一、EFFECT OF ELECTROACUPUNCTURE OF SCALP-POINTS ON ABNORMAL DISCHARGES OF NEURONS AROUND THE CEREBRAL HEMORRHAGE FOCUS IN THE RAT（论文文献综述）
耿道双[1]（2021）在《基于微波技术的急性紧张性痛觉脑活动信号的检测与识别方法研究》文中指出探索并揭示痛觉脑活动的神经机制是获取更多的脑疾病诊断方法和治疗手段的一个具有挑战性的科学问题,尤其对神经性疼痛的早期预警和诊断非常重要。早期的痛觉脑活动检测方法如脑电图、脑磁图、血氧水平依赖功能磁共振成像技术和正电子发射断层扫描技术等。这些方法一定程度上改善了痛觉的检测和监测,为脑疾病的监控和治疗带来了发展契机。然而这些方法还存在一些技术难点,有的时间或空间分辨率低,有的设备昂贵、检测成本高或对人体有放射性伤害等,给院前预警和痛觉脑信号的精准识别带来了困难。微波检测技术因其不受时-空分辨率的限制、便携和低成本的特点,近年来逐渐受到国内外学者的关注,被广泛用于脑中风、脑肿瘤和失眠症等院前检测方面的研究。基于微波检测技术的优势,本文以急性紧张性痛觉脑活动为研究对象,从微波频率变化对痛觉神经元活动的影响、痛觉脑活动的检测和信号识别方法方面,开展了深入而广泛的研究。本文的研究内容和主要研究结果概述如下:1)利用微波能够调节脑活动功能区放电频率的特性,开展微波辐射对脑电相对功率变化影响的研究。根据微波辐射与脑动力学之间的关系,建立一种微波频率与动态痛觉脑电频带功率变化以及源定位关系的测试方法,寻找最佳微波测试频率。通过计算动态脑电频带相对功率的变化和对比源定位的影响,验证不同微波频率与痛觉脑功能区神经元放电频率的抑制/激活关系。结果表明,微波辐射能够改变脑电功率的变化,痛觉源活动会随着微波频率的变化而增强或减弱,且5GHz微波测试效果最佳。另外,对比微波传输信号与痛觉脑电信号的波形图及频谱图,利用线性相关分析方法,计算出微波传输信号与脑电信号之间的相关系数,验证了微波检测痛觉脑活动的可行性。2)提出了一种熵结合机器学习的方法识别微波传输信号中的痛觉信息。根据微波传输信号的时序变化特点,提出了基于波动的多尺度色散熵和基于频域变化的功率谱香农熵作为表征“无痛”和“痛”信号复杂度的特征。利用经验模态分解和变分模态分解提取两种疼痛类别信号的熵,采用基于互信息的最小冗余最大相关准则和主成分分析算法进行特征选择和降维,选取浅层机器学习模型对特征数据集进行训练和分类,分析特征提取算法、特征选择算法的分类性能。结果表明,熵对于区分具有不同复杂度的痛觉信号效果显着,基于变分模态分解结合最小冗余最大相关准则获取的特征数据具有更高的分类准确率、灵敏度、特异性、阳性预测值,分类策略表现更优,对于提高微波检测的识别性能具有重要价值。3)提出一种多类型复合特征的微波痛觉脑活动识别方法。在“无痛”和“痛”二分类任务的基础上,使用小波包分解、变分模态分解两种算法独立或叠加的方式,提取相对能量变化、精细复合多尺度色散熵、精细复合多尺度模糊熵和基于Burg算法的自回归模型系数作为识别无痛和痛的复合特征。采用浅层机器学习分类策略,评价复合特征的性能。结果显示,叠加的特征提取算法能够获得更大的识别能力,更有可能从信号中捕捉到的大脑非线性动态,且随机森林的分类策略更优,结果更稳定。该方法进一步优化了痛觉脑活动信号的识别率。4)提出了基于深度神经网络的疼痛强度特征表示与识别方法。借助小波包变换极佳的频带细分识别能力,利用多尺度熵、不同深度的卷积神经网络和不同层结构的长短时记忆网络的特征提取和分类模型,结合现有的浅层机器学习模型,设计了七种特征提取和识别模型。结果表明,卷积神经网络的特征提取模型,明显改善了中度疼痛和深度疼痛难以区分的情况,相比较多尺度熵特征模型,分类性能提高3%以上。而对于分类性能,卷积神经网络和长短时记忆网络要比浅层机器学习方法,分类准确率、精确率更高,尤其是双向长短时记忆网络。该方法解决了疼痛强度脑信号复杂的特征工程计算成本,同时增强了不同等级疼痛信号的识别能力。本文提出的微波检测方法依靠其不受时间分辨率和空间分辨率限制的优势,以其安全、低成本、方便快捷等优势使痛觉脑活动检测更加精确、及时和高效,对疼痛类型简单、快速、准确的检测具有重要应用价值。另外,运用先进的机器学习技术,挖掘脑活动数据中蕴含的信息,极大改善了痛觉和疼痛强度识别能力,为高精度的痛觉脑活动解析提供了科学基础和技术支持。
黄雯[2]（2021）在《枕三经排刺联合三焦针法治疗脑梗死后共济失调的临床疗效观察》文中进行了进一步梳理目的:通过观察枕三经排刺联合三焦针法治疗脑梗死后共济失调的临床疗效,与单纯使用枕三经排刺进行对比,以改进现有脑梗死后共济失调的针刺治疗方案,提高针刺治疗效果。方法:1.研究对象:依据本研究的纳入与排除标准,按照预实验结果,纳入天津中医药大学第一附属医院针灸科十病区住院患者共62例,根据随机数字表及盲法原则,以1:1比例分为治疗组、对照组各31例。2.治疗方法:内科常规治疗参照《中国脑血管病防治指南》要求对纳入患者进行个体化诊治,两组均根据《针灸学》选穴,进行基础针刺治疗。在此基础上,治疗组采用枕三经排刺联合三焦针法,对照组采用单纯枕三经排刺,每日1次,每周6次,共治疗4周。3.观察指标:以国际合作共济失调量表（International Cooperative Ataxia Rating Scale,ICARS）评分作为主要疗效指标,以改良Barthel指数（Modified Barthel Index,MBI）量表评分作为次要疗效指标。4.统计方法:采用SPSS26.0软件进行统计学数据分析。结果:研究期间,治疗组脱落1例,最终61例患者完成治疗,其中治疗组30例,对照组31例,且针刺过程中无不良反应事件发生。1.治疗组与对照组在患者性别、年龄、病程、既往史、个人史、治疗前ICARS评分、治疗前MBI评分等基线资料差异无统计学意义（P>0.050）,具有可比性。2.治疗后两组ICARS评分均较治疗前显着降低（P<0.010）,通过治疗前后ICARS评分差值比较,两组评分差值差异具有统计学意义（P<0.010）,治疗组评分差值高于对照组。将ICARS评分进一步细化,在姿势和步态障碍、动态功能、语言障碍、眼球运动障碍4项评分中,两组各项评分均较治疗前显着降低（P<0.010）;治疗前后差值进行组间比较,两组间姿势和步态障碍、动态功能评分差值差异具有统计学意义（P<0.050）,治疗组评分差值高于对照组;两组间语言障碍、眼球运动障碍评分差值差异无统计学意义（P>0.050）。3.治疗后两组MBI评分均较治疗前显着提高（P<0.010）,通过治疗前后MBI评分差值比较,两组评分差值差异具有统计学意义（P<0.010）,治疗组评分差值高于对照组。结论:1.枕三经排刺联合三焦针法与单纯使用枕三经排刺均可改善脑梗死后共济失调患者的临床症状及日常生活活动能力,联合针刺法在改善脑梗死后共济失调患者的姿势与步态障碍、动态功能及日常生活活动能力方面优于单纯使用枕三经排刺,在改善患者语言障碍、眼球运动功能方面两种针刺方法疗效相近;2.枕三经排刺联合三焦针法可有效改善脑梗死后共济失调患者的运动功能,提高患者生活自理能力,同时不良反应发生率低下,值得临床推广及进一步深入研究。
姜帅[3]（2021）在《rTMS-FES联合刺激对脑卒中患者下肢H反射激活后抑制及足下垂的影响》文中研究指明中风是导致人类死亡和残疾的主要疾病之一。大约2/3的脑卒中患者有肢体功能障碍,给人们的身心健康和生活质量造成了重大影响,并给社会和家庭造成了重大经济和心理压力。中风后,患者表现出痉挛、虚弱和行走障碍等症状。脑卒中患者出现肌肉无力、肌肉活动障碍和肌肉间协调异常,是导致运动不对称和运动能力下降的主要因素。下肢力量和运动协调能力的丧失是脑卒中后最常见的导致长期残疾的障碍。各种功能障碍引起的足下垂对患者的预后和功能恢复造成较大的阻碍,跌倒风险的增加更是会加重患者后续的安全问题。脑卒中患者下肢功能的恢复亟待解决。“中枢-外周-中枢”闭环康复理论被证明是一种有效的神经康复模型。基于这一理论,重复经颅磁刺激（repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS）联合功能性电刺激（functional electrical stimulation,FES）可能是治疗脑卒中后肢体功能障碍的有效方法。rTMS可以改变大脑皮层的兴奋性诱导同侧M1区的神经可塑性,加强皮质神经元之间的联系,短暂增加脑血流,增加双半球之间的功能连接从而改善皮质脊髓束功能,促进运动康复。而FES在临床上的应用已经十分广泛,尤其在卒中早期,患者肌力尚未诱发出来之前,FES可使患者产生被动肌肉收缩,防止肌萎缩以及关节粘连等问题并为后期康复提供较好的条件。目的:本研究基于神经可塑性理论,运用“中枢-外周-中枢”闭环康复模型,利用rTMS联合FES治疗脑卒中后下肢功能障碍。通过rTMS刺激可以引起神经元兴奋并降低突触传导阈值,可以进一步放大和增强FES治疗产生的突触可塑性和神经元兴奋性;通过rTMS作用于患侧的大脑皮层来诱发上运动神经元兴奋,可以强化FES治疗产生的周围神经和相关肌肉恢复效果,达到增强下运动神经元的兴奋性,并兴奋整个神经传导通路的作用。观察rTMS联合FES治疗下肢功能障碍脑卒中患者的踝关节活动度、简化Fugl-Meyer下肢评分、临床痉挛指数（Clinic Spasticity Index,CSI）、H反射激活后抑制（post-activation depression,PAD）、运动诱发电位（motor evoked potential,MEP）、静息运动阈值（rest motor threshold,RMT）等,分析其治疗效果和可能的机制,对“中枢-外周-中枢”闭环康复模型进行验证。为脑卒中后下肢功能障碍的治疗提供新思路,为我国康复事业的进步做贡献。方法:本研究选取北京小汤山医院脑卒中伴有下肢功能异常的住院患者,随机分为联合治疗组（n=13）和对照组（n=15）,最终有28例受试者完成本研究。联合治疗组患者进行常规康复训练、rTMS治疗联合FES治疗（同时进行）。rTMS刺激频率为5Hz,作用位置为患侧半球下肢运动皮层代表区,每次20分钟,每天一次,每周5天,共4周;FES刺激作用于患者患侧胫前肌,强度为引起肌肉收缩且患者可以耐受,每次20分钟,每天一次,每周5天,共4周。对照组进行FES刺激,每次20分钟,每天一次,每周5天,共4周。结果:实验开始前采集所有受试者的一般情况,包括年龄、性别、身高、体重、发病时间、病灶位置。分别于治疗前、治疗结束后进行PAD、MEP、RMT检测,踝关节活动度测量,并进行简化下肢Fugl-Meyer评分与CSI评分等。本研究评定过程由特定评定师进行,该评定师对实验不知情。1.CSI评分结果:治疗四周后,联合治疗组与对照组CSI评分均较前降低,差异有统计学意义（P<0.05）,治疗前后CSI差值组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。表明rTMS联合FES以及单独的FES对于脑卒中患者下肢痉挛均有改善效果,且rTMS联合FES优于单独的FES治疗疗效。2.简化Fugl-Meyer下肢部分评分结果:治疗四周后,联合治疗组与对照组Fugl-Meyer评分均较前显着增加,差异均有统计学意义（P<0.05）。表明rTMS联合FES治疗和单独的FES治疗均能改善脑卒中患者下肢的功能状况,两者改善情况没有明显差异。3.患侧踝关节主、被动活动度结果:治疗四周后,联合治疗组在主动背屈、主动跖屈、被动背屈ROM中均较前显着改善,具有统计学意义（P<0.05）。对照组在主动背屈、主动跖屈ROM中较前显着改善（P<0.05）。表明rTMS联合FES治疗对于脑卒中患者踝关节主动背屈、跖屈、被动背屈ROM均有改善作用,单独的FES治疗只对主动背屈、跖屈ROM有改善作用。4.患侧踝关节休息位角度结果:治疗四周后,联合治疗组与对照组踝关节休息位角度均较前降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。且治疗前后差值比较联合治疗组显着优于对照组（P<0.05）。表明rTMS联合FES治疗以及单独的FES治疗对足下垂均有治疗效果,且rTMS联合FES对足下垂改善的更加明显。5.患侧胫前肌、腓肠肌PAD结果:治疗四周后,联合治疗组胫前肌和腓肠肌PAD均有所恢复,差异具有统计学意义（P<0.05）。对照组胫前肌和腓肠肌PAD均没有出现明显变化（P>0.05）。治疗前后胫前肌和腓肠肌PAD差值比较联合治疗组均显着优于对照组（P<0.05）。表明rTMS联合FES治疗对于脑卒中患者下肢激活后抑制有明显的治疗效果,单独的FES治疗对于激活后抑制没有明显疗效。6.患侧RMT结果:治疗四周后,联合治疗组RMT出现明显下降,差异具有统计学意义（P>0.05）。对照组RMT没有出现显着性差异。表明rTMS联合FES治疗有提高大脑兴奋性的作用,单独的FES治疗对大脑兴奋性没有明显疗效。7.治疗前后两组患者下肢H反射PAD与CSI的相关性分析:CSI评分与胫前肌PAD呈显着负相关（P<0.05）,CSI评分与腓肠肌PAD不存在相关关系（P>0.05）。8.治疗前后两组患者踝关节休息位角度与CSI的相关性分析:干预前CSI评分与踝关节休息位角度呈显着正相关（P<0.001）。干预后CSI评分与踝关节休息位角度呈显着正相关（P<0.001）。9.患侧下肢MEP引出率结果:治疗四周后,联合治疗组MEP引出率较前有明显提高,差异有统计学意义（P<0.05）,对照组MEP引出率较前没有显着变化（P>0.05）。表明rTMS联合FES治疗对于脑卒中患者神经通路的修复有明显改善作用,单独的FES治疗对于神经通路没有明显改善。结论:rTMS联合FES治疗可以有效缓解脑卒中患者下肢的功能障碍。1.rTMS联合FES治疗可以有效缓解脑卒中患者下肢的痉挛程度,从而改善足下垂。2.rTMS联合FES治疗对脑卒中患者的激活后抑制有缓解的作用。3.rTMS联合FES治疗可以显着增加大脑皮质的兴奋性和下行传导通路的完整性。
