在猪体内消除较快。休药3d后,各组织中00和01均消除至定量限以下,肝脏和肾脏中能检测到MQCA,浓度为35.μg/kg和101.Oμg/kg,肝脏，肾脏和肺脏中检测出02,浓度分别为86.5μg/kg,293.6μg/kg和61.1μg/kg,其他组织中各药物均降到LOQ以下;休药7d后仅肾中检出02,浓度是111.0μg/kg,休药14d各组织中的药物均不能检出。由此,可以发现喹乙醇及其代谢产物在肝脏,肾脏,肌肉和肺中的残留时间均超过三个时间点,残留时间最长的化合物为02和06,残留时间最长的组织为肾脏。鸡:停药6h,和猪相比,鸡所有组织中不能检测出07,而鸡所有组织中均能检测到 00、01 和 02,浓度范围分别是 51.8-298.9μg/kg,38.2-178.1μg/kg,23.4-164.6μg/kg,且肝脏最高;休药3 d后,肝脏和肾脏中能检出02,浓度分别为57.8和57.7μg/kg;在肺中检测出01和02,浓度分别为22.0和38.5μg/kg。停药5d,在肾中检测出02,浓度为40.5μg/kg,肝脏中02的药物浓度43.6μg/kg;停药10d,各组织中检测不到任何代谢产物,可以发现喹乙醇及其代谢产物在肝脏,肾脏和肺中的残留时间均超过三个时间点,残留时间最长的化合物为01,02和06。鱼:停药6 h,和猪、鸡相比,能检测到的化合物种类明显较少,组织肝脏、肾脏、肌肉、皮肤和胃肠仅能检测到原形、02和06,而脂肪中仅能检测到00和02;停药1d,仅肝和肾中能检出02和06,浓度范围分别为39.8-62.4μg/kg,38.4-39.9μg/kg肝脏居多:胃肠中检测到02,浓度为46.2μg/kg;停药3d,所有组织中的原形和06均消除至LOQ以下;仅肝脏中有少量的02,浓度为36.3μg/kg。停药7d各组织中检测不到任何代谢产物,综上所述,可以发现喹乙醇及其代谢产物仅在鱼肝脏超过三个时间点,残留时间最长的化合物为02。4猪、鸡和鱼可食性组织中的喹乙醇最高残留限量和休药期制订本课题按照JECFA推荐的制定兽药最高残留限量（MRLs）的程序和方法,对喹乙醇在猪、鸡和鲤可食性组织中的MRLs进行核算。同时参考美国FDA和欧盟关于兽药MRLs的制定程序和方法,分别提出了三种喹乙醇的最高残留限量标准,在此基础上提出了符合我国国情的喹乙醇在猪、鸡和鲤可食性组织中MRLs。按照JECFA的程序,猪休药期为7天,鸡的休药期为10天,鱼休药期为4天;按照FDA程序喹乙醇在猪、鸡和鲤的休药期为3天;按照EMEA程序,喹乙醇在猪的休药期为14天,鸡的休药期为15天,鲤的休药期为8天。综合分析各程序的结果,按照保守的原则推荐喹乙醇在猪、鸡和鲤可食性组织中的最高残留限量为10μg/kg,在猪的休药期为14天,鸡的休药期为15天,鲤的休药期为8天。综上,本研究首次制备出喹乙醇主要代谢物的对照品,并建立喹乙醇及其6种主要代谢产物在猪、鸡和鱼商品和非商品组织中的多残留HPLC检测方法,同时,首次对喹乙醇在猪、鸡体内的残留消除规律进行系统的研究,确定了残留标示物和残留靶组织,并进一步初步提出了喹乙醇在食品动物的最高残留限量和休药期标准。研究结果为喹乙醇的药理、毒理作用,药物安全性评价和风险评估提供了基础资料,为喹乙醇的食品安全监控和不同动物的喹乙醇的代谢残留消除比较提供了科学依据,为临床安全合理用药和建立健康的养殖环境提供了理论支持。
朱晓文[7]（2014）在《生猪饲养对其制品食用安全性溯源分析的研究》文中研究指明动物性食品是人类摄取蛋白质、脂肪等营养物质的主要来源之一。随着科学技术水平的不断发展,动物源食品日趋多元化,同时由于全球经济和消费水平的提高,动物源食品的需求量也日益增长,而我国目前主要以猪肉制品的需求量最大。然而由于近些年动物性食品的安全事件频发,使我们对动物源食品的食用安全越来越重视起来,因此加强了对动物源食品安全的溯源性分析以便可以追踪动物源食品安全的源头,因此,本文以黑龙江巴彦地区的养猪场作为调查对象,对猪只饲养各个环节中影响猪肉制品食用安全所涉及的各项指标进行检测,进行对猪肉制品安全进行溯源性分析,主要结论如下：1.通过大量文献和数据的参考,总结出猪只饲养对猪肉制品安全的关键因素,包括：1)猪只饲养条件较差,药物、抗生素和激素对周边环境的污染,影响猪只健康,给猪肉制品安全带来隐患。2)饲料安全对猪肉制品食用安全产生影响,包括饲料中有毒物质,重金属,致病微生物,违禁添加剂等物质,都是导致猪肉制品安全的主要原因。3)兽药的使用与体内残留会对猪肉制品食用安全造成影响。2.通过对黑龙江巴彦地区的三家养猪场使用的饲料和生产猪肉进行抽样调查,调查结果表明：在三家猪场使用的饲料中和饲养猪只的体内,有毒物质含量、重金属和非金属含量、微生物含量、农药含量、盐酸克伦特罗含量和药物含量等各项指标均符合国家安全卫生标准。
段倩倩[8]（2014）在《抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备》文中研究说明盐酸克伦特罗（Clenbuterol，CL）通常被我们称为“瘦肉精”或者是“营养重分配剂”，它是一种选择性β-肾上腺受体激动素，可以明显的提高动物的生长速度，减少动物机体内脂肪的合成，经常会被不法商贩用作饲料添加剂来谋取经济利益。盐酸克伦特罗进入机体后很容易被吸收，并且在体内的半衰期比较长，容易在动物体内蓄积残留，人食用了残留有盐酸克伦特罗的肉类产品之后，会导致不同程度的中毒现象，所以该药物被禁止使用于在食品生产过程中使用。检测盐酸克伦特罗在食品中残留的方法有很多种，包括理化检测方法，免疫学检测方法和生物传感器技术，其中酶联免疫吸附技术（ELISA）具有高灵敏度、可定量、操作简便、成本低等特点，在药残检测中得到了广泛的应用，并得到了迅速的发展。