赵慧[4]（2020）在《免疫与炎症反应在脑卒中动物模型中的影响与机制研究》文中提出目的:脑卒中后脑内炎症反应参与损伤级联扩大及神经功能恶化,但其特点与直接作用尚不明确。本研究通过注射百日咳毒素（pertussis toxin,PTx）增强脑缺血或出血后脑内炎症反应,观察脑内炎症特点、病理变化及临床结局,明确脑卒中后脑内炎症的直接作用。在细胞调节水平,具有获得性免疫功能的固有淋巴细胞（innate lymphoid cell,ILC）亚群对脑卒中的免疫调节作用与机制尚不明确。因此我们研究以2型为代表的ILC及其调节因子白介素（interleukin,IL）-33对脑卒中的影响,以明确脑卒中后免疫细胞介导的炎症反应特征与机制,为免疫调节治疗提供实验依据。方法:第一部分:野生型C57BL/6小鼠100只,雄性,予以分为5组,假手术组（Sham组）、脑缺血组（MCAO组）、PTx处理脑缺血组（20μg/kg PTx+MCAO组）、脑出血组（ICH组）、PTx处理脑出血组（20μg/kg PTx+ICH组）（随机数字法）,每组20只。采用线栓法对野生型C57BL/6小鼠建立60分钟大脑中动脉缺血再灌注模型。采用胶原酶微量泵注射法制备野生型C57BL/6小鼠脑出血模型。应用改良的神经功能缺损评分量表、转棒疲劳实验检测第1-3天各组小鼠的神经功能损伤情况;用流式细胞术对第3天各组小鼠的病灶侧脑组织免疫细胞浸润情况进行分析,包括小胶质细胞、中性粒细胞、自然杀伤细胞、B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞;小动物活体成像技术对第3天各组小鼠中枢活性氧进行标记示踪;免疫荧光染色的方法对内皮细胞与紧密连接蛋白ZO-1、内皮细胞与紧密连接蛋白Claudin-5共染,观察第3天各组小鼠的血脑屏障通透性。第二部分:野生型C57BL/6小鼠40只,雄性,予以分为2组,假手术组（Sham组）与脑缺血组（MCAO组）（随机数字法）,每组20只。流式细胞分析比较各组小鼠MCAO模型制备后第3天脑、脾、外周血的ILC2计数;免疫荧光染色法分析少突胶质细胞、星形胶质细胞中IL-33表达水平。应用药理学干预和转基因动物,研究删除、转输或活化ILC2细胞对神经功能评分和梗死体积的影响:分组1)野生型C57BL/6小鼠制备MCAO模型后20只,雄性,予以分为2组,PBS处理组（Vehicle组）与删除ILC2组（anti-CD90.2组）（随机数字法）,每组10只。2)应用免疫缺陷的Rag2-/-γc-/-小鼠制备MCAO模型后20只,雄性,予以分为2组,PBS处理组（Vehicle组）与ILC2转输组（ILC2组）（随机数字法）,每组10只。3)野生型C57BL/6小鼠制备MCAO模型后20只,雄性,予以分为2组,PBS处理组（Vehicle组）与IL-33处理组（IL-33组）（随机数字法）,每组10只。应用小动物磁共振成像仪T2成像比较各组小鼠MCAO模型制备后第1、3、7天脑梗死病灶体积;改良的神经功能缺损评分量表、转角实验比较各组小鼠MCAO模型制备后第1、3、7天神经功能损伤情况。结果:第一部分:（1）各组小鼠神经功能损伤情况:与MCAO组相比,第1-3天20μg/kg PTx+MCAO组小鼠改良的神经功能缺损评分明显增高（*P<0.05）,转棒疲劳实验小鼠停留的时间明显减少（*P<0.05）。与ICH组相比,20μg/kg PTx+ICH组小鼠改良的神经功能缺损评分明显增高（*P<0.05）,转棒疲劳实验的时间明显减少（*P<0.05）。（2）各组小鼠中枢免疫细胞浸润分布:与Sham组相比,MCAO组与ICH组小鼠脑内小胶质细胞、中性粒细胞、自然杀伤细胞、B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞显着增多（*P<0.05）。分别与MCAO组、ICH组相比,20μg/kg PTx+MCAO组、20μg/kg PTx+ICH组小鼠中枢内B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞明显增多（*P<0.05）。此外,分别与MCAO、20μg/kg PTx+MCAO组相比,ICH、20μg/kg PTx+ICH组小鼠中枢内中性粒细胞、自然杀伤细胞、B细胞、CD8+T细胞明显减少（*P<0.05）。（3）各组小鼠脑氧化应激对比:与Sham组相比,MCAO组、ICH组第3天的活性氧产生显着增多,氧化应激水平显着增高（*P<0.05）。20μg/kg PTx+MCAO组、20μg/kg PTx+ICH组的氧化应激水平较未处理组明显增高（*P<0.05）。（4）各组小鼠血脑屏障染色:与Sham组相比,MCAO组、ICH组第3天的紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5表达显着减少。分别与MCAO组、ICH组相比,20μg/kgPTx+MCAO组、20μg/kg PTx+ICH组的紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5表达进一步减少。第二部分:（1）与Sham组相比,MCAO组野生型C57BL/6小鼠脑内ILC2计数明显增多（**P<0.01）,脾与外周血中ILC2计数明显减少（*P<0.05）,提示脑缺血后ILC2向中枢浸润增多。（2）为研究ILC2是否影响脑卒中病理进程,我们利用抗CD90.2单抗删除ILC2及将ILC2转输至Rag2-/-γc-/-小鼠（无T、B、NK细胞）体内,经核磁影像与神经功能评分阐述ILC2对脑卒中预后的影响。实验发现,在脑缺血再灌注后第1-3天,抗CD90.2抗体删除ILC2显着增加小鼠脑梗死体积和神经功能缺失（*P<0.05）。而通过将ILC2转输至Rag2-/-γc-/-小鼠可有效降低脑梗死体积和神经功能缺失（*P<0.05）。上述结果表明ILC2对缺血性脑卒中具有保护作用。（3）继而,我们利用病理切片染色发现,少突胶质细胞是表达IL-33的主要细胞,且在脑缺血再灌注后表达显着上调（*P<0.05）。推测胶质细胞来源的IL-33可能是维持脑部ILC2细胞存活与活化的主要细胞。缺血性脑卒中小鼠体内给予IL-33能够扩增ILC2数量,减小脑梗死体积和神经功能缺失（*P<0.05）。结论:第一部分:PTx引起的系统炎症反应可进一步加重小鼠脑卒中后神经功能损伤程度体现为:中枢内小胶质细胞活化,髓系与淋巴细胞的浸润增多;PTx引起的免疫炎症过程可能与B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞在中枢内浸润增高有关,而与小胶质细胞、中性粒细胞、自然杀伤细胞的中枢浸润关系不密切。相比ICH模型,MCAO模型以中性粒细胞、自然杀伤细胞、B细胞、CD8+T细胞的中枢浸润为主,提示天然免疫可能主要参与了脑缺血急性期损伤加重。PTx对小鼠脑内活性氧的产生及其氧化应激水平有进一步放大作用。PTx诱发的炎症反应下调脑卒中后第3天血脑屏障的紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5的表达,使其破坏加重,进一步扩大脑内免疫炎症反应水平。第二部分:MCAO小鼠脑内有大量的ILC2浸润,而外周ILC2显着减少,提示外周ILC2可能在脑缺血后迁移至脑损伤部位。通过删除或转输ILC2的相关实验提示ILC2可减轻脑缺血再灌注小鼠神经功能损伤和病灶体积,证明ILC2对缺血性脑卒中发挥保护作用。IL-33可在体内扩增ILC2,表明脑内胶质细胞来源的IL-33可能是维持ILC2细胞活化的关键分子。ILC2减小梗死体积、帮助神经功能的修复可能是通过其上游的IL-33调节作用完成,其中少突胶质细胞可能是IL-33的主要来源。
凌文远[5]（2020）在《化学遗传学靶向激活运动皮层谷氨酸能神经元对脑出血小鼠运动和认知功能的影响及机制研究》文中认为全球每年大约有200万人罹患自发性脑内出血（spontaneous cerebral hemorrhage,ICH）,具有死亡率和致残率高的特点,并且目前治疗措施效果不佳。因此,寻找脑出血治疗的新策略和新靶点具有重要的科学意义和临床价值。所谓化学遗传学技术（designer receptors exclusively activated by designer drugs,DREADDs）,是利用遗传学方法,利用化学小分子作为工具解决生物的问题,或者通过干扰、调控正常生理过程,以达到了解蛋白质功能,是利用化学工具进行探索和研究生命过程的一门新兴学科。相关研究表明,刺激大脑皮层可能会促进脑卒中的康复,但是相关的机制目前尚不明确,在本文中,我们将利用腺相关病毒转染使小鼠运动皮层表达hM3D（Gq）,并结合腹腔注射氯氮平-N-氧化物（CNO）,进而特异性激活运动皮层中的谷氨酸能神经元,探讨运动皮层的谷氨酸能神经元在脑出血小鼠的恢复过程中的作用及可能机制。本论文开展的研究如下:首先,本文将能够靶向谷氨酸能神经元的腺相关病毒载体,利用立体定向技术构建化学遗传学小鼠动物模型。饲养3周待病毒载体稳定表达后,给予氯氮平-N-氧化物（CNO）腹腔注射以实现对动物皮层谷氨酸能神经元活性的调节。选取部分模型动物灌注、取材进行免疫荧光检测,验证化学遗传学病毒载体的神经元表达情况,并通过免疫组化技术检测模型动物中标识细胞激活的即早基因c-Fos基因的表达情况,以验证谷氨酸能神经元的化学遗传学激活。随后通过尾动脉血纹状体立体定向注射构建小鼠脑出血动物模型,并对模型的稳定性和成功率进行评估。表明大脑皮层靶向注射腺相关病毒包装的hM3Dq-mCherry工具联合腹腔注射氯氮平-N-氧化物能够化学遗传学激活皮层谷氨酸能神经元;同时,本研究通过自体尾动脉血定向纹状体注射建立的小鼠脑出血模型具有模型成功率高、小鼠存活率高、血肿体积相对固定、组内差异小的特点,能够良好地用于开展脑出血相关研究。进一步,对于化学遗传技术激活皮层谷氨酸能神经元脑出血小鼠,我们通过Longa神经缺失量表评估小鼠神经功能,利用Grip tese、悬吊实验和Rotating beam实验评估小鼠运动感觉功能的恢复情况。并利用Morris水迷宫实验评估小鼠认知功能的恢复情况。实验表明化学遗传学技术激活运动皮层谷氨酸能神经元可促进脑出血后整体神经状态、运动感觉功能、协调性和运动耐力的恢复,并促进脑出血导致的小鼠空间学习和记忆功能损害的恢复。