由于盐酸克伦特罗的分子量只有313.7，属于小分子半抗原，只有反应原性，而不具备免疫原性，因此本实验首先利用重氮化方法将盐酸克伦特罗小分子与大分子载体牛血清蛋白（BSA）和鸡卵清白蛋白（OVA）相连，合成了人工抗原CL-BSA和CL-OVA，其偶联比分别为27.4:1和12.0:1，并且应用了SDS-PAGE凝胶电泳和紫外扫描的方法对得到的偶联物进行了鉴定，电泳的鉴定结果显示了偶联物的分子量明显比载体蛋白的分子量要大，紫外扫面的鉴定结果显示了偶联物的吸收峰包含了盐酸克伦特罗和大分子载体蛋白的紫外扫描特征峰，并且在该基础上出现了一定的偏移；由此可以证明人工抗原偶联成功。用人工抗原CL-BSA免疫BALB/c小鼠，免疫完成后，采用间接ELISA的方法测定小鼠多抗血清（pAb）的抗体效价，并且利用了间接竞争ELISA的方法对pAb的敏感性进行了测定。测定结果显示，小鼠多抗血清的效价可以达到1:12800，血清敏感性测定实验也显示了小鼠多抗血清产生了针对CL的抗体，计算所得IC50为160ng/mL，由此进一步证实了人工抗原偶联成功。挑选血清效价高、敏感性良好的2号BALB/c小鼠来做细胞融合实验，将小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞NS0在PEG的作用下进行融合，获得杂交瘤细胞，并利用间接ELISA方法和间接竞争ELISA方法对获得的杂交瘤细胞株进行筛选，成功获得了一株抗盐酸克伦特罗的杂交瘤细胞株2E8，其上清的IC50为37.28ng/mL。本实验成功制备了盐酸克伦特罗的免疫原CL-BSA及包被原CL-OVA，并通过细胞融合实验获得了一株抗盐酸克伦特罗的杂交瘤细胞株，为盐酸克伦特罗单克隆试剂盒的制备奠定了基础。
徐素彬[9]（2013）在《苯乙醇胺A在生长育肥猪体内的代谢、残留及消除规律研究》文中进行了进一步梳理本研究以生长育肥猪为对象,研究苯乙醇胺A在生长育肥猪体内的代谢、残留及消除规律,为国家相关机构监管这类违禁品提供有力的技术支撑。试验一苯乙醇胺A在生长育肥猪体内的代谢产物及代谢规律研究本试验旨在研究生长育肥猪一次性采食苯乙醇胺A后,测定在猪血液、尿液和粪便中含量及其在尿液中的代谢产物,确定其代谢规律。试验选择56kg左右体重的健康DLY生长育肥猪9头,按体重随机分为2个处理,处理一为对照组,3个重复,每个重复1头猪；处理二为试验组,6个重复,每个重复1头猪。试验期2天,试验第一天对照组饲喂基础饲粮,试验组自由采食含苯乙醇胺A饲粮（20mg/kg） 20min（平均每头猪摄入苯乙醇胺A量为24.08±1.71 mg）,然后换喂基础饲粮。饲喂苯乙醇胺A后：从开始饲喂含苯乙醇胺A饲料的饲喂时间计算起,分别在采食后0.5、1、2、4、6、12、24h对试验组6头和对照组3头猪从颈静脉采血20mL；以每4h为时间段分段收集粪便和尿液,连续收集48h。血液、尿液和粪便中苯乙醇胺A含量采用高效液相色谱串联质谱法测定,尿液中苯乙醇胺A代谢产物用飞行时间质谱法测定。试验结果表明,生长育肥猪一次采食苯乙醇胺A后0.5h后,血液中检出苯乙醇胺A,2h后达到高峰,最大含量达]2.28±1.36ng/mL;血液半衰期T1/2为2.07±1.38h=采食后4-8h,尿液中苯乙醇胺A含量达到高峰282.68±124.74ng/mL;16h内尿液苯乙醇胺A含量均在100ng/mL以上。在采食后0-48h内,粪中苯乙醇胺A含量呈逐渐上升的趋势,在32h后达到最高峰,为62.]8+8.11 ng/g。在本实验48h内,尿液排泄苯乙醇胺A速度比粪便排泄的速度快,48h时粪尿中苯乙醇胺A仍然有较高含量,表明摄入的苯乙醇胺A在48h内并未从猪体内排泄完全。经飞行时间质谱分析,飞行一级质谱分析出尿液中存在9种苯乙醇胺A代谢产物；经飞行二级质谱确证了尿液中的7种苯乙醇胺A代谢产物。试验二苯乙醇胺A在育肥猪组织、尿液及血液中的残留和消除规律研究本试验旨在研究饲粮中的苯乙醇胺A在育肥猪体组织和体液中的残留和消除规律。用单因子完全随机试验设计,将体重为67.33±2.80kg的健康DLY生长育肥猪34头随机分为2个处理,处理一为对照组,10个重复,每个重复1头猪；处理二为试验组,24个重复,每个重复1头猪,组间初始体重差异不显着（P>0.05）。对照组在整个试验过程中均饲喂不含苯乙醇胺A的基础饲粮。试验组前28天自由采食含苯乙醇胺A饲粮（20mg/kg）;第29天开始饲喂不含苯乙醇胺A的基础饲粮,进入消除期,消除期为14天,整个试验共持续42天。试验开始第1、3、5、7、9、11天的早上11点（采食3h后）,随机选择试验组6头和对照组3头猪采集从颈静脉血,用于测定血液中苯乙醇胺A的含量。试验的第15、29天随机选择试验组6头和对照组2头屠宰；在消除期尿液呈阴性时（莱克多巴胺试纸条检测,本试验中消除3天后尿液呈阴性）及试验第36和43天随机选择试验组4头和对照组2头屠宰；采集试验猪组织（肺、肝脏、肾脏及肌肉）和体液（血液和尿液）,测定苯乙醇胺A的残留量。所有样品中苯乙醇胺A的含量均采用高效液相色谱串联质谱法进行测定。试验结果表明,育肥猪连续采食含苯乙醇胺A的饲粮后,血液中苯乙醇胺A含量呈时间累积效应,在第7-11天达到动态平衡,苯乙醇胺A浓度达到20.77-24.31ng/mL。育肥猪采食含20mg/kg苯乙醇胺A饲粮14 d后,组织及体液中苯乙醇胺A的浓度分别为肺脏305.86±195.2 ng/g,肾脏12.19±7.21 ng/g,肝脏4.11±1.73ng/g,肌肉4.26±1.87 ng/g,血液0.85±0.46ng/mL,尿液50.26±22.32 ng/mL;育肥猪采食含20mg/kg苯乙醇胺A饲粮28 d后,组织及体液中苯乙醇胺A的浓度分别为肺脏95.53±33.78 ng/g,肾脏2.67±1.28 ng/g,肝脏0.97±0.25 ng/g,肌肉2.26±0.41 ng/g,血液0.91±0.25 ng/mL,尿液17.33±8.24ng/mL。在莱克多巴胺试纸条检测尿液呈阴性时,尿液样经HPLC-MS/MS的检测,苯乙醇胺A残留量仍然高达1.26±0.20ng/mL;停止饲喂含苯乙醇胺A饲粮7d后,育肥猪血液中苯乙醇胺A的含量下降到检测限以下；停喂含苯乙醇胺A饲粮14d后,育肥猪尿液、肾脏、肝脏及肌肉中苯乙醇胺A残留下降到检测限以下的水平,而肺脏中苯乙醇胺A的残留仍然能检出。
郭萍,陈建安,张景平,谢恺[10]（2013）在《动物源产品中β-兴奋剂残留状况与防控分析》文中提出目的动物源产品中β-兴奋剂残留状况与防控分析。方法应用气质联用法对生猪尿液、毛发和肝脏中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、西马特罗和特步它林等5种常见β-兴奋剂进行定性定量分析,从残留结果分析β-兴奋剂的使用状况。结果在215份检测样品中,检出克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺等3种β-兴奋剂,未检出西马特罗、特步它林,阳性率为16.7%,尿样、肝脏和毛发中阳性率分别为16.3%、17.4%和16.7%,存在克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇混合使用、用量和用期混乱现象。结论违法使用现象屡禁不止,建立完善的兽药残留监控体系,对动物源产品进行全程监控,确实遏制β-兴奋剂的使用,保障食品安全。
二、盐酸克伦特罗在猪体内残留状况的调查分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、盐酸克伦特罗在猪体内残留状况的调查分析（论文提纲范文）
（1）表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写词表(Abbreviations) |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 β_2受体激动剂的简介 |
| 1.1.1 β_2受体激动剂的理化性质 |
| 1.1.2 β_2受体激动剂的药学作用和毒副作用 |
| 1.1.2.1 药学作用 |
| 1.1.2.2 毒副作用 |
| 1.1.3 国内外监控现状 |
| 1.1.4 检测方法研究 |
| 1.2 表面等离子体生物传感器 |
| 1.2.1 SPR生物传感器的基本原理 |
| 1.2.2 SPR生物传感器的分类及特点 |
| 1.2.3 SPR生物传感器在β_2-受体激动剂中的研究进展 |
| 1.3 研究内容及意义 |
| 第二章 克伦特罗和沙丁胺醇单克隆抗体的制备 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 主要仪器 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要溶液配制 |
| 2.1.4 实验所用动物和细胞 |
| 2.2 克伦特罗单克隆抗体的制备 |
| 2.2.1 动物免疫 |
| 2.2.2 细胞融合 |
| 2.2.3 阳性孔的筛选与克隆 |
| 2.2.4 腹水制备 |
| 2.2.5 单克隆抗体性质的鉴定 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 包被抗原的工作浓度及阳性血清效价 |
| 2.3.2 杂交瘤细胞的筛选和稳定性 |
| 2.3.3 单抗亚类鉴定 |
| 2.3.4 单抗性质鉴定 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 SPR检测克伦特罗 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 药品与试剂 |
| 3.1.2 仪器与设备 |
| 3.1.3 相关溶液的配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 克伦特罗抗体的固定 |
| 3.2.2 再生条件的选择 |
| 3.2.3 抗原-抗体动力学实验 |
| 3.2.4 建立标准曲线 |
| 3.2.5 特异性 |
| 3.2.6 稳定性和重复性 |
| 3.2.7 准确度和精密度 |
| 3.2.8 SPR传感器和UPLC-MS/MS的比较 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 克伦特罗抗体的固定 |
| 3.3.2 再生条件的确定 |
| 3.3.3 抗原-抗体动力学分析 |
| 3.3.4 标准曲线的构建 |
| 3.3.5 特异性 |
| 3.3.6 稳定性和重复性 |
| 3.3.7 准确度和精密度 |
| 3.3.8 SPR生物传感器和UPLC-MS/MS比较 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 SPR检测沙丁胺醇 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 药品与试剂 |
| 4.1.2 仪器与设备 |
| 4.1.3 相关溶液配制 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 抗体的固定 |