为了更深入探讨化学遗传学技术激活皮层谷氨酸能神经元改善脑出血小鼠运动和认知功能,本文通过检测线粒体功能和海马齿状回（DG区）细胞增殖情况探讨谷氨酸能神经元激活改善神经功能恢复的内在机制。首先,制备模型动物的神经元单细胞悬液,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位、ELISA方法检测线粒体ATP水平和DNA氧化损伤生物标记物8-羟基脱氧尿苷（8-OHdG）的含量,揭示皮层谷氨酸能神经元对线粒体功能的影响;然后,通过5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记,免疫组织化学法,检测海马齿状回（DG）区细胞增殖情况,明确皮层谷氨酸能神经元的激活促进脑出血小鼠认知功能内在机制。实验结果表明运动皮层谷氨酸能神经元激活可以改善线粒体膜电位,提高ATP水平,缓解DNA氧化损伤,改善线粒体功能,会促进小鼠脑出血后功能恢复;针对海马齿状回新生神经元的5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记进行检测,发现海马DG区BrdU+神经元数明显升高,表明皮层谷氨酸能神经元激活后该区神经元增殖能力增强,促进脑出血后小鼠认知功能的恢复。综上所述,本文利用化学遗传学技术靶向激活运动皮层谷氨酸能神经元,通过其突触联系和纤维投射,明显促进脑出血后神经元的线粒体功能改善和海马DG区细胞增殖,有利于运动和认知功能障碍的改善。本研究揭示了运动皮层的谷氨酸能神经元激活可能是潜在的对脑出血后神经功能障碍进行靶向干预的新途径,并为药物研发及临床精准治疗脑出血导致的血肿灶周白质损伤导致的运动、感觉及认知功能障碍提供新的手段或策略。第一部分 构建hM3Dq-mCherry稳定表达的小鼠运动皮层谷氨酸能神经元激活动物模型及其生物学特征验证1.目的:构建化学遗传学技术激活运动皮层谷氨酸能神经元的动物模型,进行腺相关病毒转染并激活神经元的生物学验证。2.方法（1）本部分实验,将动物分为以下四组:Sham（假手术）组、hM3Dq组（pAAV2/9-CaMKⅡ α-hM3Dq-mCherry+ICH 模型）、mCherry 组（pAAV2/9-CaMKⅡ α-mCherry+ICH模型）和ICH组（脑出血模型对照组）。在ICH小鼠模型构建3周前,利用脑立体定向注射技术按照不同分组向小鼠右侧运动皮层M1 区两个靶点注射实验真病毒pAAV2/9-CaMKⅡ α-hM3Dq-mCherry（hM3Dq 组）和对照假病毒pAAV2/9-CaMKⅡ α-mCherry（mCherry 组）。共 220 只成年小鼠称取体重随机分组,每组55只动物,另外取30只乳鼠（出生15-17天）按不同分组分别注射 pAAV2/9-CaMKⅡ α-hM3Dq-mCherry、溶剂 Vehicle 和pAAV2/9-CaMKⅡ α-mCherry用于运动皮层化学遗传学转染的鉴定。病毒注射后3周建立ICH小鼠模型,并在建模后7天开始腹腔注射CNO（7 p.m.）,连续注射21天。（2）在AAV病毒注射3周后,将乳鼠主动脉灌注,收集乳鼠脑组织制作脑片,利用荧光显微镜观察乳鼠大脑运动皮层mCherry的荧光表达,利用免疫荧光染色检测CaMKⅡα 阳性谷氨酸能神经元的病毒表达情况。（3）待乳鼠给予连续腹腔注射CNO后1周,升主动脉灌注、取材,免疫组化检测乳鼠大脑运动皮层c-Fos的表达,以验证运动皮层谷氨酸能神经元的化学遗传学激活情况。3.结果（1）病毒表达情况:病毒注射3周后,荧光显微镜激光激发后显示,运动皮层M1区出现红色荧光,表明工具病毒在运动皮层表达。DAPI细胞核染色结果显示运动皮层M1区谷氨酸能神经元细胞中同时DAPI和mCherry 荧光蛋白,表明 pAAV2/9-CaMKⅡα-hM3Dq-mCherry 转染了谷氨酸能神经元,并稳定表达。（2）即早基因c-Fos的免疫组化检测:CNO腹腔注射1周后,灌注、取材,针对表达hM3Dq-mCherry神经元的代表性组织切片的免疫组化显示c-Fos在联合CNO应用之后出现明显的阳性表达水平升高,说明CNO能够化学调整谷氨酸能神经元活性,并引起谷氨酸能神经元兴奋性升高。4.结论:脑立体定位注射腺相关病毒包装的化学遗传学工具pAAV2/9-CaMKⅡα-hM3D（Gq）-mCherry 和 pAAV2/9-CaMKⅡα-mCherry 联合腹腔注射CNO能够转染运动皮层谷氨酸能神经元,而且前者能够调控谷氨酸能神经元的兴奋性。第二部分 化学遗传学激活运动皮层谷氨酸能神经元对脑出血小鼠运动和认知功能的影响（一）自体尾动脉血立体定向靶向注射纹状体构建脑出血动物模型1.目的:建立脑出血小鼠动物模型,并对脑出血模型的稳定性、成功率进行评价。2.方法（1）脑立体定向注射技术构建脑出血动物模型:取体重为25-30 g的C57BL/6小鼠（分组如前）。所有小鼠经5%异氟烷诱导麻醉后,气管插管并2-3%异氟烷维持麻醉进行手术。采用尾动脉血立体定向纹状体注射法构建小鼠ICH模型。术前8h禁食,4h禁水,麻醉成功后,俯卧位固定于小动物脑立体定向手术台上（512600,Stoelting,USA）。剃除小鼠颅骨表面毛发,使用碘伏消毒并75%酒精脱碘后,剪开头皮（为促进术后恢复,皮肤切开尽量短）,骨膜用骨膜剥离器剥离,暴露前囟及冠状缝,少量3%双氧水擦拭,剪去残留的受损组织。立体定向仪调整前囟和后囟高度,保证两者处于同一水平面。根据小鼠脑解剖图谱,以前囟为原点,对靶向运动皮层进行定位（AP=0.00 mm,ML=+2.2 mm,DV=-2.5 mm）。定位后,用牙科钻钻孔至脑膜。用恒温电热垫加温鼠尾,使用乙醇消毒即见充血,距尾端2cm处切断鼠尾,微量注射器抽取非抗凝血50uL,将注射器固定于立体定向仪上,通过微量进样泵将注射器中的尾动脉血缓慢注射（15uL/5min匀速注入）,注射结束后留针5min,然后退针2.0mm停针4min,最后将注射器缓慢退出。注射期间酒精棉球包扎鼠尾断端,术后以骨蜡封闭颅骨骨孔,碘伏消毒,无菌缝线缝合头皮涂抹红霉素软膏预防感染。Sham组没有尾动脉立体定向注射纹状体外,手术过程的麻醉方式和手术操作均同于其余组别。（2）动物脑出血模型评价:分别于脑出血模型构建手术处理后2小时和24小时,用Longa评分量表分别评定各实验分组小鼠的神经缺失情况。小鼠体重损失超过20%及神经功能评分同正常对照组存在统计学差异则排除于后续实验。3.结果（1）存活率:手术2小时后sham组小鼠的存活率为100%,hM3Dq组小鼠的存活率为94.55%,ICH模型组小鼠的存活率为98.18%,mCherry组小鼠的存活率为96.36%。手术24小时后Sham组小鼠的存活率为100%,hM3Dq组小鼠的存活率为92.73%,ICH模型组小鼠的存活率为96.36%,mCherry组小鼠的存活率为94.55%。（2）术后2小时开始进行神经缺失评分,ICH组中神经缺失评分为1-3分的小鼠占76%,hM3Dq组神经缺失评分为1-3分的小鼠占77%,mCherry组神经缺失评分为1-3分的小鼠占76%;术后24小时ICH组中神经缺失评分为1-3分的小鼠占66%,hM3Dq组神经缺失评分为1-3分的小鼠占65%,mCherry组神经缺失评分为1-3分的小鼠占63%。结论:通过自体尾动脉血立体定向纹状体注射建立的小鼠脑出血模型具有模型成功率高、小鼠存活率高、血肿体积相对固定、组内差异小的特点,是开展脑出血相关研究的良好模型。（二）评估运动皮层谷氨酸能神经元激活对脑出血小鼠运动和认知功能恢复的影响1.目的:本部分实验将在激活皮层谷氨酸能神经元的基础上构建脑出血模型后,进一步探讨化学遗传学技术刺激运动皮层谷氨酸能神经元对脑出血小鼠运动和认知功能的影响。2.方法:本部分研究实验分组如前。脑出血模型构建实验后1周开始对各个实验分组氯氮平-N-氧化物（CNO,3mg/kg）腹腔连续注射。分别于CNO连续腹腔注射的第7天和第21天时,在末次CNO腹腔注射的6小时内进行运动感觉和认知功能的神经学评估。利用Longa神经缺失量表评估受试小鼠总体神经功能,转棒试验、Grip test和悬吊实验评定小鼠运动功能,使用Morris水迷宫实验评估小鼠的认知功能恢复情况。3.结果（1）神经功能缺损和运动功能的恢复:Longa神经缺失量表评定结果表明hM3Dq、ICH、和mCherry组的神经功能缺损评分高于Sham组,具有显着性差异（P=0.031,P<0.0001,P=0.0002）;ICH组和mCherry组的神经功能缺损评分高于hM3Dq组（P=0.0086,P=0.0228）;ICH组的神经功能缺损评分同mCherry组无显着差异（P>0.05）。转棒试验结果显示,从CNO干预第7天开始,hM3Dq组的运动距离和运动速度均显着高于mCherry组和ICH组（均P＜0.05）,但低于Sham组评分（P＜0.05）（表2.4和图2.5）。悬吊实验显示,hM3Dq组、ICH组和mCherry组的评分显着低于Sham组（P＜0.0001）,ICH组和mCherry组的评分低于hM3Dq组（P＜0.001）,ICH组和mCherry组的评分无显着差异（P＞0.05）。（2）皮层谷氨酸能神经元激活对记忆功能的影响:Morris水迷宫实验结果表明,hM3Dq组逃避潜伏期低于其他模型对照组（P＜0.05）,游泳速度明显快于其他模型对照组（P＜0.05）;在探索试验中,将平台移除,hM3Dq组与ICH和mCherry组小鼠在目标象限中花费的时间有显着性差异（P=0.0123,P=0.0112）,两对照组之间无显着差异（P＞0.05）;对位训练中,hM3Dq组与ICH和mCherry两个对照组比较,小鼠穿越平台位置数量显着增加（P=0.0341,P=0.0177）,对照组之间穿越平台位置数无显着差异（P=0.6433）。4.结论:化学遗传学技术激活运动皮层谷氨酸能神经元可促进脑出血后整体神经状态、运动功能、协调性和耐力的恢复,进而促进脑出血所导致的小鼠空间学习和记忆损害的恢复。第三部分 化学遗传学激活运动皮层谷氨酸能神经元改善脑出血小鼠运动和认知功能恢复的线粒体相关机制研究1.目的:检测化学遗传学技术激活运动皮层谷氨酸能神经元对脑出血小鼠线粒体功能的影响。2.方法（1）流式细胞仪检测线粒体膜电位:实验动物颈椎脱臼处死,冰盒内后续操作。75%酒精浸泡1-3分钟后置于超净工作台内,无菌取大脑。将模型灶周脑组织用小剪刀剪碎,转移至放离心管,加入0.25%胰-EDTA复合消化液置于37℃孵育箱中消化20-30min,消化期间间断震荡和吹打。用预冷NeurobasalTM神经元专用培养基终止消化,吸管轻柔吹打均匀后,静置,取上清液放400目细胞筛过滤,并收集细胞悬液。收集的上清液用吸管吹打均匀后离心（1000rpm,5min）,弃去上清,反复冲洗1-2次后加预冷NeurobasalTM神经元专用培养基,制成模型小鼠神经元单细胞悬液。然后,细胞计数,调整细胞浓度。植入24孔板中,每组设4个平行样本,加入新鲜配置的TMRM线粒体染色液（30nM）移至细胞培养箱内,37℃避光孵育30min。预冷PBS清洗后流式细胞仪上机检测。取每组lx106个神经元荧光强度值的平均值作为该组测得值。其平均荧光强度（mean fluorescence intensity,MFI）又代表神经元细胞 MMP 水平。TMRM的激发波长为561nm、发射波长为581nm,使用CellQuestpro软件对结果进行分析。（2）线粒体ATP水平检测:将动物颈椎脱臼处死,置于冰盒75%酒精1-3分钟后移至超净工作台,无菌操作取大脑,剪取模型灶周小块重量约为50-100mg的脑组织。将每10mg脑组织在100 uL的ATP Assay缓冲液研磨10次,使用10kDa MWCO超滤离心管去除蛋白。将ATP Assay Kit（Sigma,MAK1901KT）试剂置于冰浴中溶解后,用90mL的水稀释10mL 10mM（10 nmole/mL）的 ATP 标准溶液,生成 1mM（1nmole/mL）的ATP标准溶液。向96孔板中加入0、2、4、6、8和10 uL的1 mM ATP标准溶液,配置浓度分别为0（空白）、2、4、6、8和10 nmol/1标准溶液;加入ATP Assay缓冲液,使每孔体积达到50uL。按照产品说明书将ATP Assay 缓冲液、ATP Probe、ATP Converter、Developer Mix 按照固定比例配置反应混合物,96孔板中上样,每孔50uL。