| 4.2.2 再生条件的确定 |
| 4.2.3 抗原-抗体动力学分析 |
| 4.2.4 标准曲线的构建 |
| 4.2.5 特异性分析 |
| 4.2.6 稳定性和重复性 |
| 4.2.7 准确度和精密度 |
| 4.2.8 SPR生物传感器和UPLC-MS/MS比较 |
| 4.4 小结 |
| 结论 |
| 1 制备了抗克伦特罗和抗沙丁胺醇单克隆抗体 |
| 2 建立了检测牛尿中的克伦特罗和沙丁胺醇的SPR直接检测法 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 致谢 |
（2）供港生猪禁限用兽药残留高通量检测方法的建立和应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 引言 |
| 1.1 研究目的和意义 |
| 1.2 国内外研究现状 |
| 1.2.1 固相萃取 |
| 1.2.2 液相色谱串联质谱 |
| 1.3 猪尿中多种兽药残留检测 |
| 1.3.1 待测物性质 |
| 1.3.2 多类兽药残留高通量检测 |
| 1.4 猪肝、猪尿中B-受体激动剂残留检测 |
| 1.4.1 待测物性质 |
| 1.4.2 残留分析技术 |
| 1.5 猪肝中氨基糖苷类兽药残留检测 |
| 1.5.1 待测物性质 |
| 1.5.2 残留分析技术 |
| 1.6 研究内容和方法 |
| 第二章 猪尿中37种兽药多残留检测技术研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.2.1 试验材料 |
| 2.2.2 试验方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 色谱-质谱条件的优化 |
| 2.3.2 样品前处理条件的优化 |
| 2.3.3 基质效应的评价 |
| 2.3.4 方法学验证 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 猪肝、猪尿中23种β-受体激动剂残留检测技术研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.2.1 试验材料 |
| 3.2.2 试验方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 仪器条件的优化和确定 |
| 3.3.2 前处理条件的优化和初步确定 |
| 3.3.3 酶解/酸解条件的选择和优化 |
| 3.3.4 定量方法的确定 |
| 3.3.5 方法学验证 |
| 3.3.6 外部验证 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 猪肝中氨基糖苷类兽药残留检测 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 试验材料 |
| 4.2.2 试验方法 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 质谱条件的优化 |
| 4.3.2 色谱条件的选择和优化 |
| 4.3.3 净化条件的选择和优化 |
| 4.3.4 前处理条件的确定 |
| 4.3.5 基质效应的评价 |
| 4.3.6 方法学验证 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 供港生猪禁限用兽药残留水平调查分析 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料和方法 |
| 5.2.1 样品来源和采样方法 |
| 5.2.2 检测方法 |
| 5.3 结果和分析 |
| 5.3.0 猪场分布 |
| 5.3.1 检测总体数据 |
| 5.3.2 按供港生猪企业分析 |
| 5.3.3 按检出项目种类分析 |
| 5.3.4 检出浓度水平分析 |
| 5.3.5 应急检测 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 结论 |
| 第七章 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（3）克伦特罗在猪尿液中的消除规律研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 材料 |
| 1.3 工作储备液和标准工作液的配制 |
| 1.4 动物实验及样本的采集 |
| 1.5 样品制备 |
| 1.6 色谱质谱条件 |
| 1.7 数据处理与计算 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（4）新型快速诊断方法对牛疫病和饲料安全应用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 现代畜牧业的发展目标及畜牧业安全体系 |
| 1.2 运用于诊断学的上转换发光技术 |
| 1.3 本研究关注的领域、目标和创新点 |
| 第二章 牛支原体重组膜蛋白表达及检测方法的构建 |
| 2.1 牛支原体研究综述 |
| 2.2 牛支原体重组膜蛋白表达及检测方法建立的材料与方法 |
| 2.3 牛支原体重组膜蛋白表达及检测方法建立的结果与分析 |
| 2.4 牛支原体抗体检测结果的讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 牛病毒性腹泻病毒抗原快速检测方法的研究 |
| 3.1 牛病毒性腹泻病毒研究进展 |
| 3.2 牛病毒性腹泻病毒快速检测方法构建所用材料与方法 |
| 3.3 牛病毒性腹泻病毒快速检测方法构建结果及性能分析 |
| 3.4 牛病毒性腹泻病毒抗原快速检测方法和快速检测方法应用的讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 克伦特罗快速定量上转换发光检测方法的研究 |
| 4.1 克伦特罗研究综述 |
| 4.2 克伦特罗快速定量上转换发光检测方法构建的材料与方法 |
| 4.3 克伦特罗快速定量上转换发光检测方法的结果与分析 |
| 4.4 克伦特罗快速定量上转换发光检测方法的讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 黄曲霉毒素B_1快速定量上转换发光检测方法的研究 |
| 5.1 黄曲霉毒素B_1综述 |
| 5.2 黄曲霉毒素B_1上转换发光检测方法的材料和方法 |
| 5.3 黄曲霉毒素B_1上转换发光检测方法的构建及性能分析 |
| 5.4 黄曲霉毒素B_1上转换发光检测方法及快速定量检测方法应用的讨论 |
| 5.5 小结 |
| 结论 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（5）浅谈动物源性食品中盐酸克伦特罗的残留及危害（论文提纲范文）
| 0引言 |
| 1盐酸克伦特罗概况 |
| 1.1 盐酸克伦特罗的理化性质 |
| 1.2 盐酸克伦特罗作用机理 |
| 2盐酸克伦特罗的残留特性 |
| 3盐酸克伦特罗的残留的危害 |
| 3.1 盐酸克伦特罗残留对动物健康的危害 |
| 3.2 盐酸克伦特罗残留对人体健康的危害 |
| 4小结 |
（6）喹乙醇在猪、鸡和鱼体内的残留消除研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 1 前言 |
| 1.1 立题依据 |
| 1.2 喹乙醇的研究进展 |
| 1.2.1 喹乙醇的代谢研究 |
| 1.2.2 喹乙醇的残留消除研究 |
| 1.2.3 喹乙醇及其主要代谢物检测技术的研究进展 |
| 1.3 研究内容与目标 |
| 2 喹乙醇主要代谢物对照品的制备 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 药品和试剂 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 |
| 2.1.3 喹乙醇及主要代谢物的合成方法 |
| 2.1.4 喹乙醇主要代谢物的结构表征鉴定、纯度及理化性质研究 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 N1-脱一氧喹乙醇的结构鉴定 |
| 2.2.2 N4脱一氧喹乙醇的结构鉴定 |
| 2.2.3 N1,N4-脱二氧喹乙醇的结构鉴定 |
| 2.2.4 3-甲基-喹恶啉-2-羧酸的结构鉴定 |
| 2.2.5 N1 -脱一氧喹乙酸的结构鉴定 |
| 2.2.6 N1,N4 -脱二氧喹乙酸的结构鉴定 |
| 2.2.7 喹乙醇主要代谢物纯度、吸光系数、熔点、稳定性、溶解度结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 结论 |
| 3 喹乙醇及其主要代谢物高效液相检测方法的建立 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 药品与试剂 |
| 3.1.2 溶液配制 |
| 3.1.3 仪器与设备 |
| 3.1.4 喹乙醇及其代谢产物在动物组织中的残留检测方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 色谱分离 |
| 3.2.2 检测限与定量限 |
| 3.2.3 标准曲线的确立 |
| 3.2.4 添加回收率和批间变异系数 |
| 3.2.5 稳定性结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 结论 |
| 4 喹乙醇在猪、鸡和鱼体内的残留消除研究 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 实验动物 |
| 4.1.2 给药和样品采集 |
| 4.1.3 样品处理方法定量及数据处理 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 喹乙醇及其代谢产物在猪组织中的残留消除规律 |
| 4.2.2 喹乙醇及其代谢产物在鸡组织中的残留消除规律 |
| 4.2.3 喹乙醇及其代谢产物在鱼可食性组织中的残留消除规律 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 结论 |
| 5 喹乙醇在食品动物的暴露评估 |
| 5.1 JECFA |
| 5.1.1 每日允许摄入量(ADI) |
| 5.1.2 残留靶组织和残留标示物 |
| 5.1.3 喹乙醇的暴露评估 |
| 5.1.4 推荐最高残留限量(MRLs) |
| 5.1.5 休药期 |
| 5.2 美国FDA |
| 5.2.1 日许量(ADI) |
| 5.2.2 安全浓度(Safety Concentration,SC) |
| 5.2.3 残留靶组织与残留标示物 |
| 5.2.4 最高残留限量(MRLs) |
| 5.2.5 休药期 |
| 5.3 按照欧盟EMEA程序评价 |