在Sample Blank中省略ATP Converter,以校正样品中的背景。为确保读数在标准曲线的线性范围内,每样品上样3个复孔。将50 uL的适当反应混合物添加到每个孔中。用水平振动筛或移液管充分搅拌。在室温下孵育30分钟后在570nm（A570）测量吸光度。制备标准曲线,其中纵坐标代表RLU值,横坐标代表ATP浓度。（3）线粒体DNA氧化产物8-羟基脱氧鸟苷酸（8-OHdG）检测:将动物颈椎脱臼处死,冰盒内用75%酒精浸泡1-3分钟后置于超净工作台,无菌操作取大脑,剪取模型侧重量约为50-100mg的脑组织液氮速冻。以每克组织加入5mL匀浆缓冲液配比（0.1 M PBS,pH值7.4,含1 m M EDTA）使用超声波仪均质样品,在1000 x g下离心10 min,并使用DNA提取试剂盒（abcam,KIT0103）纯化上清液,核酸酶P1（Sigma-Aldrich,N8630-1VL）消化 DNA,1 M Tris 调整 pH 值到 7.5-8.5,每 100μg DNA加入1单位碱性磷酸酶（Sigma,P7640）,37℃孵育30 min,煮10 min,置于冰上备用。将8-OHdG ELISA试剂盒（Abcam,ab201734）复温至室温（20-25℃）,使用超纯水将Wash Buffer（1:10）和8-羟基-2-脱氧鸟苷:HRP结合单克隆抗体（1:100）的储存液稀释,制备工作液。按照ELISA指南配置标准液至终浓度为0（空白）、0.94、1.875、3.75、7.5、15、30、60 ng/mL,然后使用多通道移液器将标准液和样品液各50uL加入96孔板,并加入50uL 8-OHdG准备液（空白孔除外）,向空白孔中加入标准/样品稀释液和抗体稀释液各50uL（各孔总容积为100uL）,混匀后盖上96孔板并室温孵育1小时。使用1X洗涤缓冲液300uL充分洗涤96孔板共4次,再向每孔中加入100uL TMB底物并盖上第2个孔板盖,孵育30min后加入终止缓冲液100uL,酶标仪450nm波长读取吸光度值。制备标准曲线后计算获得各实验组8-OHdG数值,进行统计学数据分析。3.结果（1）皮层谷氨酸能神经元激活改善线粒体膜电位:流式细胞仪的荧光图谱显示脑出血（ICH）组比假手术组（Sham）荧光强度大的神经元细胞比率减少,说明脑出血损伤致线粒体膜电位下降（P＜0.0001）;hM3Dq组的荧光强度大的神经元细胞比率高于ICH组（P＜0.0005）;mCherry组荧光强度大的细胞比率同ICH组比较无显着差异（P＞0.05）。说明运动皮层谷氨酸能神经元激活减轻了脑出血对线粒体膜电位的损伤程度。（2）皮层谷氨酸能神经元激活上调细胞ATP水平:研究发现,化学遗传学技术兴奋运动皮层谷氨酸能神经元后,与Sham组相比,ICH组脑内血肿周边组织内ATP含量明显降低（P＜0.0001）,表明脑出血损伤了细胞ATP生成。同时,hM3Dq组同ICH组和mCherry组相比,具有显着差异（P＜0.0001）。该结果明确提示,化学遗传学技术兴奋谷氨酸能神经元可上调细胞内ATP水平,提示谷氨酸能神经元兴奋与能量生成存在偶联。（3）谷氨酸能神经元激活抑制DNA氧化损伤:本研究表明,ICH组脑组织内8-OHdG含量明显高于Sham假手术组,并且具有显着性差异（P=0.0012）,表明脑出血后氧化损伤明显增加,导致其中氧化损伤产物8-OH-dG升高;hM3Dq组的脑组织8-OHdG含量明显低于ICH组,并且具有显着性差异（P=0.0032）,表明运动皮层谷氨酸能神经元激活后,脑出血导致的氧化损伤得到明显的改善,其氧化损伤的产物8-OHdG下降;mCherry组中受试动物脑组织的8-OHdG含量同ICH组比较,无显着差异（P>0.05）。以上结果表明表明激活运动皮层谷氨酸能神经元,脑出血后自由基生成减少,减轻了 DNA氧化损伤。4.结论线粒体作为细胞的“能量工厂”,为细胞生物活动提供了绝大部分的ATP能量来源。而线粒体的正常功能又直接依赖着线粒体膜电位水平的正常。在细胞活力正常的情况下,线粒体膜电位处于正常高位,能够很好地为细胞提供各种生理活动所必需的能量。在细胞趋近于凋亡时最明显的特点就是往往伴随着线粒体膜电位的降低,线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的标志性事件之一。通过我们得到的关于脑出血后病灶周围组织在运动皮层谷氨酸能神经元不同兴奋性条件下ATP水平、线粒体膜电位、DNA氧化损伤产物8-OHdG等指标的变化趋势,我们可以确定大脑运动皮质谷氨酸能神经元激活具有维护线粒体正常功能的趋势,从而改善脑出血后小鼠的运动和认知功能。第四部分 化学遗传学激活运动皮层谷氨酸能神经元改善脑出血小鼠运动和认知功能恢复的海马DG区细胞增殖相关机制研究1.目的:揭示化学遗传学技术激活运动皮层谷氨酸能神经元促进脑出血小鼠认知功能改善的海马齿状回细胞增殖相关机制。2.方法海马齿状回（DG区）细胞增殖检测:实验各组小鼠腹腔注射CNO 21天后给予BrdU溶液（给药剂量为50mg/kg）腹腔注射,每天给药2次,给药间隔12小时,连续给药2天。在给药7d后采用氯胺酮和二甲苯嗪腹腔注射麻醉（氯胺酮100mg/kg,二甲苯嗪25mg/kg）,待角膜反射和肌张力消失后,给予4℃预冷4%多聚甲醛溶液（50mL 0.9%生理盐水预冲洗,然后250mL 4%多聚甲醛前固定,先快后慢）经左心室升主动脉灌注固定脑组织,冰盒内完整取出小鼠脑,保留海马部位,震动切片机上连续冠状切片,脑片厚度为40μm,每切5张选取1张,每个样本共收集12张,置于PBS待行BrdU免疫组化检测。将切片置于50%甲酰胺溶液中65℃水浴 2h,PBS（PH=7.4）洗片,2M 盐酸中 37℃孵育 30min,0.1M硼酸洗片10 min,PBS洗片后用30%H2O2室温孵育半小时,PBS洗片,血清封闭后室温孵育60min,弃血清洗片后加入BrdU一抗（1:1000）,4℃孵育24h,弃一抗并PBS洗片,加入生物素标记二抗（稀释度为1:100）,室温孵育30min,PBS洗片后再以ABC试剂室温孵育半小时,PBS洗片后DAB试剂显色,待染色满意后用ddH2O漂洗切片终止染色。将染好的切片平展贴于载玻片,晾干后中性树胶封片,指甲油固定。3.结果研究表明,ICH组脑出血后的海马DG区BrdU+细胞数低于Sham组,差异具有统计学意义（P＜0.05）,表明脑出血损伤了海马DG区的细胞增殖能力;hM3Dq组海马DG区BrdU+细胞数明显高于ICH组,并且具有显着性差异（P＜0.01）,表明运动皮层谷氨酸能神经元的激活,促进了海马DG区神经元的细胞增殖能力;ICH组同mCherry组比较,BrdU+细胞数量的差异没有统计学意义（P＞0.05）。通过以上结果,可以认为运动皮层M1区谷氨酸能神经元激活,可能促进了海马DG区细胞的增殖能力。4.结论通过化学遗传学方法激活运动皮层谷氨酸能神经元总体上促进了海马DG区神经元的细胞增殖能力,从而促进了脑出血小鼠的认知功能的改善。
郑永特[6]（2020）在《多通道闭环电刺激系统研发及在大鼠颞叶癫痫中的应用》文中研究说明癫痫是十分常见的神经系统疾病,其中难治性癫痫仍然难以通过药物或手术得到有效控制。以电刺激为手段的神经调控技术已经在治疗帕金森、癫痫等神经系统疾病中取得了引人瞩目的成果,而近年来新兴的闭环电刺激通过对大脑状态的实时检测而决定释放反馈电刺激的时间,有望提高电刺激的治疗效果,因此日益受到研究人员和临床医生的关注。但闭环电刺激在治疗难治性癫痫的研究和应用仍面临以下几个主要问题:如何设计低能耗高性能的闭环刺激系统,保证其植入病人体内能够长期运行,同时满足复杂的闭环电刺激调控功能;如何选择最佳的闭环刺激模式,包括刺激位点和刺激参数,对癫痫病灶区域进行神经网络调控;以及如何设计高能效高性能的癫痫检测算法,保障闭环电刺激的实时性和可靠性,同时满足长期的在线癫痫检测需求。本论文针对上述问题进行了设计和探索,主要研究内容和创新点如下:首先,论文设计开发了一种小型化高性能的多通道闭环电刺激系统,该系统具备多路神经信号检测、实时处理和复杂闭环电刺激控制的功能,能够实现长期不间断的闭环电刺激实验。和传统的商用仪器组成的闭环刺激系统相比,该系统具有成本低、易搭建、性能高且功能可灵活配置等优势。其次,在多通道闭环电刺激系统基础上,论文提出了一种新的多位点联合电刺激抑制难治性癫痫的方法,在急性癫痫大鼠模型上应用闭环刺激系统进行多位点电刺激,对其癫痫发作时长和发作次数进行了定量的分析,并探讨了多位点电刺激抑制癫痫发作和传播的潜在作用机制。第三,论文针对慢性难治性癫痫的发作具有多样性、所需治疗周期长等特点,提出了一种新的高能效高性能的两级级联的癫痫检测算法。该算法权衡了机器学习算法的高检测性能以及植入式系统的低功耗需求,成功移植到了多通道闭环刺激系统中,并在慢性癫痫大鼠模型上得到了长期在线检测的验证。总之,论文的初步研究成果在闭环电刺激抑制难治性癫痫方面具有较高的临床研究意义,同时也为植入式闭环电刺激系统的设计和应用提供了指导和参考。
赵渊[7]（2020）在《微波热声成像技术及其在脑疾病检测中的应用研究》文中指出大脑是生物体内结构和功能最为复杂的组织,由于缺乏理想的技术和成像工具,目前人们对大脑的认识还非常有限。自从2013年美国决定实施“脑计划”以来,欧盟、日本、澳大利亚、韩国和中国等国也相继发布了各自的脑研究计划。脑计划的目标之一就是开发新型脑成像技术、方法和工具,为科学家提供更多的大脑结构和功能信息。微波热声成像技术结合了微波成像高穿透深度和超声成像高空间和时间分辨率的优点,具有非电离、非侵入式和实时对活体全脑组织进行高分辨率成像的潜力。微波热声成像以组织的比吸收率差异作为内生对比度来源。当生物组织体内的电场能量分布均匀时,微波热声成像技术有望作为一种新的高空间和时间分辨率活体脑成像工具,提供脑组织的电导率信息。脑组织的电导率与脑组织的病理和生理特性息息相关,因此微波热声成像可以帮助科学家从脑组织电特性的角度探索大脑的工作机制和脑疾病的发病原理。然而,至今还没有成功实现活体热声脑成像的文献报道。在进行人类临床研究前,有必要先利用实验动物验证活体热声脑成像的可行性。因为啮齿类动物是研究人类神经和疾病生理机制中使用最为广泛的动物,具有非常多的脑疾病模型可供研究选择。所以本文首先以大鼠活体脑成像为目标,提出了新的热声脑成像技术方案,避免了薄膜和耦合剂对微波的散射作用。其次,本文使用去离子水替代变压器油作为耦合介质,提高了微波到达脑组织的能量比例。最后,本文设计并搭建了2套新的热声成像系统,首次实现了冠状位和横断位活体大鼠脑结构的高分辨率热声成像,证明了利用热声成像技术进行活体脑成像的可行性。同时,通过动物疾病模型展示了基于热声成像技术检测新生儿脑出血和高强度聚焦超声（HIFU）热损伤的潜力。除设计新型微波热声成像系统和进行脑科学相关实验研究外,作者还提出了一种新的热声、超声双模态成像技术和一种新的针尖高对比度可视化方法,推动了微波热声成像的技术进步,并拓展了微波热声成像的应用领域。论文创新点归纳如下:1.搭建了2套微波热声成像系统。本文以实现活体大鼠脑成像为目标,设计并搭建了一套1GHz热声成像系统和一套3.05GHz热声成像系统。其中包含微波发射系统、超声耦合系统和密封型大小鼠呼吸面罩等方面的创新。2.将系统用于热声脑科学研究。提出组织相对介电常数差异也能够为热声成像提供对比度;然后通过逼真大鼠头部仿体实验研究了大鼠颅骨对热声成像的影响;首次实现了冠状位和横断位活体大鼠脑结构的高分辨率热声成像;并通过动物实验证明了热声非电离、非侵入式检测婴儿脑出血和监测HIFU热损伤的潜力。3.提出了一种利用微波脉冲同时激励样品和超声换能器实现热声、超声双模态成像的新方法,该方法不需要提供任何超声发射电路就可以实现热声、超声双模态成像。4.提出基于电磁感应原理和热声效应对组织内的针具进行高对比度、高分辨率成像的新方法,该方法弥补了现有临床医学中基于CT和超声进行针具导引成像中的不足。本文完成了2套全新的微波热声实验系统搭建,并在此基础上首次证明了基于微波热声成像技术对大鼠脑组织解剖结构进行高分辨率成像的可行性。并通过活体脑出血检测和HIFU热损伤监测实验证明展示了该技术在活体脑成像研究中的潜在价值。此外,本文提出的双模态成像技术和针尖高对比度可视化方法拓展了热声技术的应用领域。
杨梅华[8]（2019）在《FCD相关难治性癫痫候选致病基因筛选及功能初探》文中提出癫痫是一种多因素、多病因相关的复杂慢性疾病症候群,主要表现为大脑皮层神经元异常超同步化放电导致中枢神经系统短暂功能障碍,也是目前危害极大的常见神经疾病之一。经一线抗癫痫药物治疗后,大多数患者可达到临床缓解或控制的效果,但仍有约30%左右的癫痫患者会转变为药物难治性癫痫（Drug-Resistant Epilepsy,DRE）,表现为较差的预后。DRE无可控的药物,但可以通过系统的术前评估,找到确切痫灶,绝大部分患者能从手术获益,其核心是致痫灶定位,成为手术治疗最为关键的因素。颅内电极脑电图（intracranial electroencephalography,iEEG）是癫痫致痫灶评估的重要手段,尤其是对经过头皮EEG及其它无创性评估手段仍不能确切定位的癫痫患者[1]。以FCD等微小结构病变或MRI阴性患者受益更多。颅内电极可分为硬膜外电极、硬膜下皮层电极（包括条状和栅状电极）和深部电极,但他们的安全性、出血率及定位情况鲜有系统的研究和报道,这涉及到致痫灶的定位、切除范围及获得痫灶核心切除标本更准确的病理结果,对临床疗效及科学研究均起到至关重要的作用,对阐明难治性癫痫发生的病理及相关分子机制研究也起到积极的推动作用。临床研究显示,皮质发育障碍（Malformations of Cortical Dysplasia,MCD）是难治性癫痫最重要病因,占难治性癫痫手术治疗的37.6%57.6%,在成人难治性癫痫病因中排第二或第三位,而在小于3岁的儿童难治性癫痫中MCD更高达80%,排名首位。MCD亚型较多,其中局部皮质发育障碍（Focal Cortical Dysplasia,FCD）是MCD最典型、最常见的临床亚型,其结构表现为同质异构的皮质病灶群,其导致的癫痫表型通常为药物难治,即耐药性癫痫。因MCD致痫机制复杂,涉及因素众多,MCD致痫机制假说众多,如谷氨酸受体假说、GABA受体假说、GABA突触活动起搏器假说、mTOR通路过度活性假说、成熟障碍假说、炎症、免疫致痫机制假说及表观遗传学致痫假说等,但具体机制不清,确切证据不足。因此,有效阐明FCD的病理发生及相关癫痫发生的分子学机制,对难治性癫痫的诊断与治疗具有重要的临床意义。精准医学的异军突起,使得从遗传学角度寻找MCD候选致病基因,成为当前临床研究的热点与关注焦点。目前报道癫痫相关致病基因研究主要从MCD入手,至今已发现超过100余种基因突变与MCD相关,由于MCD类型复杂且病例数量限制,进展不理想,FCD候选致病基因探索不多。目前,除已明确TSC1或TSC2基因是MCD亚型-结节性硬化症（Tuberous Sclerosis Complex,TSC）的候选致病基因外,其他类型FCD尚未找到确切相关候选突变基因。因此,深入探索FCD相关候选致病基因,并进一步探索下游基因功能与癫痫表型的关系,不仅有助于了解FCD相关致病基因功能,而且还有助于明晰临床对FCD病理发生及致痫机制的理解与认识。全外显子测序（Whole exome sequencing,WES）是基于下一代测序（Next-generation sequencing,NGS）的新兴高通量测序技术之一,通过基因组外显子区域特异性捕获方法,可最大程度及深度覆盖靶基因编码区。WES较昂贵的全基因组测序（Whole genome sequencing,WGS）不仅具有较高的性价比,还可精确快速检测新生（de novo）突变。目前,WES已广泛应用于多种复杂神经系统疾病检测,且能够较准确鉴别分析罕见单基因癫痫以及儿童发育性癫痫性脑病的新基因。因此,本课题拟分四部分进行。首先,本研究从FCD等相关难治性癫痫术前EEG评估入手,对比两种电极定位痫灶的方法,为获得更佳的术后疗效及更典型的病理标本奠定基础。其次通过手术切除标本,选取MCD最典型的FCDII病理类型,通过WES技术对FCD II相关药物DRE样本进行检测,结合生物信息学分析与文献回顾,初步筛选出FCD潜在的相关候选基因;第三,通过扩大检测样本量,对初筛选定的FCD候选基因进一步大样本WES验证,分析该候选基因在正常样本、FCD和其他病因组的突变率,明确其与临床手术预后的关系;第四,通过建立海人酸（KA）诱导急性癫痫小鼠动物模型,明确急性癫痫发作状态下小鼠脑皮质组织中该候选基因表达水平以及组织细胞定位关系;最后选取候选基因敲除小鼠结合KA诱导方法,进一步分析该基因缺失对KA诱导癫痫发作的潜在影响。相关结果如下:一、FCD等DRE患者EEG术前评估初探该部分研究入组包含FCD病例等DRE患者100例（SEEG 48例,subdural EEG 52例）,并进行痫灶定位及术后并发症比较分析。结果显示,两组定位率与硬膜下皮层电极比较,SEEG具有更少的并发症,尤其是出血和感染。SEEG技术已取得明显进展,在癫痫致痫灶评估上有更好的应用前景。二、基于WES技术分析FCDII相关癫痫基因突变1.选取18例FCDII型（FCD IIa 9例+FCD IIb 9例）进行WES检测与生物信息学分析,结果发现FCD IIa及FCD IIb两组独立或共交集62个位点I-III级突变,突变主要涉及mTOR通道及发育、炎症与肿瘤及代谢类;2.通过SNP质谱分型技术,我们从3例FCD II患者（2例FCD IIa与1例FCD IIb）的外周血及脑标本筛查出SCARB1、PMS1及LTBP1基因有可疑致病突变位点;通过一代Sanger测序验证,在2例FCD IIa一代直系亲属发现了与先证者相同的杂合突变,另外1例母亲野生型（父亲已故,无从查证）,SCARB1 c.1401G>A、PMS1c.A55T>A及LTBP1 c.A3248G>A为可疑致病突变,其突变意义不明;3.通过文献回顾分析,我们发现SCARB1基因参与体内胆固醇转运与代谢,并与阿尔茨海默病、癫痫等许多中枢神经系统疾病密切相关,提示SCARB1很可能参与FCD type II相关癫痫疾病发生发展过程。因此,我们将聚焦SCARB1基因进行进一步样本验证与功能分析。三、FCD等病因相关难治性癫痫扩大样本（WES）分析,聚焦SCARB1基因;基于前部分基础,本部分将继续扩大DRE样本量进行WES验证,并按病因分成FCD组（n=26）、TSC组（n=8）、MRI阴性组（n=27）及脑软化/萎缩/肿瘤等后天获得性病因组（n=14）,以正常组为对照（数据库分析）,聚焦SCARB1基因,分析当前已知致病基因突变情况及未知基因SCARB1基因突变率,并初步明确DRE患者外科干预预后与基因突变的关系,结果发现:1.76例DRE样本中,检出35例（46%）非SCARB1其他基因致病突变;未检出致病突变41例（54%）,其中各病因组的阳性致病突变率分别为TSC 100%（8/8）,MRI阴性组55.6%（15/27）,FCD组30.7%（8/26）,脑软化/萎缩/肿瘤等后天获得性病因组7.1%（1/14）,提示除TSC外,MRI阴性及FCD相关DRE亦有较高的基因突变;2.76例DRE样本中,共7例患者检测出移码突变、剪切点变异及非同义突变等SCARB1基因I-III级变异,其中5例在FCD组（71.4%）,2例在MRI阴性的DRE（28.6%）,TSC组、脑软化/萎缩/肿瘤等后天获得性病因组等其他组未见突变;提示,SCARB1突变与难治性癫痫可能相关,尤其和FCD相关DRE密切;3.200例正常对照样本SCARB1突变III级变异率为8.5%（17/200）,无I级与II级变异（0）;76例DRE样本SCARB1突变III级变异率为9.2%（7/76）,II级变异率为1.3%（1/76）、无I级变异（0）;26例FCD样本SCARB1突变III级变异率为19.2%（5/26）,II级为3.85%（1/26）,无I级变异（0）。统计分析表明:SCARB1基因III级突变率各组间无显着差异（P>0.05）;SCARB1 II级突变,DRE与正常组间无显着差异;DRE无致病突变组与正常对照组间差异显着（P<0.05）;FCD组与正常对照组间差异显着（P<0.01）,进一步提示SCARB1基因突变与FCD相关DRE密切相关;4.DRE患者手术预后与基因突变关系分析发现,共29例DRE接受手术治疗患者,术后有效率（Engel’s I-III级）为96.6%,优良率（Engel’s I-II级）79.3%。FCD合并致病基因突变组和FCD无致病基因突变组,获得I级分别是50%（3/6）和62%（8/13）,两组之间无统计学差异（P>0.05）,FCD合并SCARB1阳性突变的3例术后患者均无I级疗效获得者,两组之间有统计学差异（P<0.05）;5.在筛除掉SCN1A,KCNQ2等离子通道等手术负性因子,FCD伴有的NMDA受体相关类GRIN2A及T型钙通道相关的CACNA1H突变仍然可作为优秀手术治疗候选者,但SCARB1除外;以上结果表明SCARB1突变与DRE相关,尤其与FCD相关DRE关系密切。但在癫痫发生作用如何,需采用动物模型研究进一步证实。四、基于癫痫动物模型探讨SCARB1基因与癫痫发生的关系本部分研究基于急性癫痫诱导小鼠模型,深入探讨SCARB1基因与癫痫发生的关系。首先,通过建立急性癫痫诱导小鼠模型,分析急性癫痫发作状态下小鼠脑皮质组织SCARB1基因表达与组织细胞定位;其次,利用SCARB1-/-基因敲除小鼠结合癫痫诱导技术,初步分析SCARB1缺失对KA诱导癫痫发作的潜在影响与作用。结果发现:1.采用海人酸（KA）诱导方法建立急性癫痫诱导小鼠模型;Western Blot检测发现急性癫痫发作状态下,小鼠脑皮质组织中SCARB1蛋白表达明显上调;免疫组织化学与免疫荧光结果显示,SCARB1蛋白主要高表达于脑皮质组织神经元细胞膜表面;2.本部分采用SCARB1-/-基因敲除小鼠结合KA诱导急性癫痫发作方法,我们发现SCARB1敲除明显缩短KA诱导癫痫发作的潜伏期,显着延长发作及放电的持续时间,表明SCARB1敲除能明显增加癫痫神经元兴奋性,进而增强KA诱导小鼠急性癫痫发作,进一步提示SCARB1可能对癫痫发作起保护作用。综上所述,本研究结果表明:1.经FCD等DRE病因EEG术前评估发现,SEEG和subdural EEG各具优势,但SEEG具有更少的出血和感染风险,有更好的应用前景。2.在FCD患者病灶中,存在大量潜在致病基因突变,主要涉及mTOR通道及发育、炎症与肿瘤及代谢等类型,其中SCARB1、LTBP1及PMS1等基因突变可能参与到FCD相关DRE病理形成与痫样发作。结合文献关于SCARB1基因参与体内胆固醇转运与代谢,并与阿尔茨海默病、癫痫等许多神经系统疾病密切相关的分析,推测SCARB1很可能是FCD相关癫痫发生发展的候选致病基因之一;3.聚焦SCARB1基因,在多病因相关的较大样本DRE尤其是FCD病灶组中,检测出较高的SCARB1基因移码、剪切点变异及非同义突变等I-III级变异,且FCD合并SCARB1阳性突变患者外科术后预后不佳,以上研究提示SCARB1突变涉及神经系统代谢及癫痫发生重要过程,可能是FCD相关DRE病理发生的一种重要候选致病基因;4.动物模型研究发现,SCARB1在KA诱导癫痫小鼠皮质组织高表达,且主要定位于神经元细胞膜表面。SCARB1敲除可明显缩短KA诱导发作的潜伏期,显着延长发作及放电的持续时间,进而增加癫痫小鼠神经元兴奋性,提高癫痫发作敏感性。此结果显示SCARB1可能具有抗癫痫作用,为癫痫治疗提供了新靶点;综合以上结果,我们推断:SCARB1基因突变使致SCARB1功能失活,导致癫痫患者的神经元兴奋性增加,进而提高癫痫发作的敏感性;同时提示,作为一个FCD相关癫痫候选致病基因,SCARB1在FCD疾病的病理形成及癫痫发作起到重要的作用,并可能作为FCD相关癫痫治疗的潜在靶点。