| 5.3.1 日许量 |
| 5.3.2 安全浓度 |
| 5.3.3 残留靶组织与残留标示物 |
| 5.3.4 最高残留限量(MRLs) |
| 5.3.5 计算TMDI |
| 5.3.6 休药期 |
| 5.4 残留限量标准草案 |
| 6 全文总结 |
| 7 文献综述 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 放射示踪法的原理与技术要求 |
| 7.2.1 放射示踪法的基本原理 |
| 7.2.2 放射示踪法的技术要求 |
| 7.3 放射示踪法在新药研发中的应用 |
| 7.3.1 药效学研究 |
| 7.3.2 药动学研究 |
| 7.3.3 作用机制研究 |
| 7.4 放射性示踪法在兽药食品安全性评价中的应用 |
| 7.4.1 吸收与排泄 |
| 7.4.2 代谢 |
| 7.4.3 分布与消除 |
| 7.4.4 食品安全标准的设定 |
| 7.5 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 附录 |
| 附录Ⅰ —喹乙醇主要代谢产物对照品制备的标准化操作规程 |
| 附录Ⅱ —组织中喹乙醇及其主要代谢物残留检测方法标准操作规程 |
| 附录Ⅲ —答辩论文修改意见、主要问题及回答 |
（7）生猪饲养对其制品食用安全性溯源分析的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 动物源食品发展现状 |
| 1.1.1 动物源食品的概念 |
| 1.1.2 国内外动物源食品发展现状 |
| 1.1.3 国内外动物源食品的重大安全事件 |
| 1.2 猪只养殖及猪肉其制品发展现状 |
| 1.3 猪饲料的发展现状 |
| 1.4 本课题研究目的与意义 |
| 1.5 课题研究的主要内容 |
| 第2章 猪只饲养环境对其制品食用安全性影响的分析 |
| 2.1 猪只饲养环境中存在的问题 |
| 2.2 饲养环境对猪肉制品食用安全的影响 |
| 第3章 饲料对猪肉制品食用安全性影响的分析 |
| 3.1 饲料中的有毒物质对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.1.1 饲料中黄曲霉毒素对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.1.2 饲料中氰化物对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.1.3 饲料中的亚硝酸盐对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.1.4 国家标准 |
| 3.2 饲料中的重金属与非金属元素对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.2.1 饲料中的镉对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.2.2 饲料中的汞对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.2.3 饲料中的铅对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.2.4 猪肉中的铜对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.2.5 饲料中的砷对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.2.6 国家标准 |
| 3.3 饲料中的微生物对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.3.1 饲料中霉菌对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.3.2 饲料中的细菌对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.4 饲料中的农药对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.5 饲料中的添加剂对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.5.1 饲料中防霉剂的添加对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.5.2 饲料中盐酸克伦特罗的添加对猪肉制品食用安全的影响 |
| 3.5.3 国家标准 |
| 第4章 兽药残留对猪肉制品食用安全性影响的分析 |
| 4.1 引起猪肉制品中兽药残留的原因 |
| 4.1.1 非法使用违禁药物 |
| 4.1.2 超量使用兽药 |
| 4.1.3 动物受到疾病威胁,导致滥用药物 |
| 4.1.4 不执行休药期规定 |
| 4.2 猪肉制品中兽药残留产生的食用安全问题 |
| 4.2.1 中毒反应 |
| 4.2.2 过敏反应 |
| 4.2.3 产生耐药性 |
| 4.2.4 三致作用 |
| 4.2.5 影响肠道正常微生物平衡 |
| 4.3 国家标准 |
| 第5章 实例分析：黑龙江省巴彦地区猪肉制品的安全性溯源分析 |
| 5.1 试验材料及方案 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.2.1 饲料及猪肉中有毒物质含量的测定 |