吴琼[9]（2019）在《定痫汤加减联合丙戊酸钠治疗缺血性卒中后癫痫痰瘀阻络型及对hs-CRP影响的临床研究》文中认为目的:观察定痫汤加减联合丙戊酸钠治疗缺血性卒中后癫痫痰瘀阻络型的临床疗效和安全性,以及对血清hs-CRP（hypersensitive C-reative protein,hs-CRP）影响。方法:采用随机对照的临床研究方案,选取广西中医药大学第一附属医院脑病一区,2018年03月至2019年03月符合纳入标准的门诊及住院缺血性卒中后癫痫痰瘀阻络型患者共67例。予随机数字表法分为治疗组33例和对照组34例。对照组予丙戊酸钠抗癫痫治疗,治疗组予定痫汤加减联合丙戊酸钠抗癫痫治疗。所有入组患者治疗前后观察及记录发作频次、发作时间、中医证候积分、癫痫患者生活质量量表评分、美国国立卫生研究院卒中量表、血清hs-CRP、脑电图及安全指标和不良反应,评定临床疗效性和安全性。结果:治疗2个月后,治疗组发作控制有效率93%优于对照组83%（P<0.05）;治疗组中医证候积分、癫痫患者生活质量量表评分、美国国立卫生研究院卒中量表评分改善均优于对照组（P<0.05）;治疗组患者血清hs-CRP下降明显高于对照组（P<0.05）;两组不良反应发生无明显差别（P>0.05）。结论:定痫汤加减联合丙戊酸钠治疗缺血性卒中后癫痫痰瘀阻络型临床疗效显着,安全可靠,促进神经功能恢复,改善癫痫患者生活质量,降低缺血性卒中后癫痫患者血清hs-CRP水平。
吴丹[10]（2019）在《脑功能和针灸脑图谱光声成像技术》文中提出现代脑成像技术为神经科学的进一步发展提供了坚实的可视化基础。目前基于脑功能和结构测绘影像的工具主要分为宏观尺度和微观尺度两种类型。宏观成像技术与微观成像技术探测到的脑世界信息有必要进行有效的整合。光声层析成像技术（PAT）应运而生,这种混合成像方式可以用相同的对比机制轻松地涵盖微观和宏观世界的多尺度信息。该技术已经发展成为神经科学领域最新的研究?法之?。论文中我们发展了?种无创动态光声脑功能可视化解决方案,该方案可以提供在?管尺度的视角下全脑皮层以及深层脉管系统高时间空间分辨率的功能和结构图像。该技术可以用来研究基于血流动力学的脑氧合和脑代谢两方面的功能活动,并且具有高时间分辨率及高空间分辨率等优点。既能对特定的伴随神经活动的脑功能区域进行准确、可靠的定位,又能进行长期反复的动态扫描,实时追踪脑内信号的改变。本论文从光声成像基本理论出发,从克服光的穿透深度以及透过头颅检测光声信号这两大光声脑成像的技术难题着手。设计并搭建了两套PAT脑成像系统,构建了用于脑功能成像的技术平台,开辟了光声脑功能成像应用研究的崭新领域。对新型造影剂的开发、造影剂脑部传递效应、药物响应、出血性脑卒中的监测、缺血性脑卒中的监测与治疗、针灸神经调控效应的监测等多方面应用都开展了深入的并具有创新性的研究。这些应用分别涉及到一些神经科学中需要解决的作用机理以及诊断和治疗的难题,填补了光声脑成像在这方面应用的空白。这项PAT技术,将会被?泛应用到?动物大脑生理和病理功能的研究和实践中。这项技术有希望开启光学脑功能成像新纪元,进一步推动脑科学的完善和深化。本论文主要的研究内容汇总如下:1、设计并搭建了两套光声层析成像系统,构建了用于脑功能成像的技术平台;第二套基于阵列探测器及多通道采集的PAT系统是对第一套的全面升级。2、基于大量的文献调研和统计,对国内外用于光声分子影像与微波热声分子影像的造影剂做了非常详细的综述,还讨论了目前光声与微波热声分子影像研究中存在的问题,并指出其研究的发展方向。3、开发了一种基于针灸阳陵泉—金纳米球的新型复合光声造影剂,基于活体实验验证了该复合造影剂可以提高大脑皮层脉管系统与周围组织间的成像对比度以及成像分辨率。4、开发了基于一种对比剂溶液（PEG-GNRs）和物理辅助方法（小鼠足三里穴（ST36）针灸）相互结合的增强光声脑成像对比度及深度的策略。同时也为针灸改善药物（造影剂）传递分布、提高药物疗效的机理提供新的线索。发现了针灸可以作为一种新型的光声成像的“造影剂”。5、利用PAT技术将低剂量和高剂量黄连素对小鼠的脑血流动力学影响进行了活体实验研究。证明了黄连素能够在特定的脑功能区内引起不同程度的HbT浓度增加。验证了PAT可以成为观察药物引起的脑血流动力学响应的强有力的工具,并且可为药物浓度和剂量的选择提供一定的理论依据。6、利用PAT对胶原酶诱导出血性脑卒中这种脑疾病进行了全面的评估。PAT可对小鼠的血肿病变的形态变化,包括血肿的位置、形状和大小进行长时间的可视化监测。它还可以对血肿周围区域的血流动力学变化、血肿占位效应以及血肿占位导致血肿周围区域的缺血缺氧情况做出测绘。该研究证明了PAT技术有潜力成为监测脑卒中治疗效果的有力工具,为治疗方案的制定提供重要依据。7、基于光声层析成像/激光散斑成像这种双模态成像模式对缺血性脑卒中的诊断和针灸治疗方案进行应用研究。得到针灸阳陵泉穴位治疗脑缺血时会引起血红蛋白浓度以及血流速度的相应响应,针灸可对缺血血管扩张以及再灌注这一非常有意义的结论。该项研究证明了PAT有助于监测和评估针灸对脑卒中的疗效和作用机制。重要的是,基于两种脑卒中类型的实验研究,为PAT技术可区分缺血性脑卒中和出血性脑卒中提供强有力的证据。8、开展了部分PAT脑成像的临床前可行性验证的离体以及活体研究。利用受到脑部创伤的大鼠大脑活体实验以及恒河猴脑离体实验对光声成像技术临床前的能力进行了评估,证明了光声成像技术在新生儿脑成像方面的临床应用潜力。9、首次搭建了针灸脑科学的无创PAT动态可视化技术平台。首次基于>200例的光声脑功能成像实验对针灸引起的脑血流动力学响应绘制了全面的图谱。对小鼠周身17个穴位,每个穴位引起的对应变化都做了详细的统计。针灸每个穴位引起大脑活动的10个皮层分区都可精准定位。该技术有可能会成为解释针灸密码,书写针灸字典的重要现代望诊技术。在此过程中设计并制作了专门用作PAT成像过程中实施针灸的小鼠支架。
二、EFFECT OF ELECTROACUPUNCTURE OF SCALP-POINTS ON ABNORMAL DISCHARGES OF NEURONS AROUND THE CEREBRAL HEMORRHAGE FOCUS IN THE RAT（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、EFFECT OF ELECTROACUPUNCTURE OF SCALP-POINTS ON ABNORMAL DISCHARGES OF NEURONS AROUND THE CEREBRAL HEMORRHAGE FOCUS IN THE RAT（论文提纲范文）
（1）基于微波技术的急性紧张性痛觉脑活动信号的检测与识别方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词对照表 |
| 第一章 绪论 |
| §1.1 背景及意义 |
| §1.2 研究现状 |
| §1.2.1 痛觉脑神经活动研究现状 |
| §1.2.2 微波检测技术国内外研究现状 |
| §1.3 本文主要研究内容及主要思路 |
| §1.3.1 课题研究内容与研究思路 |
| §1.3.2 论文结构 |
| §1.3.3 课题研究主要创新点 |
| §1.4 本章小结 |
| 第二章 微波检测脑活动的基本理论 |
| §2.1 微波的特点 |
| §2.2 微波检测大脑神经活动的原理 |
| §2.2.1 电磁波传输与脑功能部位激活的关系 |
| §2.2.2 脑功能区异常活动的微波检测原理 |
| §2.3 基于脑组织的微波散射原理 |
| §2.3.1 麦克斯韦方程组 |
| §2.3.2 脑组织介电性能 |
| §2.3.3 微波传输理论 |
| §2.4 微波检测方法 |
| §2.4.1 常见的微波检测技术 |
| §2.4.2 神经接口 |
| §2.4.3 微波传输信号的采集 |
| §2.5 信号处理方法 |
| §2.5.1 特征处理 |
| §2.5.2 模式识别与评价 |
| §2.6 本章小结 |
| 第三章 微波对痛觉脑节律的影响及对痛觉的检测 |
| §3.1 引言 |
| §3.2 痛觉脑活动的微波辐射试验 |
| §3.2.1 微波辐射试验 |
| §3.2.2 数据采集及预处理 |
| §3.2.3 痛觉脑活动的微波检测试验 |
| §3.3 信号处理模型 |
| §3.3.1 痛觉EEG相对功率变化的计算 |
| §3.3.2 痛觉EEG源定位的成像方法 |
| §3.3.3 统计分析 |
| §3.4 试验结果 |
| §3.4.1 痛觉EEG相对功率变化结果 |
| §3.4.2 痛觉EEG的源成像结果 |
| §3.4.3 痛觉脑活动的微波检测结果 |
| §3.5 讨论 |
| §3.6 本章小结 |
| 第四章 熵特征表示的痛觉脑活动识别方法 |
| §4.1 引言 |
| §4.2 试验设计 |
| §4.2.1 试验设计方案 |
| §4.2.2 数据采集与预处理 |
| §4.3 特征处理及分类 |
| §4.3.1 特征提取方法 |
| §4.3.2 熵特征的提取 |
| §4.3.3 特征选择与降维 |
| §4.3.4 分类性能的评价 |
| §4.4 试验结果 |
| §4.4.1 熵特征提取结果 |
| §4.4.2 痛觉的分类评价 |
| §4.4.3 特征处理性能的对比 |
| §4.5 讨论 |
| §4.6 本章小结 |
| 第五章 多类型复合特征表示的痛觉脑活动识别方法 |
| §5.1 引言 |
| §5.2 试验设计 |
| §5.2.1 试验设计方案 |
| §5.2.2 数据采集 |
| §5.2.3 数据预处理 |
| §5.3 信号处理方法 |
| §5.3.1 多类型复合特征的计算 |
| §5.3.2 分类性能的评价 |
| §5.4 试验结果 |
| §5.4.1 平均相对能量变化提取结果 |
| §5.4.2 复合多尺度熵提取结果 |
| §5.4.3 基于Burg算法的AR系数提取结果 |
| §5.4.4 痛觉脑活动的分类结果 |
| 5.5 讨论 |
| 5.6 本章小结 |
| 第六章 深度特征表示的疼痛强度识别方法 |
| §6.1 引言 |
| §6.2 疼痛强度的试验设计 |
| §6.2.1 试验设计流程 |
| §6.2.2 数据获取与预处理 |
| §6.3 基于WPT-RF模型的疼痛强度识别方法 |
| §6.3.1 基于WPT的熵测量特征提取 |
| §6.3.2 RF分类器的设计、训练与分类 |
| §6.4 基于WPT-CNN模型的疼痛强度识别方法 |
| §6.4.1 CNN构架的设计 |
| §6.4.2 CNN模型训练 |
| §6.5 基于WPT-LSTM模型的疼痛强度识别方法 |
| §6.5.1 LSTM网络结构 |
| §6.5.2 LSTM模型训练 |
| §6.6 性能的评价 |
| §6.7 特征提取与分类结果 |
| §6.7.1 WPT-RF模型的分类结果 |
| §6.7.2 WPT-CNN模型的特征提取以及分类 |
| §6.7.3 WPT-LSTM模型的分类结果 |
| §6.8 讨论 |
| §6.9 本章小结 |
| 第七章 总结与展望 |
| §7.1 工作总结 |
| §7.2 未来展望 |
| 主要参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士期间的主要研究成果 |
（2）枕三经排刺联合三焦针法治疗脑梗死后共济失调的临床疗效观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文略缩词表 |
| 前言 |
| 第一部分 共济失调概述 |
| 1 共济失调 |
| 1.1 共济失调定义 |
| 1.2 脑梗死及脑梗死后共济失调的流行病学调查 |
| 1.3 祖国医学对共济失调的认识 |
| 1.4 现代医学对共济失调的认识 |
| 1.5 共济失调物理学机制 |
| 1.6 共济失调分类 |
| 2 小脑 |
| 2.1 解剖结构 |
| 2.2 生理功能 |
| 2.3 小脑皮质 |
| 2.4 纤维联系 |
| 技术路线图 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔除与脱落标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 样本量估算 |
| 2.2 基础治疗 |
| 2.3 针刺治疗 |
| 2.4 研究持续时间 |
| 3 观察指标 |
| 3.1 生物学指标 |
| 3.2 疗效指标 |
| 3.3 安全性指标及评价 |
| 4 统计学分析 |
| 5 研究结果 |
| 5.1 基线资料分析 |
| 5.2 共济失调疗效指标分析 |
| 5.3 安全性评定和质量观察 |
| 5.4 病例脱落与剔除情况 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 共济失调相关治疗临床研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）rTMS-FES联合刺激对脑卒中患者下肢H反射激活后抑制及足下垂的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 选题依据 |
| 1.1.1 流行病学 |
| 1.1.2 脑卒中后痉挛的发生机制与激活后抑制 |
| 1.1.3 痉挛的治疗方法 |
| 1.1.4 总结 |
| 1.2 文献综述 |
| 1.2.1 痉挛产生的机制 |
| 1.2.2 痉挛的神经电生理评定 |
| 1.2.3 rTMS缓解卒中后痉挛的相关研究 |
| 1.2.4 rTMS治疗痉挛的可能机制 |
| 1.2.5 功能性电刺激 |
| 1.2.6 小结 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.1.1 实验对象 |
| 2.1.2 纳入标准 |
| 2.1.3 排除标准 |
| 2.1.4 终止实验标准 |
| 2.1.5 病例剔除标准 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 技术路线 |
| 2.2.2 组别处理 |
| 2.2.3 测试指标 |
| 2.2.4 统计学方法 |
| 2.2.5 伦理审查 |
| 2.2.6 注意事项 |
| 2.2.7 质量控制 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 一般资料比较 |
| 3.2 CSI评分结果比较 |
| 3.3 简化Fugl-Meyer下肢部分评分结果比较 |
| 3.4 患侧踝关节主、被动活动度(ROM)结果比较 |
| 3.5 踝关节休息位角度结果比较 |
| 3.6 PAD结果比较 |
| 3.7 皮层兴奋性结果比较 |
| 3.8 下肢H反射PAD与 CSI的相关性分析 |
| 3.9 踝关节休息位角度与CSI的相关性分析 |
| 3.10 MEP引出率结果比较 |
| 4 讨论 |
| 4.1 rTMS联合FES能够改善脑卒中患者的PAD |
| 4.2 脑卒中患者下肢PAD与CSI的相关性 |
| 4.3 rTMS联合FES能够提高脑卒中患者皮层兴奋性 |
| 4.4 rTMS联合FES能够提高脑卒中患者MEP的引出率 |
| 4.5 rTMS联合FES治疗可以显着降低脑卒中患者下肢痉挛程度 |
| 4.6 FES治疗可以提高脑卒中患者下肢Fugl-Meyer评分 |
| 4.7 rTMS联合FES治疗可以改善脑卒中患者踝关节活动度 |
| 4.8 rTMS联合FES可有效重建“中枢-外周-中枢”环路 |
| 4.9 个性化调整在实验中的重要性 |
| 5 结论 |
| 6 创新性 |
| 7 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录1 缩略词表 |
| 附录2 |
| 附录3 |
| 附录4 |
| 附录5 |
| 附录6 |
| 致谢 |
| 研究生个人简历 |
（4）免疫与炎症反应在脑卒中动物模型中的影响与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstracts |
| 缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 PTx引发的炎性反应对脑卒中动物模型的影响与机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组小鼠神经功能损伤情况 |
| 2.2 各组小鼠中枢免疫细胞浸润分布 |
| 2.3 各组小鼠脑氧化应激对比 |
| 2.4 各组小鼠血脑屏障染色 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第二部分 2型固有淋巴细胞对缺血性脑卒中动物模型的影响与机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 缺血性脑卒中后小鼠脑与外周ILC2数量变化 |
| 2.2 ILC2对缺血性脑卒中小鼠神经功能与脑梗死体积的影响 |
| 2.3 缺血性脑卒中后第3天小鼠少突胶质细胞是IL-33的主要来源 |
| 2.4 IL-33能够扩增ILC2细胞数量,减少缺血性脑卒中小鼠神经功能缺损与脑梗死体积 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 脑血管病的发病机制、诊断与治疗方面的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（5）化学遗传学靶向激活运动皮层谷氨酸能神经元对脑出血小鼠运动和认知功能的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英汉缩略语名词对照 |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 构建hM3Dq-mCherry稳定表达的小鼠运动皮层谷氨酸能神经元激活动物模型及其生物学特征验证 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 化学遗传学激活运动皮层谷氨酸能神经元对脑出血小鼠运动和认知功能的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 化学遗传学激活运动皮层谷氨酸能神经元改善脑出血小鼠运动和认知功能恢复的线粒体相关机制研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 化学遗传学激活运动皮层谷氨酸能神经元改善脑出血小鼠运动和认知功能恢复的海马DG区细胞增殖相关机制研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 文献综述 脑出血治疗策略的研究现状和展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）多通道闭环电刺激系统研发及在大鼠颞叶癫痫中的应用（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写表 |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景与意义 |
| 1.2 闭环电刺激治疗癫痫的研究现状 |
| 1.3 研究内容 |
| 1.4 论文结构安排 |
| 2 小型化高性能多通道闭环刺激系统的研发 |
| 2.1 多通道闭环刺激系统硬件原理设计 |
| 2.2 多通道闭环刺激系统硬件程序设计 |
| 2.3 多通道闭环刺激系统上位机软件设计 |
| 2.4 多通道闭环刺激系统功能验证 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 多位点电刺激抑制急性颞叶癫痫的研究 |
| 3.1 多位点闭环电刺激位点选择 |
| 3.2 急性颞叶癫痫模型建立 |
| 3.3 多通道电刺激模式设计 |
| 3.4 在线癫痫检测算法设计 |
| 3.5 实验平台搭建与实验设计 |
| 3.6 实验结果 |
| 3.7 讨论与分析 |
| 3.8 本章小结 |
| 4 高能效高性能的多位点慢性癫痫长期监测研究 |
| 4.1 慢性癫痫模型建立 |
| 4.2 高能效高性能的级联癫痫检测算法设计 |
| 4.3 实验平台及实验设计 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.5 讨论与分析 |
| 4.6 本章小结 |
| 5 总结及展望 |
| 5.1 工作总结 |
| 5.2 本论文创新点 |
| 5.3 展望 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
| 攻读博士学位期间的主要研究成果 |
（7）微波热声成像技术及其在脑疾病检测中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 脑成像技术简介 |
| 1.2 微波热声成像的发展概述 |
| 1.3 本论文的研究目的和工作安排 |
| 第二章 微波热声成像理论基础 |
| 2.1 热声成像 |
| 2.1.1 热声效应 |
| 2.1.2 热声波动方程 |
| 2.2 热声成像重建算法 |
| 2.3 微波与物质的相互作用机制 |
| 2.3.1 热声压与物质介电特性的关系 |
| 2.3.2 良导体与微波的相互作用 |
| 2.3.3 电介质与微波的相互作用 |
| 2.3.4 一般有耗媒质与微波的相互作用 |
| 2.3.5 生物组织与电磁能量的互作用机制 |
| 2.4 微波热声脑成像技术 |
| 2.4.1 脑组织的介电特性 |
| 2.4.2 脑组织的声学特性 |
| 2.4.3 脑成像对热声成像技术提出的要求 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 活体微波热声成像系统设计 |
| 3.1 微波热声成像系统 |
| 3.2 微波激励系统设计 |
| 3.2.1 微波激励源 |
| 3.2.2 耦合介质选择 |
| 3.2.3 微波线缆 |
| 3.2.4 天线设计 |
| 3.2.5 SAR值与安全性 |
| 3.3 超声耦合系统设计 |
| 3.3.1 超声换能器 |
| 3.4 数据采集与控制系统设计 |
| 3.4.1 热声放大器 |
| 3.4.2 数据采集 |
| 3.4.3 系统支架及控制系统 |
| 3.4.4 连续扫描方法 |
| 3.5 适用于活体动物成像的保定装置设计 |
| 3.5.1 密封型大小鼠呼吸面罩设计 |
| 3.5.2 冠状位大鼠脑成像 |
| 3.5.3 横断位大鼠脑成像 |
| 3.6 系统参数测试 |
| 3.7 热声成像系统改进效果对比 |
| 3.8 本章小结 |
| 第四章 微波热声脑成像 |
| 4.1 具有逼真头部轮廓和可控介电特性的仿体研究 |
| 4.1.1 研究背景 |
| 4.1.2 可控介电特性的仿体制作 |
| 4.1.3 基于定量仿体的实验研究 |
| 4.1.4 逼真大鼠头部仿体的制作方法 |
| 4.1.5 含有颅骨的逼真大鼠头部仿体的制作方法 |
| 4.1.6 实验结果分析 |
| 4.1.7 小结 |
| 4.2 活体大鼠冠状位热声脑成像 |
| 4.2.1 研究背景 |
| 4.2.2 研究方法 |
| 4.2.3 结果与讨论 |
| 4.2.4 小结 |
| 4.3 幼年大鼠横断位热声脑成像 |
| 4.3.1 研究背景 |
| 4.3.2 研究方法 |
| 4.3.3 实验结果 |
| 4.3.4 讨论与小结 |
| 4.4 基于热声的新生小鼠脑部生发基质出血检测技术 |
| 4.4.1 研究背景 |
| 4.4.2 脑出血的对比度来源 |
| 4.4.3 研究方法 |
| 4.4.4 实验结果 |
| 4.4.5 讨论与小结 |
| 4.5 高强度聚焦超声引起脑组织热损伤的非侵入式热声成像 |
| 4.5.1 研究背景 |
| 4.5.2 研究方法 |
| 4.5.3 实验结果 |
| 4.5.4 讨论与小结 |
| 4.6 本章小结 |
| 第五章 基于电磁感应和热声效应的针尖可视化技术 |
| 5.1 研究背景 |
| 5.2 金属针管和针尖的对比度来源 |
| 5.3 数值仿真 |
| 5.4 针具可视化的实验研究 |
| 5.5 讨论与小结 |
| 5.6 本章小结 |
| 第六章 热声超声双模态成像 |
| 6.1 研究背景 |
| 6.2 研究方法 |
| 6.3 结果与讨论 |
| 6.4 本章小结 |
| 第七章 总结与展望 |
| 7.1 总结 |
| 7.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间取得的成果 |