| 5.2.2 饲料及猪肉中重金属和非金属含量的测定 |
| 5.2.3 饲料及猪肉中微生物总数的测定 |
| 5.2.4 饲料及猪肉中农药含量的测定 |
| 5.2.5 饲料及猪肉中防霉剂含量的测定 |
| 5.2.6 饲料及猪肉中盐酸克伦特罗含量的测定 |
| 5.2.7 饲料和猪肉中药物含量的测定 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 饲料及猪肉样品中有毒物质含量测定结果的分析 |
| 5.3.2 饲料及猪肉样品中重金属和非金属含量测定结果的分析 |
| 5.3.3 饲料及猪肉样品中微生物总数测定结果的分析 |
| 5.3.4 饲料及猪肉样品中农药含量测定结果的分析 |
| 5.3.5 饲料及猪肉样品中脱氢乙酸和盐酸克伦特罗含量测定结果的分析 |
| 5.3.6 饲料及猪肉中常见药物含量测定结果的分析 |
| 第6章 讨论 |
| 6.1 猪患病对其制品食用安全的影响的探讨 |
| 6.2 转基因技术对猪肉制品的安全性影响的探讨 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（8）抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 盐酸克伦特罗的理化性质及其作用机理 |
| 1.2 盐酸克伦特罗的残留与危害 |
| 1.2.1 盐酸克伦特罗的残留现状 |
| 1.2.2 盐酸克伦特罗对人和动物的危害 |
| 1.2.3 盐酸克伦特罗的中毒事件 |
| 1.3 盐酸克伦特罗的检测方法 |
| 1.3.1 简易检测法 |
| 1.3.2 理化检测方法 |
| 1.3.3 免疫学检测方法 |
| 1.3.4 生物传感器技术(BS) |
| 1.4 酶联免疫吸附技术简介 |
| 1.4.1 原理 |
| 1.4.2 酶联免疫吸附技术的应用 |
| 1.5 本文研究的主要内容与目的 |
| 2 盐酸克伦特罗人工抗原的合成与鉴定 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 仪器 |
| 2.2.2 试剂 |
| 2.2.3 实验所用动物 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 CL 人工抗原的合成 |
| 2.3.2 CL 人工抗原与包被原的物理学鉴定 |
| 2.3.3 偶联比测定 |
| 2.3.4 CL 人工抗原与包被原的免疫学鉴定 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 CL 与载体蛋白的偶联 |
| 2.4.2 SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定果 |
| 2.4.3 紫外扫描鉴定结果 |
| 2.4.4 偶联物的偶联比计算 |
| 2.4.5 最佳包被抗原 CL-OVA 的浓度确定 |
| 2.4.6 多抗血清效价测定 |
| 2.4.7 血清敏感性测定 |
| 2.5 讨论 |
| 2.5.1 半抗原偶联方法的选择 |
| 2.5.2 人工抗原载体的选择 |
| 2.5.3 关于载体蛋白对半抗原残基的影响 |
| 2.5.4 免疫动物及免疫剂量的选择 |
| 2.5.5 佐剂 |
| 2.6 小结 |
| 3 盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 仪器 |
| 3.2.2 试剂 |
| 3.2.3 实验所用动物和细胞 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 细胞融合过程 |
| 3.3.2 融合后细胞的培养和检测 |
| 3.3.3 阳性杂交瘤细胞的克隆化 |
| 3.3.4 阳性杂交瘤细胞株的冻存 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.5 讨论 |
| 3.5.1 单克隆抗体制备的必要性 |
| 3.5.2 抗体的产生和融合时间的选择 |
| 3.5.3 关于选择培养基 |
| 3.5.4 融合剂聚乙二醇(PEG) |
| 3.6 小结 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 英文缩写词汇表 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 发表论文情况 |
（9）苯乙醇胺A在生长育肥猪体内的代谢、残留及消除规律研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 β-兴奋剂的结构 |
| 2 β-肾上腺素能兴奋剂的代谢 |
| 3 β-肾上腺素能兴奋剂的毒性及残留分布 |
| 3.1 β-兴奋剂的毒性 |
| 3.2 β-肾上腺素能兴奋剂在机体内的残留 |
| 4 对苯乙醇胺类物质的禁用规定 |
| 5 β-兴奋剂的检测方法 |
| 6 有待研究的问题、试验目的及试验意义 |
| 6.1 有待研究的问题 |
| 6.2 本研究的目的和意义 |
| 6.3 研究内容 |
| 7 技术路线 |
| 第二章 试验内容 |
| 试验一 苯乙醇胺A在生长育肥猪体内的代谢产物及代谢规律研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验设计 |
| 1.2 试验饲粮 |
| 1.3 试验材料 |
| 1.3.1 化学试剂 |
| 1.3.2 仪器设备 |
| 1.4 试验管理 |
| 1.5 考察指标 |
| 1.5.1 血液苯乙醇胺A含量 |
| 1.5.2 粪尿苯乙醇胺A含量 |
| ].5.3 尿中苯乙醇胺A代谢产物的鉴定 |
| 1.6 苯乙醇胺A及代谢产物的检测方法 |
| 1.6.1 尿液中苯乙醇胺A代谢产物测定(HPLC-QTOF/MS/MS分析) |
| 1.6.2 血液、尿液及粪中苯乙醇胺A含量测定(HPLC-MS/MS分析) |
| 2 数据处理与分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 猪尿液中苯乙醇胺A代谢产物的分析和鉴定 |
| 3.1.1 苯乙醇胺A的HPLC-QTOF/MS/MS分析 |
| 3.1.2 尿液HPLC-QTOF/MS分析结果 |
| 3.1.3 各代谢产物的一级质谱图 |
| 3.1.4 苯乙醇胺A代谢产物的HPLC-QTOF/MS/MS鉴定 |
| 3.2 苯乙醇胺A残留量检测方法验证 |
| 3.2.1 线性范围与检测限 |
| 3.2.2 回收率与精密度 |
| 3.3 育肥猪血液、尿液及粪便中苯乙醇胺A含量 |
| 3.3.1 不同时间点血液中苯乙醇胺A含量(ng/mL) |
| 3.3.2 不同时间段尿液和粪中苯乙醇胺A含量 |
| 4 讨论 |
| 4.1 生长育肥猪尿液中苯乙醇胺A的代谢产物 |
| 4.1.1 苯乙醇胺A的葡萄糖醛酸代谢物 |
| 4.1.2 苯乙醇胺A的甘氨酸结合代谢物 |
| 4.1.3 苯乙醇胺A的硫酸结合代谢物 |
| 4.1.4 苯乙醇胺A的其他代谢产物 |
| 4.2 苯乙醇胺A残留检测方法的优化 |
| 4.2.1 酶添加量的优化 |
| 4.2.2 流动相的选择 |
| 4.3 生长育肥猪血液中苯乙醇胺A代谢动力学规律 |
| 4.4 苯乙醇胺A在生长育肥猪尿液和粪便中的排泄规律 |
| 5 小结 |
| 试验二 苯乙醇胺A在育肥猪组织、尿液及血液中的残留和消除规律研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验设计 |
| 1.2 试验饲粮 |
| 1.3 试验材料 |
| 1.3.1 化学试剂 |
| 1.3.2 仪器设备 |
| 1.4 试验管理 |
| 1.5 考察指标 |
| 1.6 检测方法 |
| 1.6.1 样品前处理 |
| 1.6.2 仪器条件 |
| 2 数据处理与统计分析 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 苯乙醇胺A残留检测方法检测限与回收率 |
| 3.2 苯乙醇胺A在猪血液中的累积规律 |
| 3.3 苯乙醇胺A在猪组织中的残留量及残留规律 |
| 4 讨论 |
| 4.1 育肥猪血液中苯乙醇胺A的累积规律 |
| 4.2 育肥猪组织中苯乙醇胺A的残留和消除规律 |
| 4.2.1 育肥猪肺脏中苯乙醇胺A的残留及消除规律 |
| 4.2.2 育肥猪肝脏和肾脏中苯乙醇胺A残留及消除规律 |
| 4.2.3 育肥猪肌肉中苯乙醇胺A的残留及消除规律 |
| 4.2.4 育肥猪血液和尿液中苯乙醇胺A残留及消除规律 |
| 5 小结 |
| 第三章 全文结论与有待研究的问题 |
| 1 全文结论 |
| 2 本研究的创新点 |
| 3 有待进一步研究的问题 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表学术文章 |
（10）动物源产品中β-兴奋剂残留状况与防控分析（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样品来源 |
| 1.2 检测方法 |
| 1.3 统计方法 |
| 1.4 结果判定样本中有1种或1种以上兴奋剂的检测结果大于检测限时判为阳性样品。 |
| 2 结果 |
| 2.1 方法有效性验证 |
| 2.2 现场调查 |
| 2.3 样品中兴奋剂的检测结果 |
| 2.4 不同兴奋剂的残留结果 |
| 2.5 具有对应关系标本检测结果 |
| 2.6 克伦特罗阳性样品定量离子图 |
| 3 讨论 |
四、盐酸克伦特罗在猪体内残留状况的调查分析（论文参考文献）
- [1]表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇[D]. 孙铭雪. 烟台大学, 2021(11)
- [2]供港生猪禁限用兽药残留高通量检测方法的建立和应用[D]. 郭平. 中国农业大学, 2017(08)
- [3]克伦特罗在猪尿液中的消除规律研究[J]. 张倩,颜显辉,管恩平,唐正浩. 中国动物检疫, 2016(12)
- [4]新型快速诊断方法对牛疫病和饲料安全应用的研究[D]. 罗海峰. 宁夏大学, 2016(02)
- [5]浅谈动物源性食品中盐酸克伦特罗的残留及危害[J]. 陈秋玲,聂婉,伍晓红,周柳,王琤韡. 江西饲料, 2016(02)
- [6]喹乙醇在猪、鸡和鱼体内的残留消除研究[D]. 韩俊成. 华中农业大学, 2016(05)
- [7]生猪饲养对其制品食用安全性溯源分析的研究[D]. 朱晓文. 黑龙江大学, 2014(08)
- [8]抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备[D]. 段倩倩. 郑州大学, 2014(02)
- [9]苯乙醇胺A在生长育肥猪体内的代谢、残留及消除规律研究[D]. 徐素彬. 四川农业大学, 2013(06)
- [10]动物源产品中β-兴奋剂残留状况与防控分析[J]. 郭萍,陈建安,张景平,谢恺. 中国卫生检验杂志, 2013(12)