（8）FCD相关难治性癫痫候选致病基因筛选及功能初探（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 FCD等相关难治性癫痫术前EEG评估初探 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 FCDII型相关癫痫全外显子测序及分析 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 FCD等病因相关难治性癫痫扩大样本外显子测序,聚焦SCARB1 基因. |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 基于癫痫动物模型探讨SCARB1 基因与癫痫发作关系 |
| 5.1 材料和方法 |
| 5.2 实验结果 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述一 局部皮质发育障碍的分类、临床、致痫机制及相关基因 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 清道夫受体B1(SCARB1)的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及获得的课题 |
| 致谢 |
（9）定痫汤加减联合丙戊酸钠治疗缺血性卒中后癫痫痰瘀阻络型及对hs-CRP影响的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 中医对缺血性卒中后癫痫认识 |
| 1.1 中医对中风的认识 |
| 1.2 中医对痫病的认识 |
| 1.3 中医对中风与痫病关系的认识 |
| 1.4 古代医家对于痰瘀致痫的认识 |
| 2 西医对缺血性卒中后癫痫的认识 |
| 2.1 流行病学研究 |
| 2.2 缺血性卒中后癫痫危险因素 |
| 2.3 缺血性卒中后癫痫发作类型 |
| 2.4 缺血性卒中后癫痫脑电图表现 |
| 2.5 缺血性卒中后癫痫发作机制 |
| 2.6 缺血性卒中后癫痫的治疗 |
| 3 血清hs-CRP与缺血性卒中后癫痫的关系 |
| 3.1 对血清hs-CRP的认识 |
| 3.2 血清hs-CRP对缺血性卒中的影响 |
| 3.3 血清hs-CRP对癫痫的影响 |
| 3.4 血清hs-CRP对缺血性卒中后癫痫的影响 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1 一般资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 病例纳入 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 分组方法 |
| 2.2 入组病人病史采集 |
| 2.3 研究指标 |
| 2.4 纳入病人基础疾病治疗 |
| 2.5 纳入病人抗癫痫治疗 |
| 2.6 不良反应 |
| 2.7 疗效评定 |
| 3 统计学方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 一般资料 |
| 4.2 临床疗效 |
| 5 讨论 |
| 5.1 导师对“痰瘀生风”理论治疗缺血性卒中后癫痫的认识 |
| 5.2 组方分析 |
| 5.3 现代药理研究 |
| 5.4 对缺血性卒中后癫痫患者血清hs-CRP影响的探讨 |
| 5.5 定痫汤加减联合丙戊酸钠治疗缺血性卒中后癫痫疗效分析 |
| 5.6 不足和展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 略缩词表 |
| 综述 定痫丸治疗癫痫的研究新进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（10）脑功能和针灸脑图谱光声成像技术（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 脑功能检测技术发展概况及现状 |
| 1.2 脑功能光声层析成像技术发展概况及现状 |
| 1.2.1 光声层析成像技术简介 |
| 1.2.2 脑功能光声层析成像技术发展概况及研究现状简介 |
| 1.2.3 多尺度光声脑成像简介 |
| 1.2.4 活动和静息状态下的功能性光声脑成像研究简介 |
| 1.3 光声层析成像技术在针灸神经调控中研究价值 |
| 1.4 本论文研究意义和创新点及主要内容 |
| 第二章 光声成像技术理论基础与系统搭建 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 光声效应 |
| 2.2.1 经验描述 |
| 2.2.2 严格理论描述 |
| 2.3 光声成像图像重建算法 |
| 2.3.1 一维深度信息和B扫描图像重建算法 |
| 2.3.2 延迟叠加图像重建算法 |
| 2.3.3 非线性迭代重建算法 |
| 2.4 光声层析成像实验系统简介 |
| 2.4.1 基于单元超声换能器的环形扫描光声层析成像系统 |
| 2.4.2 基于阵列超声换能器的光声层析成像系统 |
| 2.4.3 激光源 |
| 2.4.4 半环形阵列超声换能器 |
| 2.4.5 控制电路与数据采集模块 |
| 2.5 光声层析成像性能影响因素 |
| 2.5.1 图像空间分辨率的影响因素 |
| 2.5.2 成像深度的影响因素 |
| 2.6 本章小结 |
| 第三章 基于造影剂的光声分子影像实验研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 用于光声与微波热声成像的造影剂综述 |
| 3.2.1 光声分子影像造影剂 |
| 3.2.2 多模态影像中的复合材料应用 |
| 3.2.3 光声造影剂在诊疗一体化中的应用 |
| 3.2.4 微波热声分子影像造影剂 |
| 3.3 基于金纳米颗粒的仿体和离体实验研究 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 针灸阳陵泉辅助金纳米球对大脑光声对比度的增强作用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 实验系统 |
| 4.2.3 造影剂：金纳米球型颗粒 |
| 4.2.4 针灸穴位选取 |
| 4.2.5 实验操作 |
| 4.2.6 统计分析方法 |
| 4.3 基于针灸辅助造影剂的方法对小鼠大脑进行光声成像的实验研究 |
| 4.3.1 对照组实验结果 |
| 4.3.2 针灸组实验结果 |
| 4.3.3 复合组实验结果 |
| 4.3.4 统计结果分析 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 基于足三里针灸和金纳米棒的新型复合光声造影剂 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料和方法 |
| 5.2.1 实验动物 |
| 5.2.2 实验系统 |
| 5.2.3 金纳米棒颗粒 |
| 5.2.4 针灸穴位选取 |
| 5.2.5 实验操作 |
| 5.2.6 统计分析 |
| 5.3 结果及讨论 |
| 5.3.1 金纳米棒注射对光声脑成像的影响 |
| 5.3.2 针灸足三里穴位对光声脑成像的影响 |
| 5.3.3 复合外部刺激对光声脑成像的影响 |
| 5.3.4 统计结果分析 |
| 5.4 本章小结 |
| 第六章 PAT监测黄连素对脑血流动力学影响的实验研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 研究内容简介 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 实验动物以及实验操作方法 |
| 6.3.2 黄连素的制备和给药法 |
| 6.3.3 PAT实验系统简介 |
| 6.3.4 脑功能分区模板以及图像处理 |
| 6.3.5 统计分析方法 |
| 6.4 结果与讨论 |
| 6.5 本章小结 |
| 第七章 光声层析成像技术监测出血性脑卒中的实验研究 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 研究背景 |
| 7.3 实验方法 |
| 7.3.1 实验动物 |
| 7.3.2 脑出血模型造模方法 |
| 7.3.3 实验系统 |
| 7.3.4 多光谱重建算法 |
| 7.3.5 出血面积计算方法 |
| 7.3.6 统计分析方法 |
| 7.4 实验结果 |
| 7.4.1 基于750nm波长的出血性脑卒中实验研究 |
| 7.4.2 基于多波长的出血性脑卒中实验研究 |
| 7.4.3 基于双波长的定量光声成像实验研究 |
| 7.4.4 统计结果分析 |
| 7.5 本章小结 |
| 第八章 PAT及 LSI双模态技术监测针灸治疗缺血性脑卒中 |
| 8.1 引言 |
| 8.2 实验方法 |
| 8.2.1 实验动物造模方法以及操作方法 |
| 8.2.2 PAT/LSI双模态实验系统简介 |
| 8.2.3 穴位选取 |
| 8.3 针灸治疗缺血性脑卒中的实验结果 |
| 8.4 本章小结 |
| 第九章 光声脑功能成像技术临床前可行性实验研究 |
| 9.1 引言 |
| 9.2 项目提出的背景 |
| 9.3 实验方法 |
| 9.3.1 实验动物 |
| 9.3.2 实验系统 |
| 9.4 大鼠脑出血PAT成像实验结果 |
| 9.4.1 案例1 |
| 9.4.2 案例2 |
| 9.4.3 案例3 |
| 9.4.4 案例4 |
| 9.5 基于恒河猴头盖骨的PAT离体成像实验 |
| 9.6 PAT在新生儿脑功能成像方面的可行性应用调研 |
| 9.7 本章小结 |
| 第十章 活体大脑皮层针灸光声脑图谱 |
| 10.1 引言 |
| 10.2 实验方法 |
| 10.2.1 实验动物以及操作方法 |
| 10.2.2 实验系统简介 |
| 10.2.3 穴位选取以及模板绘制 |
| 10.3 结果分析 |
| 10.4 本章小结 |
| 第十一章 结论和展望 |
| 11.1 本论文研究总结 |
| 11.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间取得的成果 |
四、EFFECT OF ELECTROACUPUNCTURE OF SCALP-POINTS ON ABNORMAL DISCHARGES OF NEURONS AROUND THE CEREBRAL HEMORRHAGE FOCUS IN THE RAT（论文参考文献）
- [1]基于微波技术的急性紧张性痛觉脑活动信号的检测与识别方法研究[D]. 耿道双. 桂林电子科技大学, 2021(02)
- [2]枕三经排刺联合三焦针法治疗脑梗死后共济失调的临床疗效观察[D]. 黄雯. 天津中医药大学, 2021(01)
- [3]rTMS-FES联合刺激对脑卒中患者下肢H反射激活后抑制及足下垂的影响[D]. 姜帅. 天津体育学院, 2021(12)
- [4]免疫与炎症反应在脑卒中动物模型中的影响与机制研究[D]. 赵慧. 山西医科大学, 2020(01)
- [5]化学遗传学靶向激活运动皮层谷氨酸能神经元对脑出血小鼠运动和认知功能的影响及机制研究[D]. 凌文远. 河北医科大学, 2020(01)
- [6]多通道闭环电刺激系统研发及在大鼠颞叶癫痫中的应用[D]. 郑永特. 浙江大学, 2020(01)
- [7]微波热声成像技术及其在脑疾病检测中的应用研究[D]. 赵渊. 电子科技大学, 2020(07)
- [8]FCD相关难治性癫痫候选致病基因筛选及功能初探[D]. 杨梅华. 中国人民解放军陆军军医大学, 2019(03)
- [9]定痫汤加减联合丙戊酸钠治疗缺血性卒中后癫痫痰瘀阻络型及对hs-CRP影响的临床研究[D]. 吴琼. 广西中医药大学, 2019(03)
- [10]脑功能和针灸脑图谱光声成像技术[D]. 吴丹. 电子科技大学, 2019(01)